高純度(98．5% )夫沙那韋-d4的合成*

時　磊，沈加林，沈小明，呂愛娟，陳禮勤(．南京地質礦產研究所，江蘇南京　006; ．南京靖龍醫藥技術有限公司，江蘇南京　800)

高純度(98．5% )夫沙那韋-d4的合成*

時磊1，沈加林1，沈小明1，呂愛娟1，陳禮勤2
(1．南京地質礦產研究所，江蘇南京210016; 2．南京靖龍醫藥技術有限公司，江蘇南京211800)

摘要:以硝基苯-d5為原料，經還原、保護、磺酰化、脫保護、氧化和親核取代反應制得中間體——對硝基苯磺酰氯-d4(7)。以(2R，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-環氧-4-苯基丁烷為原料，經開環反應制得(1S，2R) -N-［1-苯甲基-2-羥基-3-(異丁胺基)丙基］氨甲酸叔丁酯(9) ; 9與7經磺化反應合成(2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羥基-4-苯基)丁基］-N-異丁基-4-硝基苯磺酰胺鹽酸鹽-d4(10) ; 10依次經酰化、磷酰化、加氫還原和醋酸鈣成鹽反應合成了夫沙那韋-d4，總收率33%，純度98．5%，其結構經1H NMR和EI-MS確證。

關鍵詞:藥物中間體;夫沙那韋-d4;合成

夫沙那韋鈣鹽［(1S，2R) -3-(4-氨基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氫-3-呋喃酯鈣鹽(Ⅰ)］是由英國GSK和美國Vertex公司共同研發的高效蛋白酶抑制劑［1－2］。Ⅰ既可直接用于艾滋病治療，也是合成安普那韋的前體藥物［3－4］。Ⅰ水溶性良好，不良反應少［5－6］。

高純度夫沙那韋-d4(14)可作為Ⅰ的內標，用于其生物利用率和藥物代謝的研究［7］。目前，Ⅰ的相關合成工藝較為成熟，但14的合成報道相對較少。胡娟等［1］以L-苯丙氨酸為原料，經11步反應合成了Ⅰ，總收率10%。該路線反應時間長、產率低、后處理復雜。Emile等［8］以(2S，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-環氧-4-苯基丁烷為原料，成功合成了安普那韋，但未介紹羥基磷酰化的方法。Smiles等［9］以五氯化磷作磷酰化試劑，將對硝基苯磺酸轉化為對硝基苯磺酰氯，產率高，操作簡單。

Scheme 1

在此基礎上，本文設計了一條簡便、經濟、條件溫和的合成14的反應路線。以硝基苯-d5(1)為原料，經還原、保護、磺酰化、脫保護、氧化和親核取代反應制得中間體——對硝基苯磺酰氯-d4(7)。以(2R，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-環氧-4-苯基丁烷(8)為原料，經開環反應制得(1S，2R) -N-［1-苯甲基-2-羥基-3-(異丁胺基)丙基］氨甲酸叔丁酯(9) ; 9與7經磺化反應合成(2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羥基-4-苯基)丁基］-N-異丁基-4-硝基苯磺酰胺鹽酸鹽-d4(10) ; 10依次經酰化、磷酰化、加氫還原和醋酸鈣成鹽反應合成了14(Scheme 1)，總收率33%，純度98．5%，其結構經1H NMR和EI-MS確證。

1　實驗部分

1．1儀器與試劑

Buchi Melting Point B-545型熔點儀(溫度未校正) ; Bruker-300 MHz型核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內標) ; Agilent 1100型高效液相色譜儀。

所用試劑均為分析純。

1．2合成

(1)苯胺-d5(2)的合成

在反應瓶中加入1 12．0 g(0．1 mol)和MeOH 120 mL，攪拌使其溶解;氮氣保護下加入甲酸銨30．7 g(0．49 mmol)，于室溫反應5 min。加入10% Pd/C 1．2 g，回流反應15 min。冷卻至室溫，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，合并濾液和洗液，常壓蒸餾得無色油狀液體2 8．8 g，收率98．3 %。

(2)乙酰苯胺-d5(3)的合成

在反應瓶中加入2 8．8 g(89．8 mmol)，冰浴冷卻，氮氣保護下加入乙酸酐20．2 g (197．8 mmol)，攪拌下于室溫反應2．5 h。冷卻至室溫，用飽和NaHCO3溶液(約50 mL)調至pH 7，用CH2Cl2(3×80 mL)萃取，合并萃取液，用飽和食鹽水(150 mL)洗滌，無水Na2SO4干燥，蒸除溶劑得白色晶體3 12．5 g，收率99．2%，m．p．113℃～115℃。

