DNA甲基化參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中MGMT基因的表達(dá)調(diào)控

陳月霞，齊宏妍(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理與病理生理學(xué)教研室，浙江杭州310058)

DNA甲基化參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中MGMT基因的表達(dá)調(diào)控

陳月霞，齊宏妍△
(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理與病理生理學(xué)教研室，浙江杭州310058)

目的:研究O6-甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)在N-甲基亞硝基脲(MNU)誘導(dǎo)的人胃正常黏膜上皮細(xì)胞GES-1惡性轉(zhuǎn)化中的表達(dá)變化，明確其轉(zhuǎn)錄激活的分子機(jī)制。方法:建立MNU誘導(dǎo)的GES-1細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化模型，動(dòng)態(tài)分析MGMT的表達(dá)、啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄激活、DNA甲基化、組蛋白修飾變化及其表達(dá)改變?cè)贕ES-1細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中的作用。結(jié)果: MNU暴露持續(xù)激活MGMT的表達(dá)。MGMT高表達(dá)細(xì)胞的增殖和克隆形成能力顯著下降。甲基化特異性PCR顯示MGMT基因甲基化水平下降，亞硫酸氫鹽基因組測(cè)序證實(shí)其啟動(dòng)子區(qū)呈顯著低甲基化。免疫共沉淀分析發(fā)現(xiàn)DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT1)與MGMT基因的結(jié)合減少，組蛋白特異性修飾H3K9met3和H3K4met2均參與調(diào)控其表達(dá)。結(jié)論: MGMT的表達(dá)上調(diào)抑制化學(xué)致癌劑MNU誘導(dǎo)的細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，MGMT的持續(xù)激活依賴于其啟動(dòng)子區(qū)DNA的低甲基化。

△E-mail: qihongyan@zju.edu.cn