食管鱗癌中核轉錄因子-κB和CXCR4的表達及意義

王永霞 趙 迪 湯 政 李道明 (新鄉醫學院病理學教研室，河南 新鄉 4500)

食管鱗癌中核轉錄因子-κB和CXCR4的表達及意義

王永霞 趙 迪1湯 政2李道明3(新鄉醫學院病理學教研室，河南 新鄉 453003)

目的 探討核轉錄因子-κB(NF-κB)和CXCR4在食管鱗癌發生、發展中的作用。方法 應用免疫組化SP法檢測124例食管鱗癌組織、62例癌旁不典型增生組織及62例正常食管組織中NF-κB和CXCR4蛋白的表達情況。結果 NF-κB和CXCR4蛋白在正常食管黏膜、癌旁不典型增生組織和食管鱗癌組織中的陽性表達率逐漸增高(P＜0.05)。NF-κB和CXCR4蛋白的表達與食管鱗癌的浸潤深度和淋巴結轉移情況均密切相關(P＜0.05)，而與患者的性別、年齡無顯著相關性(P＞0.05)，同時NF-κB和CXCR4蛋白表達間呈正相關關系(P＜0.05)。結論 NF-κB和CXCR4的高表達與食管鱗癌的發生及浸潤、轉移密切相關，二者可能協同促進了食管鱗癌的轉移。

食管鱗癌;核轉錄因子-κB;趨化因子受體CXCR4;癌變;浸潤;轉移

食管癌是我國常見的惡性腫瘤之一，特別是豫北地區，其發病率居世界第一位，而癌組織的浸潤轉移是導致患者死亡主要原因〔1〕。目前有關食管癌浸潤轉移機制的研究已成為熱點。本研究采用免疫組織化學方法檢測食管鱗癌、癌旁正常組織及不典型增生組織中NF-κB和CXCR4的表達情況，并分析二者與食管鱗癌臨床病理參數關系及兩者之間相關性的分析，探討它們的表達在食管鱗癌發生、浸潤及轉移中的作用，為患者的預后判斷提供有價值的分子生物學指標。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集新鄉醫學院第三附屬醫院2008年1月至2012年3月食管癌手術切除標本存檔蠟塊，患者術前均無化療、放療及免疫治療史。共納入124例食管癌患者，男66例，女58例，年齡38～75〔平均(60.6±9.5)〕歲。HE染色已證實124例食管癌標本均為鱗狀細胞癌，其中，Ⅰ級30例，Ⅱ級50例，Ⅲ級44例;有淋巴結轉移組84例，無淋巴結轉移組40例。淺層浸潤組18例，腫瘤浸潤深度在黏膜層或黏膜下層;深層浸潤組106例，腫瘤浸潤深度在肌層或外膜層。62例癌旁組織及切端正常組織已證實為不典型增生及正常食管黏膜組織。

1.2 主要試劑及方法 免疫組織化學SP法，鼠抗人NF-κBp65單克隆抗體濃縮液為美國Santa Cruz公司產品，購自北京中杉金橋生物有限公司，工作濃度為1∶50。兔抗人CXCR4多克隆抗體濃縮液艾美捷科技有限公司，工作濃度為1∶50。SP試劑盒及DAB顯色劑均購自福州邁新生物有限公司。實驗參照試劑盒說明書進行，PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判斷標準 NF-κB蛋白以胞核著棕黃、棕褐色為陽性表達。CXCR4陽性著色主要位于胞質。每張切片取10個高倍視野，計算陽性細胞百分數，陽性細胞數＜10%者為陰性病例，≥10%者為陽性病例。

1.4 統計學處理 利用SPSS10.0軟件進行χ2檢驗;相關性檢驗用Spearman相關分析。

2 結果

2.1 NF-κB和CXCR4蛋白在不同食管病變組織中的表達食管鱗癌組織中NF-κB蛋白的陽性表達主要定位于胞質和胞核，CXCR4蛋白的陽性表達主要位于胞質，二者的陽性細胞均以彌散分布為主(圖1)。正常食管黏膜組織中的陽性表達主要位于基底層細胞。NF-κB和CXCR4蛋白在正常黏膜組織(17.7%，3.2%)、癌旁不典型增生組織(38.7%，41.9%)及鱗癌組織(53.2%，65.3%)中的陽性表達率依次增高，組間比較有明顯差異(χ2=21.690，χ2=64.863，P＜0.05)。

圖1 NF-κB及CXCR4蛋白在食管鱗癌中的表達(DAB，×400)

