ATR-CHK1-E2F3轉(zhuǎn)錄激活RRM2參與MNNG引起的DNA損傷修復(fù)

宮朝舉，邵吉民(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理與病理生理學(xué)教研室，浙江杭州310058)

ATR-CHK1-E2F3轉(zhuǎn)錄激活RRM2參與MNNG引起的DNA損傷修復(fù)

宮朝舉，邵吉民△
(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理與病理生理學(xué)教研室，浙江杭州310058)

目的:研究環(huán)境致癌物甲基硝基亞硝基胍(MNNG)轉(zhuǎn)錄激活人核糖核苷酸還原酶小亞基M2(RRM2)參與DNA損傷修復(fù)的分子機(jī)制。方法和結(jié)果: MNNG刺激顯著激活RRM2基因的表達(dá)。γ-H2AX、細(xì)胞周期分布及凋亡的改變顯示表達(dá)上調(diào)的RRM2轉(zhuǎn)位入核參與DNA損傷修復(fù)。通過(guò)RRM2啟動(dòng)子探針介導(dǎo)的DNA pulldown、LC-MS/MS及ChIP-PCR分析發(fā)現(xiàn)MNNG刺激后，E2F3直接結(jié)合到RRM2啟動(dòng)子上，激活其表達(dá)。另外，轉(zhuǎn)錄因子NFY與E2F3相互作用，增強(qiáng)MNNG誘導(dǎo)的RRM2轉(zhuǎn)錄激活。MNNG處理上調(diào)E2F3蛋白水平依賴于ATR-CHK1信號(hào)通路介導(dǎo)的其S124位磷酸化。結(jié)論: MNNG通過(guò)激活A(yù)TR/ CHK1磷酸化E2F3 S124，增加其蛋白穩(wěn)定性。上調(diào)的E2F3與NFY轉(zhuǎn)錄共調(diào)控RRM2基因的表達(dá)，參與DNA損傷修復(fù)過(guò)程。

△E-mail: shaojimin@zju.edu.cn