結直腸腺癌患者術后組織真核翻譯起始因子3h、Survivin和增殖細胞核抗原表達及意義

趙成鵬 (南陽市中心醫院外科，河南 南陽 473000)

結直腸腺癌患者術后組織真核翻譯起始因子3h、Survivin和增殖細胞核抗原表達及意義

趙成鵬 (南陽市中心醫院外科，河南 南陽 473000)

目的 應用免疫組化方法檢測結直腸腺癌患者術后組織中真核翻譯起始因子(EIF)3h、生存素(Survivin)和增殖細胞核抗原(PCNA)的表達，探討三者在不同臨床病理特征中的表達意義。方法 94例結直腸腺癌術后組織作為觀察組，56例結腸腺瘤上皮內瘤變組織作為對照組，距腫瘤邊緣＞5 cm的正常黏膜組織56例作為正常對照組。應用免疫組化方法檢測3組中EIF3h、Survivin和PCNA的表達。結果 3組中EIF3h、Survivin和PCNA表達的陽性率差異顯著。觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達的陽性率均與腫瘤的肌層浸潤深度、脈管浸潤、淋巴結轉移密切相關，EIF3h、Survivin表達的陽性率均與分化程度密切相關。觀察組中EIF3h和PCNA、Survivin和PCNA的表達均呈正相關性。結論 EIF3h、Survivin和PCNA高表達在結直腸腺癌病變發生和進展中有重要作用，EIF3h、Survivin均可能通過調節PCNA表達增殖過程發揮生物學功能。

結直腸腺癌;真核翻譯起始因子(EIF)3h;Survivin;增殖細胞核抗原(PCNA);免疫組化

結直腸腺癌是由上皮發生的惡性腫瘤，病變發展中癌基因啟動細胞的增殖過程，引發細胞惡變及轉移〔1〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h作為EIF家族中的重要亞基，不僅能對細胞生長的正常調控和蛋白質翻譯起作用，還對細胞惡變過程中增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖起重要調節作用〔2，3〕。生存素(Survivin)是重要的凋亡抑制蛋白，可以抑制 caspase-3和caspase-7，進而有效地調節腫瘤細胞的凋亡和增殖的過程〔4〕。PCNA是DNA聚合酶的輔助蛋白，參與DNA鏈的復制、修復，可作為細胞周期S期的特異性標記〔5〕。本文關注結直腸腺癌患者術后組織中EIF3h、Survivin和PCNA的表達特征，探討其相關性。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2013年12月我院行結直腸腺癌根治手術、同時經病理醫師確診的94例患者作為觀察組，均符合WHO關于結直腸腺癌的具體標準，年齡51～83歲，平均(67.3±5.3)歲。56例結腸腺瘤上皮內瘤變組織作為對照組，年齡54～82歲，平均(64.3±5.8)歲。距腫瘤邊緣＞5 cm 的正常黏膜組織56例作為正常對照組，年齡52～81歲，平均(65.3±5.5)歲。3組一般資料無明顯差別，具有可比性。

1.2 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白的檢測方法 EIF3h、Survivin和PCNA蛋白均為濃縮液，EIF3h購自Cell Signalign公司，Survivin和PCNA購自北京中杉金橋生物工程公司。抗體按不同比例進行稀釋后行預實驗，選擇最佳的染色效果進行正式實驗。正式實驗應用免疫組化SP法，DAB染色，操作均由同一病理科主管技師完成，嚴格質量控制。

1.3 EIF3h、Survivin和PCNA結果的判定標準 EIF3h和Survivin均以細胞質中顯現棕黃色顆粒為陽性細胞，PCNA以細胞核中顯現棕黃色顆粒為陽性細胞，每張切片計數5個高倍(400倍)視野，計數陽性細胞的百分率。EIF3h、Survivin和PCNA均以陽性率≥5%計為陽性，以陽性率＜5%計為陰性。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結果

2.1 3 組中EIF3h、Survivin和PCNA表達陽性率的比較 正常對照組、對照組、觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達的陽性率具有增高趨勢。見表1。

