心臟干細胞可通過旁分泌exosome保護心肌細胞發生凋亡

肖　靜，潘　宇，李曉紅，吳岳恒，姜　霖，楊翔宇，余細勇，△(廣東省人民醫院，廣東省醫學科學院醫學研究中心，廣東廣州50080;南方醫科大學，廣東廣州5055;廣州醫科大學藥學院，廣東廣州546)

心臟干細胞可通過旁分泌exosome保護心肌細胞發生凋亡

肖靜1，2，潘宇1，李曉紅1，吳岳恒1，姜霖1，2，楊翔宇1，2，余細勇1，3△
(1廣東省人民醫院，廣東省醫學科學院醫學研究中心，廣東廣州510080;2南方醫科大學，廣東廣州510515;3廣州醫科大學藥學院，廣東廣州511436)

心臟干細胞移植在心肌梗死治療中具有廣泛應用，外泌體(exosome)被認為是細胞旁分泌的重要介質。本研究擬建立心臟固有干細胞(CPCs)的成熟分離方法，并初步探索CPCs分泌的exosome在體外保護氧化應激狀態下心肌細胞的凋亡。原代分離培養鑒定Sca-1 + CPCs，離心加試劑盒分離出CPCs分泌的exosome，并進行表型鑒定和粒徑分析;將心肌細胞分成對照組與CPC-exo預處理組，用H2O2處理心肌細胞誘導其凋亡，Western blot (WB)檢測cleaved caspase-3蛋白水平。結果顯示:磁珠分選出的細胞用免疫熒光檢測發現Sca-1呈現陽性表達，流式細胞術提示分選前和分選后Sca-1陽性細胞的比例差異具有統計學意義(n =3，P＜0. 01) ; CPCs來源的exosome，WB結果提示其CD63表達陽性;體外凋亡保護的WB結果顯示，加了CPC-exo的細胞凋亡狀態明顯改善，且相關蛋白表達顯著降低(P＜0. 05)。因此，心臟干細胞可以分泌出攜帶有重要信息物質的exosome，能在體外保護心肌細胞，避免其發生凋亡，為臨床心梗等疾病提供全新的治療策略。

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