金絲桃素介導(dǎo)的聲動(dòng)力誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡和自噬的機(jī)制研究*

李雪松，鄭龍彬，寇佳媛，田　野，△，楊力明△(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，黑龍江哈爾濱5008;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，黑龍江哈爾濱5000)

金絲桃素介導(dǎo)的聲動(dòng)力誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡和自噬的機(jī)制研究*

李雪松1，鄭龍彬1，寇佳媛1，田野1，2△，楊力明1△
(1哈爾濱醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，黑龍江哈爾濱150081;2哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，黑龍江哈爾濱150001)

目的:探討金絲桃素結(jié)合低頻超聲(HY-SDT)對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的作用及機(jī)制研究。方法:激光共聚焦檢測細(xì)胞內(nèi)HY定位、活性氧(ROS)產(chǎn)生、線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP)開放和LC3表達(dá)。熒光顯微鏡觀察線粒體膜電位(MMP)。Hoechst-PI染色、透射電鏡和流式細(xì)胞術(shù)觀察自噬與凋亡。Western blot(WB)檢測Bax與cytochrome C轉(zhuǎn)位以及凋亡與自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果: HY在THP-1巨噬細(xì)胞的細(xì)胞核和線粒體等細(xì)胞器均有分布。HY-SDT后2 h細(xì)胞內(nèi)自噬增加; 6 h細(xì)胞存活率下降，凋亡率、ROS和MDA升高，MMP降低，自噬抑制劑3MA導(dǎo)致凋亡率進(jìn)一步升高。WB顯示SDT后早期LC3-II 和Beclin 1表達(dá)增多，隨后Bax和cytochrome C發(fā)生轉(zhuǎn)位，Bcl-2下調(diào)，線粒體-caspase凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)增多。NAC可明顯抑制ROS增加、MMP下降、mPTP開放和凋亡自噬相關(guān)蛋白的變化。結(jié)論: HY-SDT通過產(chǎn)生ROS早期增加自噬，隨后促凋亡因子Bax從胞漿轉(zhuǎn)位錨定在線粒體上，增加Bax/Bcl-2比值，誘導(dǎo)mPTP開放，釋放cytochrome C，從而誘導(dǎo)凋亡。

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81271734; No.81000688)

△楊力明E-mail: limingyang@ems.hrbmu.edu.cn;田野E-mail: yetian@ems.hrbmu.edu.cn