(3)對乙酰胺基苯磺酰氯-d4(4)的合成

在反應瓶中加入3 6．0 g(42．9 mmol)，冰鹽浴冷卻，氮氣保護下滴加氯磺酸53．6 g (460 mmol)，滴畢，于室溫反應3 h［TLC檢測，展開劑: V(乙酸乙酯)∶V(石油醚) = 1∶1］。冷卻至15℃，攪拌下將反應液緩慢加入冰水中，析出大量白色固體，抽濾，濾餅用水(50 mL)洗滌，干燥得白色固體4 6．7 g，收率65．7%，m．p．147℃～149 ℃;1H NMR δ: 2．18(s，3H，CH3)。

(4)對氨基苯磺酸-d4(5)的合成

在反應瓶中加入4 13．0 g(57 mmol)和10% NaOH溶液300 mL，攪拌下于95℃反應3 h。冷卻至室溫，于15℃用10%HCl(約25 ml)調至pH 1～2，折出固體。抽濾，濾餅用5℃～8℃冷水(20 mL)洗滌，干燥得白色固體5 8．3 g，收率87．0%，m．p．279℃～281℃。

(5)對硝基苯磺酸-d4(6)的合成

在反應瓶中加入5 0．7 g(4 mmol)和冰醋酸5．6 mL，攪拌使其溶解;冰浴冷卻，氮氣保護下加入30% H2O25．6 mL，回流(80℃)反應4．5 h ［TLC檢測，展開劑: V (2%氯化氫的甲醇溶液)∶V(二氯甲烷) = 1∶2］。冷卻至室溫，蒸除溶劑，殘余物干燥得黃色固體6(不純化，直接投入下一步反應) 0．76 g，m．p．107℃～112℃; EIMS m/z(%) : 205．0(8)，206．0(100)，207．0 (8)，208．0(5)。

(6) 7的合成

在反應瓶中加入6 0．5 g(2．4 mmol)和1，2-二氯乙烷7 mL，攪拌使其溶解;氮氣保護下加入五氯化磷1．0 g(4．8 mmol)，于65℃反應2．5 h。冷卻至室溫，蒸除溶劑，殘余物干燥得黃色固體7 0．51 g，收率94．3%，m．p．75℃～80℃; EI-MS m/z(%) : 223．0(11)，224．0(100)，225．0(9)，226．0(6)。

(7) 9的合成

在反應瓶中加入8 1．2 g(5 mmol，純度＞99 %)和無水乙醇15 mL，攪拌使其溶解;加入異丁胺6．6 mL(7．5 mmol)，氮氣保護下回流(78℃)反應1 h。冷卻至室溫，減壓蒸除溶劑得白色固體9 1．53 g，收率99．8%。

(8) (2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羥基-4-苯基)丁基］-N-異丁基-4-硝基苯磺酰胺鹽酸鹽-d4(10)的合成

在反應瓶中加入9 1．27 g(3．8 mmol)和干燥甲苯9 mL，攪拌使其溶解;氮氣保護下于80℃滴加三乙胺0．42 g(4．2 mmol)，滴畢，于90℃緩慢滴加7 1．0 g(4．5 mmol)的甲苯(4 mL)溶液，滴畢，反應2 h(TLC檢測)。降溫至80℃，緩慢滴加濃鹽酸0．4 mL，滴畢，回流反應1 h。加入濃鹽酸0．3 mL，反應0．5 h。蒸除溶劑，殘余物加入乙酸乙酯6 mL，于60℃反應0．5 h。冰浴冷卻，析出大量白色固體，抽濾，濾餅用冷乙酸乙酯(3 mL)洗滌，干燥得白色固體10 1．4 g，收率80．5%。

(9) (1S，2R) -3-(4-硝基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-羥基-丙基-氨基甲酸(3S)四氫-3-呋喃酯-d4(11)的合成

在反應瓶中加入三光氣(BTC) 0．56 g(1．9 mmol)的二氯甲烷(15 mL)溶液，冰浴冷卻至0℃～5℃;氮氣保護下加入(S) -3-羥基四氫呋喃0．5 g(5．7 mmol)和三乙胺0．57 g(5．7 mmol)，于室溫反應3 h。減壓蒸除溶劑，殘余物用二氯甲烷(50 mL)溶解，加入10 2．3 g(5 mmol)，于10℃滴加三乙胺1．4 g(14 mmol)，于室溫反應1 h;回流反應1 h(TLC檢測)。減壓蒸除溶劑，殘余物加水30 mL，用二氯甲烷(3×25 mL)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(10 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液蒸干后用混合溶劑［V(乙酸乙酯)∶V(乙醇) =4∶1，16 mL］重結晶得白色固體11 2．2 g，收率82．1%;H NMR δ: 7．25(m，5H，ArH)，4．96～4．79(m，1H)，4．11(m，1H)，3．89～3．65(m，4H)，3．49～3．3(m，2H)，3．18～2．70(m，5H)，2．60～2．49(m，1H)，2．11～1．87 (m，3H)，1．30～1．15(m，1H)，0．94～0．85(m，6H，CH3)。

(10) (1S，2R) -3-(4-硝基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氫-3-呋喃酯-d4(12)的合成

