李春 張龍 劉虎 李巍松
230022安徽醫科大學第一附屬醫院1
130000吉林大學白求恩第一醫院2
高壓氧對隨意擴張皮瓣成活的影響
李春1張龍2劉虎1李巍松1
230022安徽醫科大學第一附屬醫院1
130000吉林大學白求恩第一醫院2
目的:探討高壓氧對豚鼠超長隨意擴張皮瓣成活率的影響。方法:將英國中型白毛豚鼠30只隨機分為兩組(高壓氧組和對照組),每組各15只,分別給予高壓氧干預處理與不處理。術后9 d計算各組皮瓣的存活面積比,取皮瓣中段組織計算新生微血管數量,以免疫組化法檢測CD34表達的差異。結果:高壓氧組皮瓣的存活面積百分比(70.04±0.04)%,高于對照組的(41.07±0.02)%,P<0.05。高壓氧組每高倍鏡血管數(14.62±6.53),高于對照組的(7.79±2.12),P<0.05。結論:高壓氧可以改善皮瓣血供,進而提高擴張皮瓣的存活。
微血管密度;擴張后轉移皮瓣;高壓氧
大面積皮膚缺損在臨床醫療中頗為常見,通常由于巨大腫瘤或瘢痕治療后的創面缺損、皮膚多發感染等導致,就目前臨床治療而言,通常通過人工材料、植皮或者擴張周圍皮瓣來覆蓋缺損。本研究的目的是探討其對隨意擴張皮瓣成活影響的實驗研究,現報告如下。
實驗動物與分組:中型白毛豚鼠,體重450~550 g,雄性豚鼠,身長24~28 cm,飼養溫度控制在20~25℃。共30只豚鼠,分為A組和B組,每組15只。A組高壓氧組(實驗組),B組對照組,分籠飼養。
實驗步驟:①注水擴張過程:a.脫毛處理:利用動物脫毛劑處理豚鼠背部皮膚,使豚鼠整個背部暴露。b.手術過程:麻醉后,分離美蘭標記擴張器埋入區域,約4 cm×6 cm切口深達肉膜層下。c.注水過程:A、B組各注入總量40 mL生理鹽水于擴張器中,2~3 mL/d,分10次擴張完成。②皮瓣成形術:注水過程完畢后,于豚鼠背部已擴張皮膚上設計超長隨意皮瓣,比例1:3,長度設定在4.5 cm,寬度設定1.5 cm。a.A組:皮瓣成形術后當天行高壓氧治療1次,1次/d,于手術當天結束后持續至術后第9天結束。b.B組(對照組):不進行高壓氧治療。術后當天即將A組動物于高壓氧艙內治療100 min,壓力控制在2.6 ATA左右,直至皮瓣成形術后9 d。
觀察指標:①大體標本觀察:觀察術后即刻、3 d、6 d、9 d,觀察皮瓣蒂部<1.5 cm、1.5~3 cm、3~4.5 cm各皮瓣段皮瓣的成活情況,包括顏色、質地、彈性等情況,記錄第9天的皮瓣成活面積,標準尺記錄數值。②HE染色:主要觀察皮瓣中炎細胞浸潤、表皮生長及肉芽生長情況等。③血管密度檢測(MVD):CD34免疫組化(SP法)。結果運用SPSS 14.0統計軟件進行數據分析與結果對比,判斷有無差異性。
大體觀察:兩組皮瓣在術后3 d、6 d、9 d A組皮瓣的顏色、質地、彈性、血運及壞死面積都遠較B組好,高壓氧組與對照組皮瓣的存活面積百分比分別為(70.04±0.04)%、(41.07±0.02)%,高壓氧組顯著高于對照組,經方差分析,差異有統計學意義(P=0.001,P<0.05)。
HE染色:A組皮瓣3~4.5 cm段皮瓣完全壞死,有大量炎癥細胞聚集,但存活皮瓣皮膚略水腫,皮下真皮層內可見大量新生微血管生成,可見少量炎癥細胞,而B組皮瓣存活段皮膚水腫嚴重,皮下新生微血管少,炎癥細胞多。
MVD:分別隨機選取10個高倍鏡視野,圈出所有血管,取每高倍鏡下所見血管數/高倍鏡下視野組織面積,進行數據記錄。各組CD34陽性量累積每高倍鏡血管截面數量值分別為A組(14.62± 6.53),方差26.66,B組(7.79±2.12),方差9.85,經方差分析,差異有統計學意義(P=0.0001,P<0.05)。
臨床實際運用當中,皮瓣遠端大面積壞死讓臨床醫生產生困擾。眾所周知,誕生于17世紀的高壓氧可以促進皮瓣血液循環,高壓氧可使缺血再灌損傷減輕,抑制細胞凋亡,減少組織滲出,抑制細菌再生,提高機體抵抗力[1~3]。促進細胞生長,促進組織修復和促進功能恢復是高壓氧的康復治療作用。故本文旨在以上高壓氧的作用下,將高壓氧運用于隨意擴張皮瓣成形術后,觀察其是否能改善隨意擴張皮瓣的血運,提高皮瓣成活率及質地、顏色、黏彈性等等。
