載脂蛋白A-Ⅰ模擬肽Reverse-D-4F提高高脂飲食小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量和功能*

展恩欣，范浩昌，楊娜娜，秦樹存△(泰山醫(yī)學(xué)院動脈粥樣硬化研究所，護(hù)理學(xué)院，山東泰安7000)

載脂蛋白A-Ⅰ模擬肽Reverse-D-4F提高高脂飲食小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量和功能*

展恩欣1，2，范浩昌1，楊娜娜1，秦樹存1，2△
(泰山醫(yī)學(xué)院1動脈粥樣硬化研究所，2護(hù)理學(xué)院，山東泰安271000)

目的:研究載脂蛋白A-Ⅰ模擬肽Reverse-D-4F(Rev-D4F)對高脂飲食C57BL/6J小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)動員和EPCs功能的影響。方法:6周齡C57小鼠分為正常飲食、正常飲食并注射Rev-D4F、高脂飲食和高脂飲食并注射Rev-D4F四組。流式細(xì)胞術(shù)等檢測外周血細(xì)胞亞群和細(xì)胞因子的數(shù)量;免疫熒光法測定Sca-1、c-Kit等的表達(dá); MTT等方法檢測EPCs的增殖、遷移及體外成血管功能。Western blotting檢測p-eNOS、p-AKT等蛋白的表達(dá)。結(jié)果:高脂飲食明顯降低了EPCs的數(shù)量、遷移功能及白細(xì)胞中淋巴細(xì)胞的比例，但明顯增加了C57小鼠血漿白細(xì)胞及白細(xì)胞中單核細(xì)胞的數(shù)量及血管內(nèi)皮生長因子和TNF-α的水平。Rev-D4F明顯抑制了高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠血漿外周血細(xì)胞亞群數(shù)量及細(xì)胞因子水平的改變。體外實驗表明TNF-α抑制EPCs增殖、遷移和成血管的功能，并降低AKT及eNOS的活性; Rev-D4F能夠修復(fù)TNF-α對EPCs功能的損傷，激活A(yù)KT 及eNOS; PI3K抑制劑LY294002(30 μmol/L)則明顯抑制Rev-D4F對AKT和eNOS的作用，并抑制了Rev-D4F對TNF-α誘導(dǎo)的EPCs損傷的修復(fù)作用。結(jié)論: Rev-D4F提高高脂飲食C57小鼠外周血EPCs的數(shù)量與SDF-1α水平升高及TNF-α水平增加相關(guān)，Rev-D4F可能通過PI3K/AKT/eNOS信號通路修復(fù)TNF-α誘導(dǎo)的EPCs功能損傷。

國家自然科學(xué)基金資助項目(No.30971098) ;山東省自然科學(xué)基金資助項目(No.ZR2012HL18)

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