激活毒蕈堿乙酰膽堿受體經claudin-4調控下頜下腺旁細胞途徑的通透性

叢　馨，張　艷，吳立玲△，俞光巖(北京大學醫學部生理學與病理生理學系，口腔醫學院，北京0087)

激活毒蕈堿乙酰膽堿受體經claudin-4調控下頜下腺旁細胞途徑的通透性

叢馨1，張艷1，吳立玲1△，俞光巖2
(北京大學1醫學部生理學與病理生理學系，2口腔醫學院，北京100871)

目的:探討激活毒蕈堿乙酰膽堿受體(mAChR)能否經調控緊密連接而促進下頜下腺的分泌。方法:跨上皮細胞電阻(TER)和旁細胞通透性實驗評價緊密連接的功能; Western blot和免疫熒光檢測緊密連接的表達和分布;轉染claudin-4 shRNA 或cDNA觀察claudin-4對緊密連接功能的影響。免疫共沉淀檢測相關信號通路。結果: mAChR激動劑卡巴膽堿可降低下頜下腺細胞TER值，并增加旁細胞途徑通透性。卡巴膽堿可下調claudin-4的表達和分布，但不影響其它緊密連接分子。敲低claudin-4可使卡巴膽堿降低TER值的作用消失;而在過表達claudin-4細胞中，卡巴膽堿仍能降低TER值和claudin-4表達。卡巴膽堿可經細胞外信號調節激酶1/2(ERK1/2)促進claudin-4絲氨酸磷酸化。磷酸化的claudin-4可與β-arrestin2結合，招募clathrin引起claudin-4發生內化，并進一步在胞漿中被泛素化降解。結論:激活mAChR通過ERK1/2/β-arrestin2/clathrin/泛素化途徑下調claudin-4的表達，進而增加旁細胞途徑的通透性。

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