2.2 觀察組不同臨床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表達陽性率的比較 觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達的陽性率均與腫瘤的肌層浸潤深度、脈管浸潤、淋巴結轉移密切相關，EIF3h、Survivin表達的陽性率均與分化程度密切相關。見表2。

表1 3組中EIF3h、Survivin和PCNA表達陽性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征中EIF3h、Survivin和PCNA表達陽性率的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中EIF3h、Survivin和PCNA表達的相關性分析觀察組中 EIF3h 和PCNA(r=0.46，P=0.042 4)、Survivin 和 PCNA(r=0.45，P=0.029 8)的表達均呈正相關性。其他指標間未見明顯的相關性(P＞0.05)。

3 討論

結直腸癌病因學顯示影響因素較多，遺傳易感性及分子通路的機制是當今學者關注的重點。其中主要涉及腫瘤癌基因的活化、抑制基因的失活、微衛星不穩定性及異常增殖的啟動〔6〕。但上述固有通路中的中間調節階段也有重要影響。研究認為在腫瘤細胞形成過程中存在著一些固有時段，如翻譯起始階段40 S核糖體與mRNA結合需要一些因子幫助，而EIF3h能對此過程進行調節〔7〕，同樣EIF3h異常活化時對核糖體復合物的功能起到關鍵性作用。EIF3h能使Met復合物穩定地結合到40 S核糖體亞基上，并有助于保存這個復合物在60 S核糖體亞單位之上〔8〕。此時調節通路會形成明顯的變化，也使腫瘤處于異常增殖的過程中。如果當外源性刺激或有絲分裂信號刺激細胞時，mTOR結合EIF3h，引起S6K1的過度磷酸化，不僅能促進腫瘤細胞的增殖，還對腫瘤細胞的轉移有重要影響〔9〕。Survivin具有抑制細胞凋亡，干擾細胞周期，調節細胞分裂，參與腫瘤微血管形成的功能，也是目前發現的最強的凋亡抑制因子〔10，11〕。當Survivin高表達時，腫瘤細胞凋亡率減少，并繼而引起增殖活性升高，使病變處于加速期〔12，13〕。PCNA是一種非組核蛋白，通過與周期性蛋白激酶結合引發細胞的增殖過程〔14，15〕。部分學者認為PCNA表達較 Ki67要理想，可以囊括Ki67陽性表達的所有細胞，因此其標記增殖更加客觀全面〔16，17〕。

本實驗提示EIF3h、Survivin和PCNA在結直腸癌變過程中有重要促進作用。結腸腺瘤上皮內瘤變作為癌變的前期改變對臨床有重要意義，而在上皮內瘤變過程中，EIF3h、Survivin和PCNA均參與進來。提示臨床中對部分上皮內瘤變的患者，如果診斷為低級別上皮內瘤變，可以行EIF3h、Survivin和PCNA的檢測，如果三者高表達，說明上皮內瘤變處于進展階段，病理診斷應當升級，或應密切隨診，必要時積極進行手術治療。EIF3h、Survivin和PCNA三種蛋白參與腫瘤的生長、脈管的侵犯及淋巴結播散過程，此時EIF3h、Survivin和PCNA的高表達也提示腫瘤處于進展期。EIF3h、Survivin參與了腫瘤的分化過程，即腫瘤中EIF3h、Survivin高表達使腫瘤的分化程度更低，細胞異型性更明顯，腫瘤的生長更迅速，惡性程度更高。EIF3h和Survivin對腫瘤的促進作用可能是通過調節PCNA表達的增殖過程起作用的。EIF3h、Survivin和PCNA高表達時引起腫瘤生長的能力增強，向肌層浸潤的程度增強，同時可能破壞脈管。近年也有學者認為Survivin對腫瘤血管生成有影響〔18〕，因此EIF3h、Survivin和PCNA作用機制可能更復雜，其作用具體過程及通路需待更多基礎實驗證實〔19，20〕。

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R735.35

A

1005-9202(2015)09-2444-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.061

趙成鵬(1974-)，男，副主任醫師，主要從事臨床外科學研究。

〔2013-12-07修回〕

(編輯 苑云杰)