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硫化氫在低剪切應力導致內皮細胞自噬障礙中的作用

2015-01-26 04:36:31唐志晗危當恒任曉晴肖衛晉劉錄山姜志勝南華大學心血管疾病研究所動脈硬化學湖南省重點實驗室湖南衡陽421001
中國病理生理雜志 2015年10期
關鍵詞:檢測

唐 蕙,唐志晗,任 重,彭 娟,危當恒,任曉晴,肖衛晉,劉錄山,姜志勝(南華大學心血管疾病研究所,動脈硬化學湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)

硫化氫在低剪切應力導致內皮細胞自噬障礙中的作用

唐蕙,唐志晗,任重,彭娟,危當恒,任曉晴,肖衛晉,劉錄山,姜志勝△
(南華大學心血管疾病研究所,動脈硬化學湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)

目的:探討硫化氫在低剪切應力誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)自噬障礙中的作用。方法: HUVECs經培養傳代分為3組:對照組、低剪切應力組(5 dyn/cm2)和正常剪切應力組(15 dyn/cm2)。在平板流動腔上對內皮細胞進行剪切應力處理,Western blot檢測CSE蛋白水平,RT-PCR檢測CSE的mRNA含量,熒光顯微鏡MDC染色觀察自噬表泡,免疫熒光檢測LC3表達,Western blot檢測Beclin1LC3p62蛋白水平,以評估不同剪切應力下,誘導HUVECs自噬障礙過程中內源性H2S生成的變化。接下來用CSE干擾siRNA及CSE過表達質粒分別轉染HUVECs后,再分別用5/15 dyne/cm2處理1 h,測自噬表達情況。結果: WB結果顯示,與正常剪切應力組相比,低剪切應力組CSE表達明顯減少。Beclin1及LC3表達減少,p62表達增高,免疫熒光結果顯示低剪切應力組LC3表達減少。提示低剪切應力組自噬障礙。結論:低剪切應力誘導的人臍靜脈內皮細胞存在自噬障礙,其與CSE表達降低相關。

△E-mail: zsjiang2005@163.com

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