蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結局的關系

王妙英，焦朋增，趙媛媛

(1.河北省邯鄲市中心醫院，河北 邯鄲 056001；2.河北省邯鄲市第一醫院，河北 邯鄲 056001)

蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結局的關系

王妙英1，焦朋增2，趙媛媛1

(1.河北省邯鄲市中心醫院，河北 邯鄲 056001；2.河北省邯鄲市第一醫院，河北 邯鄲 056001)

目的 探討蛋白酶、白細胞介素-8(IL-8)與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結局的關系。方法 選擇住院分娩的未足月胎膜早破孕婦53例，根據有無發生絨毛膜羊膜炎(HCA)分為HCA組22例和無HCA組31例。比較2組孕婦血清及其新生兒臍帶血中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及IL-8、C反應蛋白(CRP)、WBC水平,比較HCA組不同嚴重程度HCA時新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、CRP、WBC水平。記錄2組妊娠結局情況。結果 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中WBC、CRP水平比較差異均無統計學意義，HCA組NE、Ox-AT、IL-8水平均明顯高于無HCA組(P均<0.05)。重度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明顯高于輕中度者(P均<0.05)。孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平與新生兒臍帶血NE、Ox-AT、IL-8水平呈顯著正相關性(P均<0.01)。新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平與WBC、CRP水平呈弱相關性(P均<0.05)。新生兒臍帶血中NE水平與Ox-AT、IL-8水平呈正相關性(P均<0.05)，Ox-AT水平與IL-8水平呈正相關性(P均<0.05)。HCA組剖宮產率、產褥病率、新生兒窒息率、肺炎率明顯高于無HCA組(P<0.05或P<0.05)，HCA組母體并發癥及新生兒并發癥發生率均明顯高于無HCA組(P均<0.05)。結論 動態監測孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平變化，有利于盡早預測未足月胎膜早破合并HCA的發生及妊娠結局，以盡早采取干預措施，降低母兒并發癥的發生風險。

蛋白酶; 白細胞介素-8;未足月胎膜早破;絨毛膜羊膜炎

未足月胎膜早破(pPROM)是指妊娠<37周胎膜在臨產前發生破裂。其與感染互為因果，常表現為組織學絨毛膜羊膜炎(HCA)[1]，而HCA多無典型臨床癥狀，產前診斷困難。pPROM合并HCA可致產婦胎盤早剝、產后出血及新生兒肺炎、腦白質損傷等[2]。可見，盡早預測HCA的發生對改善母兒結局有著積極意義。蛋白酶如中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及細胞因子中白細胞介素-8(IL-8)與HCA的發生有著密切的關系，它們在炎癥級聯反應過程中起著重要作用。本研究對pPROM孕婦血清及其新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8含量進行了檢測，并探討了各指標與pPROM合并HCA的相關性及與妊娠結局的關系，現將結果報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2012年5月—2013年12月在邯鄲市中心醫院婦產科住院分娩的pPROM孕婦53例，均為單胎妊娠。pPROM診斷符合《婦產科學》[3]中相關標準，排除合并有臨床感染癥狀、肝炎、腎炎、上呼吸道感染疾病者。根據有無發生HCA分為2組：HCA組22例，年齡18～40(27.1±3.1)歲；孕周30+6～37(32.4±0.8)周；孕次0～3(1.3±0.2)次;破膜至胎兒娩出時間46～112(78.5±19.7) h。無HCA組31例，年齡19～41(27.4±3.2)歲；孕周30+4～37(32.1±0.7)周；孕次0～3(1.2±0.3)次;破膜至胎兒娩出時間48～110 (78.0±19.2)h。HCA診斷參考相關資料[4]:胎膜病理切片鏡檢中性粒細胞中重度浸潤，根據高倍鏡視野下中性粒細胞個數分為輕度(5～10個)、中度(11～30個)、重度(>30個)。

1.2 方法 采集孕婦產前肘部靜脈血3 mL,3 500 r/min離心10～15 min,取上層血清置于-20 ℃冰箱內保存待測。胎兒娩出后、胎盤娩出前采集臍帶靜脈血3 mL，離心取上層血清置于-20 ℃冰箱內待測。孕婦血清、新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平采用ELISA法測定，試劑盒購自上海凱博生化試劑有限公司,同時采用血球計數分析儀測定白細胞計數(WBC)，采用酶標免疫法測定C反應蛋白(CRP)水平。

1.3 妊娠結局觀察 記錄2組孕婦分娩方式、產后出血產褥病情況及新生兒窒息、呼吸窘迫(NRDS)、缺氧缺血性腦病(HIE)發生情況。

2 結 果

2.1 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較 2組孕婦血清、新生兒臍帶血中WBC、CRP水平比較差異均無統計學意義(P均>0.05)，NE、Ox-AT、IL-8水平均明顯高于無HCA組(P均<0.01)。見表1及表2。

表1 2組孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較

表2 2組新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比較

2.2 不同嚴重程度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比較 HCA組中病情輕中度10例，重度12例。病情重度者新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明顯高于病情輕中度者(P均<0.01)。見表3。

