三種梅毒血清學檢測方法在梅毒診斷中的臨床對比研究

張學杰 李惠 徐興偉 韓淑杰

三種梅毒血清學檢測方法在梅毒診斷中的臨床對比研究

張學杰 李惠 徐興偉 韓淑杰

目的 探討三種梅毒血清學檢測方法在梅毒診斷中的應用價值。方法 對62例患者的標本同時采用梅毒酶聯免疫吸附試驗(TP-ELISA)、甲苯氨紅不加熱血清試驗(TRUST)和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)三種檢測方法檢測血清標本的梅毒螺旋體抗體, 按照試劑說明書的要求并嚴格遵守正規的操作程序進行檢測, 正確判斷檢測的結果。結果 TRUST檢測方法對早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒陽性檢出率明顯低于TP-ELISA檢測方法及TPPA檢測方法的檢出率, 差異有統計學意義(P＜0.05), 其中TPPA對梅毒的陽性率檢測最高。三種檢測方法對二期梅毒陽性檢出率差異無統計學意義(P＞0.05)。結論 TRUST并不適合應用于梅毒篩選實驗, 可用于對患者療效的監測；TP-ELISA與TPPA法具有較強的特異性與高敏感性, 適合大批量的檢測；TPPA檢測是目前公認的梅毒確診的首選檢測方法, 可適用于對TRUST、TP-ELISA等檢測后陽性的標本進行驗證。三種檢測方法聯合應用可減少漏診及誤診的發生。

梅毒是由蒼白梅毒螺旋體(treponema palliolum, TP)感染的性傳播疾病, 臨床表現較為復雜、多樣、病程長, 對人體危害嚴重, 而且具有較強的傳染性。目前本院主要采用三種檢測方法協助梅毒的診斷, 包括TP-ELISA、TRUST和TPPA。本研究中對這三種檢測方法進行對比研究, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入本研究中的62例患者均為在2012年1月～2014年12月在本院就診, 且快速血清反應素環狀卡片試驗(RPR)篩查陽性、TPPA確診陽性, 包括男38例, 女24例,年齡22～68歲, 平均年齡(28.6±9.3)歲。其中早期潛伏梅毒12例, 一期梅毒21例, 二期梅毒20例, 三期梅毒9例。

1.2 試劑與儀器 本研究中所使用的TP-ELISA試劑由上海實業科華生物工程有限公司提供, TRUST試劑盒由上海榮盛生物技術有限公司提供, TPPA試劑盒由日本富士瑞必歐株式合社提供, TP-ELISA使用儀器為Thermo MUL TISKANASCENT 全自動酶聯免疫分析儀。雷度RT-6100型酶標儀及Egate2310洗板機各1臺。

1.3 檢測方法 所有納入本研究的患者于清晨空腹狀態下抽取靜脈血5 ml放置于促凝管中, 離心10 min后分離上層血清后放在1.5 ml的Eppendorff管中備用, 對全部患者的標本同時采用TRUST、TPPA和TP-ELISA 三種檢測方法檢測血清標本的梅毒螺旋體抗體, 按照試劑說明書的要求并嚴格遵守正規的操作程序進行檢測, 正確判斷檢測的結果。

1.4 觀察指標 對三種檢測方法各期梅毒的陽性檢出率、靈敏度進行分析比較。

1.5 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差表示, 采用t檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