2.2 NF-κB和CXCR4蛋白在食管鱗癌中的表達及與臨床生物學行為的關系 NF-κB和CXCR4蛋白與食管鱗癌的浸潤深度及淋巴結轉移密切相關(P＜0.05)，而與患者的年齡和性別無關(P＞0.05)(表1)。

2.3 食管鱗癌中 NF-κB和 CXCR4蛋白表達間的關系Spearman相關分析結果表明，食管鱗癌中NF-κB和CXCR4蛋白表達呈正相關(r=0.302，P＜0.05)。

表1 食管鱗癌中NF-κB和CXCR4蛋白陽性表達及與臨床生物學行為的關系(n)

3 討論

良、惡性腫瘤的主要區別是后者具有局部浸潤和遠處轉移的能力。而惡性腫瘤的局部浸潤和遠處轉移情況也是判斷腫瘤患者預后的重要因素，惡性腫瘤一旦發生轉移，其生存率將明顯低于未發生轉移者。腫瘤的轉移是一個復雜的過程，并表現出高度的組織特異性，即腫瘤細胞的轉移并不是隨機的而是由其所表達的趨化因子受體所決定的〔2〕。

趨化因子受體CXCR4為一種G蛋白耦聯受體，是目前發現表達最為廣泛的細胞因子受體之一，參與機體內多種生理和病理過程且對多種惡性腫瘤的生長和轉移都有重要作用。CXCR4在許多惡性腫瘤組織中表達水平明顯增高，且高表達CXCR4的腫瘤細胞有更高的轉移潛能〔3〕。Sun等〔4〕研究發現CXCR4抗體可以顯著抑制胰腺癌細胞株的侵襲和轉移。Chu等〔5〕通過動物實驗研究發現，CXCR4在前列腺癌的轉移中具有重要作用。Sutton等〔6，7〕研究也顯示CXCR4的表達與肝癌的侵襲和轉移以及TNM分期、3年存活率等均密切相關。

本研究結果顯示，CXCR4在食管鱗癌中的表達明顯高于正常組織，且其表達與食管鱗癌的分化程度及浸潤深度和淋巴結轉移情況密切相關，而與患者的年齡及性別無關，說明CXCR4與食管鱗癌的發生、浸潤及轉移過程發揮著重要作用。

NF-κB是最重要的轉錄調節因子之一，其家族包括五個成員，目前研究最多的是p50/p65與抑制蛋白IκB結合形成的三聚體非活化狀態，p65是其重要的調節亞單位，也是其活化的主要形式。NF-κB的持續活化可促進腫瘤細胞的增殖、抑制腫瘤細胞的凋亡、促進血管新生、提高腫瘤細胞的轉移能力，在腫瘤發生、浸潤和轉移等多個環節均起重要的作用〔8～10〕。

研究結果顯示，NF-κB與食管鱗癌的發生、浸潤及淋巴結轉移情況密切相關。另有學者在肺癌和口腔鱗癌中的研究中發現SDF-1與CXCR4結合后通過ERK激活NF-KB，進而細胞分泌更多的整合素、MMP等，由此促進腫瘤的進展〔11，12〕。本研究中，食管鱗癌中二者的表達間也存在正相關關系。提示在食管鱗癌中可能也存在著這樣的機制。

綜上，NF-κB與CXCR4在食管鱗癌高表達并協同促進了癌細胞的浸潤和轉移，這為未來食管鱗癌的臨床治療及治療靶點的選擇提供了一定的理論依據。

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5 Chu H，Zhou H，Liu Y，et al.Functional expression of CXC chemokine receptor-4 mediates the secretion of matrix metalloproteinases from mouse hepatocarcinoma cell lines with different lymphatic metastasis ability〔J〕.Int J Biochem Cell Biol，2007;39(1):197-205.

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10 李珊珊.信號轉導通路與食管癌〔J〕.中華病理學雜志，2007;36(6):366-9.

11 Tang CH，Chuanq JY，Fong YC，et al.Bone-derived SDF-1 stimulates IL-6 release via CXCR4，ERK and NF-kappaB pathways and promotes osteoclastogenesis in human oral cancer cells〔J〕.Carcinogenesis，2008;29(8):1483-92.

12 Huang YC，Hsiao YC，Chen YJ，et al.Stromal cell derived factor-1 enhances motility and integrin up-regulation through CXCR4，ERK and NF-kappaB-dependent pathway in human lung cancer cells〔J〕.Biochem Pharmcol，2007;74(12):1702-12.

R730.23

A

1005-9202(2015)09-2427-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.053

河南省自然科學基金項目(No.0411043200)

1 新鄉醫學院第三附屬醫院 2 新鄉醫學院法醫學教研室

3 鄭州大學第一附屬醫院

李道明(1963-)，男，博士，教授，碩士生導師，主任醫師，主要從事腫瘤病理研究。

王永霞(1978-)，女，碩士，講師，主要從事腫瘤病理研究。

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〔2014-06-24修回〕

(編輯 安冉冉/曹夢園)