尾加壓素II介導(dǎo)卵圓細(xì)胞增殖的機(jī)制探討

禹曉童，王鵬雁，王紅霞，王學(xué)江△(首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，北京00069;北京協(xié)和醫(yī)院病理科，北京0003)

尾加壓素II介導(dǎo)卵圓細(xì)胞增殖的機(jī)制探討

禹曉童1，王鵬雁2，王紅霞1，王學(xué)江1△
(1首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，北京100069;2北京協(xié)和醫(yī)院病理科，北京100032)

目的:探討尾加壓素II(UII)對(duì)肝臟干細(xì)胞即卵圓細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的影響及其參與UII促細(xì)胞增殖的機(jī)制探討。方法:通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)，應(yīng)用DCFH-DA探針檢測(cè)UII孵育卵圓細(xì)胞WB-F344后，胞內(nèi)ROS水平變化。通過(guò)Western blot方法檢測(cè)胞內(nèi)NADPH氧化酶亞基、細(xì)胞周期蛋白E、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2及信號(hào)通路蛋白ERK表達(dá)水平。采用流式細(xì)胞術(shù)方式分析UII對(duì)于細(xì)胞周期的影響。應(yīng)用BrdU摻入法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。結(jié)果: UII刺激卵圓細(xì)胞可引起胞內(nèi)ROS水平增加，同時(shí)NADPH氧化酶亞基表達(dá)上調(diào)。給予NADPH氧化酶抑制劑apocynin預(yù)處理后，明顯改善UII介導(dǎo)的ERK磷酸化水平升高。此外，UII孵育組細(xì)胞周期比例S期明顯高于G1期，而apocynin預(yù)處理組S期比例較UII刺激組有所降低，且細(xì)胞增殖檢測(cè)結(jié)果顯示apocynin預(yù)處理可使UII介導(dǎo)的促細(xì)胞增殖效應(yīng)受到明顯抑制。結(jié)論: UII可通過(guò)上調(diào)細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶介導(dǎo)ROS增加，繼而促進(jìn)ERK激活以及加速細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，參與UII促細(xì)胞增殖作用。

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