采用TP-ELISA檢測方法早期梅毒陽性率為83.3%(10/12),一期梅毒陽性率為100.0%(21/21), 二期梅毒陽性率為100.0% (20/20), 三期梅毒陽性率為100.0%(9/9), 合計陽性率為96.8% (60/62), 靈敏度為96.8%；采用TPPA檢測方法早期梅毒陽性率為91.7%(11/12), 一期梅毒陽性率為100.0%(21/21), 二期梅毒陽性率為100.0%(20/20), 三期梅毒陽性率為100.0%(9/9),合計陽性率為98.4%(61/62), 靈敏度為98.4%；采用TRUST檢測方法早期梅毒陽性率為58.3%(7/12), 一期梅毒陽性率為71.4%(15/21), 二期梅毒陽性率為95.0%(19/20), 三期梅毒陽性率為77.8%(7/9), 合計陽性率為77.4%(48/62), 靈敏度為77.4%。TRUST檢測方法對早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒陽性檢出率明顯低于TP-ELISA檢測方法及TPPA檢測方法的檢出率, 差異具有統計學意義(P＜0.05), 其中TPPA對梅毒的陽性率檢測最高。三種檢測方法對二期梅毒陽性檢出率差異無統計學意義(P＞0.05)。經統計學分析, 采用TP-ELISA檢測方法及采用TPPA檢測方法的靈敏度要明顯高于TRUST檢測方法, 差異具有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

血清學檢測是發現和診斷梅毒最常用的方法, 快速、準確的實驗室診斷是治療和控制梅毒蔓延的有效措施, 科學、合理的檢測方法可以提高檢測的準確性, 避免漏診的發生［1］。TRUST是采用牛心中提取的心磷脂、膽固醇、卵磷脂組成的性病研究室VDRL抗原重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液制成, 是非特異性梅毒篩選試驗［2］, 由于該檢測方法價格低廉、操作方便、檢測迅速, 在梅毒篩查工作中廣泛應用。但是近些年來許多學者研究證實, 該項檢測敏感性不高, 在梅毒感染的不同時期陽性檢出率存在較大的差異, 本研究中對于早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒的陽性檢出率分別為58.3%、71.4%及77.8%, 而二期梅毒的檢出率卻為95.0%, 與相關報道接近。因此作者認為TRUST并不適合應用于梅毒篩選試驗,可用于對患者療效的監測。TPPA檢測是將梅毒螺旋體株制成抗原, 從而檢查患者血清中的梅毒特異性抗體［3］, 特異性和敏感性均較高, 在梅毒診斷中具有較高的臨床價值。TPELISA檢測法通過將基因重組表達的梅毒螺旋體抗原包被在微孔板上, 采用雙抗原夾心法測定［4］, TP-ELISA與TPPA在強特異性與高敏感性方面相近, 操作簡單, 可以作為梅毒血清學診斷的首選檢測方法, 特別是在傳染病醫院進行大批量體檢及大批量標本篩選時這兩種檢測方法是最適用的。本研究中采用TP-ELISA檢測方法及采用TPPA檢測方法的靈敏度要明顯高于TRUST檢測方法, 而且TPPA檢測方法陽性檢出率最高, 為98.4%, 這個結果與相關報道相符。因此目前國內推薦的確診梅毒最重要、最可靠的方法是TPPA檢測, 成為目前公認的梅毒確診的首選檢測方法［3］。但是不足之處是該項檢測操作繁瑣, 需要手工進行操作, 用肉眼判斷結果,有時會不可避免地出現主觀偏差性, 要求檢驗醫師具有較高的操作水平, 而且價格較貴, 對于大量樣本的檢測不適合采用此方法, 可適用于對TRUST、TP-ELISA等檢測后陽性的標本進行驗證［4］。

綜上所述, 作者認為將三種檢測方法聯合應用, 可減少漏診及誤診的發生。

［1］ 澤周艷.三種梅毒血清學檢測方法在梅毒診斷中的應用評價.大家健康:學術版, 2012, 6(16):36-37.

［2］ 李娟, 李樂之.探討三種血清學檢測方法在梅毒診斷中的應用.醫學綜述, 2012, 18(10):1542-1544.

［3］ 游媛, 陳嵐, 肖鄂.血清學實驗室檢查在梅毒臨床診斷中的應用研究.吉林醫學, 2012, 33(20):4282-4284.

［4］ 謝文衛.三種梅毒血清學檢測方法對比分析.中國中醫藥咨訊, 2011, 3(12):298.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.18.047

2015-02-13］

163461 黑龍江省大慶市第二醫院

【關鍵詞】梅毒；血清學檢測方法；梅毒酶聯免疫吸附試驗 ；甲苯氨紅不加熱血清試驗；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