RP-HPLC測定地佐辛的含量

祖若玉 徐凌霞 楊敏 管曉琴 蔡亞蘭 李燕

（揚子江藥業集團質量管理部，江蘇 泰州 225321）

RP-HPLC測定地佐辛的含量

祖若玉 徐凌霞 楊敏 管曉琴 蔡亞蘭 李燕

（揚子江藥業集團質量管理部，江蘇 泰州 225321）

目的：建立地佐辛含量測定的反相高效液相色譜法（RP-HPLC）。方法：色譜柱為SHIMADZV VP-ODS（250 mm× 4.6 mm；5μm），流動相為乙腈-三乙胺溶液（20∶80），檢測波長：281 nm，流速：1.0 m L/min，柱溫：30℃，進樣量：20μL。結果：地佐辛在0.05～ 0.30 mg/m L范圍內線性關系良好，r=1.000 0；平均回收率為100.2%（RSD=1.0%）。結論：該法操作簡便、結果準確，可以用于地佐辛的定量分析。

反相高效液相色譜法；地佐辛；含量測定

地佐辛是一種新型強效阿片類鎮痛藥，用于緩解術后和癌癥等引起的中重度疼痛，與非甾體類消炎藥聯合應用于大手術后止痛，有良好的應用前景。本文參考原國家食品藥品監督管理局YBH09172006（試行）質量標準和《中國藥典》[1]對測定地佐辛含量的方法進行了研究及各項驗證，結果表明反相高效液相色譜法（RP-HPLC）可以簡便、準確地測定地佐辛的含量。

1 儀器與試藥

Agilent1260型高效液相色譜儀，G1314B可變波長紫外檢測器，Chemstation化學工作站，梅特勒-托利多（Mettler-Toledo）XS205型電子天平，梅特勒-托利多（Mettler-Toledo）MP220型酸度計。地佐辛對照品（來源：原中國藥品生物制品檢定所，批號：171262-200901，含量：100%），乙腈為色譜純，其他制劑為分析純。地佐辛（批號：11100711，11101111，11101311，11102511，11110311，11110611）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：SHIMADZV VP-ODS（250 mm× 4.6 mm；5μm），流動相：乙腈-三乙胺溶液（取1 000 m L水，加2.5 m L三乙胺，用稀磷酸（1→5）調節 pH至 3.2）（20∶80），流速：1.0 m L/min，檢測波長：281 nm，柱溫：30℃，進樣量：20μL。

2.2 對照品溶液的制備

取地佐辛對照品約20mg，精密稱定，置100m L的量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1 m L中約含0.2 mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取本品約20 mg，精密稱定，置100 m L的量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1 m L中約含0.2 mg的溶液，即得。

2.4 專屬性試驗

按上述色譜條件，取對照品溶液、樣品溶液和溶劑各20μL，分別注入液相色譜儀。樣品溶液色譜圖中，在與對照品色譜圖相應的位置上，有相同色譜峰，保留時間均為16.95分鐘，而溶劑在此保留時間處無干擾。見圖1。

2.5 線性關系

取地佐辛對照品約20 mg，精密稱定，加流動相分別配制成含地佐辛濃度約為0.05，0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 mg/m L的溶液，按上述色譜條件進行檢測分析，記錄峰面積，以峰面積（Y）為縱坐標，濃度（μg/m L）為橫坐標，進行線性回歸，繪制標準曲線，得地佐辛的回歸方程為：

Y=10 044.787 76X＋2.469 21（r=1.000 0），

結果表明地佐辛在0.05～ 0.30 mg/m L范圍內線性良好。

2.6 精密度試驗

取地佐辛對照品溶液（0.201 4 mg/m L），進樣體積：20μL，重復進樣 6次，結果地佐辛峰面積RSD為0.1%。

2.7 重復性試驗

取地佐辛（批號：11100711）6份，按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件進行測定。結果地佐辛的含量為100.14%（RSD=0.5%）。

2.8 穩定性試驗

取“2.7”項下的供試品溶液1份，在室溫下放置，在不同時間段（0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12 h）分別進樣測定，測得地佐辛峰面積的RSD為0.1%，說明供試品溶液在12小時內穩定。

2.9 回收率試驗

取已知含量的地佐辛9份，分別加入精密稱定的約 0.4，0.5，0.6 mg的地佐辛對照品溶液各3份，混勻，按上述色譜條件分別進樣 20μL，測得峰面積值，計算回收率，結果見表1。

2.10 樣品含量測定

2.1 0.1按本方法檢測選不同批號（6批）的地佐辛，按照 “2.3”項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件進行測定，并按外標法計算樣品中地佐辛的含量，結果見表2。

2.1 0.2按原質量標準檢測取地佐辛約0.2 g，精密稱定，加冰醋酸20 m L溶解后，加結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1 mol/L）滴定至溶液顯藍色，并將滴定結果用空白試驗校正。每1 m L高氯酸滴定液 （0.1 mol/L）相當于 24.54 mg的C16H23NO。計算地佐辛的含量，結果見表3。

圖1 HPLC圖譜

表1 地佐辛回收率試驗結果

表2 6批樣品地佐辛含量檢測結果 （%）

表3 6批樣品按原質量標準地佐辛含量檢測結果(%)

3 討論

3.1 由2.10項可看出，按本方法檢測所得的結果與按原質量標準檢測所得的結果可比。

3.2 作者分別選取了不同比例的流動相，不同廠家和規格的色譜柱進行對比分析，并根據原國家食品藥品監督管理局 YBH09172006（試行）有關物質檢測項下規定，選擇了最佳色譜條件色譜柱為SHIMADZV VP-ODS（250 mm×4.6 mm；5μm），流動相為乙腈-三乙胺溶液（20∶80），流速：1.0m L/min，柱溫：30℃，檢測波長：281 nm。

上述色譜條件下，RP-HPLC測定地佐辛的含量線性關系良好，精密度高，穩定性好，準確可靠，可以用于地佐辛的定量分析。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典2010年版（二部）[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010.

Content Determ ination of Dezocine by RP-HPLC

Zu Ruoyu，Xu Lingxia，Yang M in，Guan Xiaoqin，Cai Yalan，Li Yan （Quality Management Department of Yangtze River Pharmacy Group，Jiangsu Taizhou 225321，China）

Objective:To establish a method for the content determination of dezocine by reversed phase high-performance liquid chromatography（RP-HPLC）method.Methods：SHIMADZV VP-ODS（250 mm×4.6 mm；5μm)column was used w ith the mobile phase of acetonitrile three triethylam ine solution（20∶80）， the detection wavelength was at 281 nm， the flow rate was 1 m L/m in，the column temperature was at 30℃，and the sample size was 20μL.Results:A good linear relationship of dezocine was w ithin the range of 0.05～ 0.30 mg/m L（r= 1.000 0），the average recovery rate was 100.2% （RSD=1.0%）.Conclusion:The method is simple and accurate，and can be used for quantitative analysis of dezocine.

RP-HPLC；Dezocine；Determ ination of Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2015.01.007

2014-07-28）

祖若玉，女，工程師，主管藥師。研究方向：藥物分析及標準研究。E-mail：648167921@qq.com