在反應瓶中加入11 1．0 g(1．9 mmol)和干燥吡啶50 mL，攪拌使其溶解;冰浴冷卻至0℃～5℃，氮氣保護下加入三氯氧磷1．72 g (11．2 mmol)，于室溫反應2．5 h(TLC檢測)。冰浴冷卻至5℃，加水20 mL，用甲基異丁基酮(3×30 mL)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(25 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液蒸干后用甲基異丁基酮(50 mL)溶解，于室溫滴加6 mol·L－1鹽酸2 mL，滴畢，劇烈攪拌下于50℃反應2．5 h。冷卻至室溫，加水20 mL，靜置分層，水相用甲基異丁基酮(2×30 mL)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(20 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液蒸干得淡黃色固體12 1．0 g，收率84．7%。

(11) (1S，2R) -3-(4-氨基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氫-3-呋喃酯-d4(13)的合成

在反應瓶中加入12 0．3 g(0．5 mmol)和甲醇7．5 mL，攪拌使其溶解;加入10%Pd/C 0．15 g，常壓下通入氫氣，于室溫反應5 h［TLC檢測，展開劑: V(二氯甲烷)∶V(甲醇) = 4∶1，醋酸2～3滴］。過濾，濾餅用甲醇(10 mL)洗滌，合并濾液和洗液，減壓蒸除溶劑，剩余物干燥得白色固體13 0．27 g，收率91．5 %。

(12) 14的合成

在反應瓶中加入13 0．5 g(0．9 mmol)和甲醇10 mL，攪拌使其溶解;滴加一水合醋酸鈣0．27 g (1．7 mmol)的水(2 mL)溶液，滴畢，于室溫反應15 min。用5% NaOH溶液調至pH 8～9，析出大量白色固體，加水2 mL，攪拌10 min;抽濾，濾餅用50%乙醇洗滌，干燥得白色固體14 0．34 g，收率64．2%，純度＞98．5%，同位素豐度98．2%;1H NMR δ: 7．36～7．28(m，5H)，4．96～4．79 (m，1H)，4．49(m，1H)，4．29～4．16(m，1H)，3．89～3．55(m，4H)，3．42～3．33(m，2H)，3．16～2．90(m，3H)，2．75～2．60 (m，1H)， 2．11～1．85(m，2．5H)，1．30～1．15(m，0．5H)，0．85～0．79(m，6H) ; EI-MS m/z(%) : 587．1 (7)，588．1(100)，589．1(30)，590．1(10)。波譜數據與文獻［1］一致。

2　結果與討論

首次以1原料，合成了高同位素豐度的7。用Pd/C-甲酸銨替代常規的Pd/C-H2還原硝基，反應更迅速，產率更高。氯磺酸與3發生親電取代反應時應適當控制溫度，避免因反應過于劇烈而導致氘原子丟失。用30% H2O2氧化氨基時，需用TLC即時監控，反應時間過長，副產物大量增加，難以純化。

使用三光氣取代羰基二咪唑進行酰化反應，大大縮短了反應時間，提高了產率。最后使用一水合醋酸鈣水溶液成鹽，只需調至pH為弱堿性，并多次重結晶達到高純度和高同位素豐度。整個合成路線操作簡便，所有步驟均只需重結晶提純。

參考文獻

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·綜合評述·

Synthesis of High Purity(98．5%) Fosamprenavir-d4

SHI Lei1，SHEN Jia-lin1，SHEN Xiao-ming1，LüAi-juan1，CHEN Li-qin2
(1．Nanjing Research Institute of Geology and Mineral Resources，Nanjing 210016，China; 2．Nanjing Jinglong Pharmaceutical Technology Co．，Ltd．，Nanjing 211800，China)

Abstract:An intermediate，p-nitrobenzenesulfonyl chloride-d4(7)，was obtained by reduction，protection，sulfonylation，deprotection，oxidation and nucleophilic substitution，using nitrobenzene-d5as starting material．(1S，2R) -N-［1-benzyl-2-hydroxy-3-(isobutylamine) propyl］tert-butyl carbamate (9) was prepared by ring-opening reaction from (2R，3S) -N-Boc-3-amino-1，2-epoxy-4-phenylbutane．(2R，3S) -N-［(3-amino-2-hydroxy-4-phenyl) butyl］-N-isobutyl-4-nitrobenzene sulphonamide hydrochloride-d4(10) was synthesized by sulfonation reaction of 9 with 7．Fosamprenavir-d4，in total yield of 33% and purity of 98．5%，was synthesized by acylation，phosphorylation，hydrogenation reduction and salification from 10，respectively．The structures were confirmed by1H NMR and EI-MS．

Keywords:drug intermediate; Fosamprenavir-d4; synthesis

作者簡介:時磊(1983－)，男，漢族，江蘇南京人，碩士，主要從事藥物合成和有機分析的研究。E-mail: njdkssl@163．com

*收稿日期:2014-10-30;

修訂日期:2015-06-10

中圖分類號:O625．75; R914．5

文獻標識碼:A

DOI:10．15952/j．cnki．cjsc．1005－1511．2015．07．0668