腺苷酸活化蛋白激酶經claudin-4調控頜下腺分泌的機制研究

向若蘭，梅　梅，叢　馨，李　靜，丁　沖，吳立玲△，俞光巖△(北京大學醫學部生理學與病理生理學系，北京大學口腔醫學院口腔頜面外科，北京大學口腔醫院中心實驗室，北京00087)

腺苷酸活化蛋白激酶經claudin-4調控頜下腺分泌的機制研究

向若蘭1，梅梅2，叢馨1，李靜2，丁沖3，吳立玲1△，俞光巖2△
(1北京大學醫學部生理學與病理生理學系，2北京大學口腔醫學院口腔頜面外科，3北京大學口腔醫院中心實驗室，北京1000871)

目的:緊密連接是調控頜下腺分泌的重要途徑，但其機制尚不清楚。本研究探討腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)經緊密連接分子claudin-4調控頜下腺分泌的作用機制。方法:選用AMPK激動劑AICAR刺激SMG-C6細胞，檢測跨上皮電阻(TER)的改變，Western blot檢測相關信號分子表達的改變，免疫共沉淀檢測claudin-4分子的磷酸化，免疫熒光觀察claudin-4分子的分布。結果:用AICAR刺激SMG-C6細胞顯著降低TER值，提示AMPK激活增加了SMG-C6細胞旁細胞通透性。AICAR特異性誘導claudin-4分子從細胞膜向細胞漿轉位。AICAR刺激顯著增強了SMG-C6細胞ERK磷酸化，使用ERK1/2抑制劑U0126 和ERK1/2 siRNA后抑制了AICAR對TER的影響。免疫共沉淀結果顯示AICAR激活claudin-4絲氨酸199位點的磷酸化并且增加了claudin-4和occludin之間的相互作用。結論: AMPK激活后通過調節claudin-4分子的磷酸化及分布增加了SMG-C6細胞緊密連接的通透性，促進頜下腺的分泌，該作用可能通過ERK信號通路。

△E-mail: xiangrl@bjmu.edu.cn