本實驗通過對實驗動物皮膚的大體觀察、HE切片觀察以及血管密度的檢測來客觀證明了高壓氧可以提高皮瓣成活率。主要表現在以下三個方面:①AB兩組皮瓣在壞死程度上相差很大,A組皮瓣近遠端的成活率明顯高于B組。②利用CD34標記的新生微血管密度,A組遠多于B組[4,5]。③在光鏡下對比AB兩組皮瓣表皮及皮下情況,A組炎癥細胞少,表皮更厚,肉芽組織更多,水腫亦不明顯,而B組則相反。以上方面說明,高壓氧可以促進擴張皮瓣的缺血在關注損傷,改善皮瓣質地及彈性,減輕組織水腫,增加皮瓣的抗感染能力,促進大量新生血管的生長,進而提高擴張皮瓣的成活率,改善皮膚質量。
高壓氧已進入臨床多年,但運用于擴張皮瓣治療的個案不多,本實驗較有力地證明了其對擴張皮瓣成活率的積極影響,為其廣泛運用于臨床邁出了堅實的理論基礎。當然,本實驗對高壓氧治療皮瓣的最適合壓力、時間、頻率還不得而知,長時間進行氧療與有可能出現氧中毒的現象有關。對此,將在以后的實驗中進一步闡明,使高壓氧更好、更準確地服務于臨床治療中。
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Effect of hyperbaric oxygen on the survival of random expanded skin flaps
Li Chun1,Zhang Long2,Liu Hu1,Li Weisong1
The First Affiliated Hospital of Medical University Of Anhui 2300221
Bethune First Hospital of Jilin University 1300002
Objective:To investigate the effect of hyperbaric oxygen on the survival rate of the ultra long random expanded skin flaps in guinea pigs.Methods:30 British medium-sized white guinea pigs were randomly divided into two groups(the hyperbaric oxygen group and the control group)with 15 cases in each,they were given hyperbaric oxygen intervention and no intervention respectively.After 9 days,we calculated the survival area of the skin flap of each group,calculated the number of new blood vessels in the middle of the skin flap,and detected the differences in expression of CD34 by immunohistochemical method.Results:In hyperbaric oxygen group,the percentage of survival area of skin flap with(70.04±0.04)%was higher than(41.07±0.02)%of the control group,P<0.05.In hyperbaric oxygen group,the number of vessels at each high power mirror of(14.62±6.53)was higher than(7.79±2.12)of the control group,P<0.05.Conclusion:Hyperbaric oxygen can improve the blood supply of the skin flap,and then increase the survival of the expanded skin flap.
Microvessel density;Transfer skin flap after expansion;Hyperbaric oxygen
10.3969/j.issn.1007-614x.2015.33.1