表3 不同嚴重程度HCA孕婦的新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比較

2.3 孕婦血清及新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平相關性分析 孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平與新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平呈正相關性(rNE=0.902，P<0.01；rOx-AT=0.921，P<0.01；rIL-8=0.916，P<0.01)。新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平與WBC、CRP水平呈弱的相關性(r=0.125～0.206,P<0.05)。新生兒臍帶血NE與Ox-AT、IL-8呈正相關性(r=0.972,0.946,P<0.05)，Ox-AT與IL-8呈正相關性(r=0.892,P<0.05)。

2.4 妊娠結局情況 HCA組剖宮產率、產褥病率、新生兒窒息率、肺炎率均明顯高于無HCA組(P<0.05或P<0.01)，見表4。HCA組母體并發癥(包括胎盤早剝、產后出血、產褥病)、新生兒并發癥(包括新生兒窒息、肺炎、HIE) 發生率分別為36%(8/22)、86%(19/22)，無HCA組為3%(1/31)、36%(11/31),2組母體并發癥及新生兒并發癥發生率比較差異均有統計學意義(P均<0.05)。

3 討 論

pPROM是產科常見的并發癥，其病因病機尚不明確。有研究報道，pPROM與感染相關，pPROM可致陰道內細菌上行，誘發或加重宮內感染[5]。HCA是一種宮內感染，也是pPROM的并發癥之一，其可增加母兒并發癥的發生風險。因此，在pPROM進行期待治療過程中，如何盡早預測HCA并采取防治措施，對降低母兒并發癥的發生率，改善妊娠結局有著重要意義。

表4 2組妊娠結局情況比較 例(%)

NE是一種絲氨酸中性蛋白水解酶，主要由中性粒細胞分泌。正常機體內NE表達極低，且能與-AT和-MG等抗蛋白酶結合而被中性粒細胞清除[6]。當感染如HCA發生時，中性粒細胞會在感染病灶局部聚集、活化、脫顆粒并釋放NE，NE是一種炎癥損傷因子，可降解細胞外基質，釋放IL-6、IL-8等炎性因子，進一步促進中性粒細胞的趨化、遷移，加重組織的損傷[7]。因此，組織或體液中NE含量能較好地反映該組織損傷程度，可作為組織損傷及預后的評估指標。

周琴等[8]研究表明，pPROM孕婦胎盤組織中NE表達水平較無pPROM孕婦明顯增加，而合并HCA孕婦其表達值進一步升高，同時發現孕婦血清中的NE水平也存在這種現象。Tsiartas等[9]研究亦發現，當pPROM孕婦羊水存在細菌感染時，羊水中NE含量明顯增加。本研究結果顯示，HCA組孕婦血清及其新生兒臍帶血中NE水平明顯高于無HCA組，且隨著HCA嚴重程度加重而升高，說明NE對pPROM合并HCA的發生具有一定的預測作用。

α1-AT是一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，主要在肝臟中合成，其對彈性蛋白酶、胰蛋白酶、膠原酶等具有競爭抑制作用，同時具有抗炎、抗感染等作用[10]。正常生理條件下，α1-AT與NE處于相對平衡狀態，可防止組織被降解損傷。局部炎癥可促使α1-AT被氧化為無活性的Ox-AT，而失去了對NE和炎癥反應的抑制作用。α1-AT在胎盤組織中高表達可抑制胎盤組織中彈性蛋白酶的活性，保護胎盤組織不受彈性蛋白酶的酶解損傷[11]。α1-AT減少，Ox-AT增加可能是pPROM產生的原因。據研究證實，pPROM孕婦血清中Ox-AT含量明顯高于無pPROM孕婦，且伴宮內感染者Ox-AT含量更高，說明Ox-AT表達增加可能會導致HCA發生或加重[12]。另有研究表明，pPROM孕婦羊膜組織高表達Ox-AT與羊膜腔感染密切相關[13]。本研究發現，pPROM合并HCA孕婦血清及其新生兒臍帶血中Ox-AT水平明顯高于無合并HCA孕婦，同時與HCA的嚴重程度呈正相關，這可能是由于胎膜早破過程中，HCA致使大量炎性因子釋放，這些因子的氧化物質將α1-AT氧化成無活性的Ox-AT，后者通過激活絲裂原激活蛋白激酶(JNK)促進細胞因子IL-8的分泌，IL-8含量增加可促進炎癥細胞如巨噬細胞、中性粒細胞的分泌，這些炎癥細胞釋放的氧化物反過來促進Ox-AT的生成，致使孕婦血清和胎兒臍帶血Ox-AT含量明顯升高。Ox-AT含量增加表明活性α1-AT降低，致使其抗炎、抑制基質降解作用減弱，引起胎膜破裂并募集炎癥細胞至炎癥部位，同時也增加了細菌感染的風險。

pPROM合并HCA無典型臨床癥狀，早期難以診斷。傳統的CRP檢測雖能較好地反映細菌感染情況，但特異性較低，另外患者入院后通常使用地塞米松促胎肺成熟，這一定程度影響CRP的改變[14]，因此不能真實反應感染是否存在。本研究結果顯示，pPROM合并HCA孕婦血清CRP與無HCA孕婦比較差異無統計學意義，但NE、Ox-AT水平均比無HCA組高，說明NE、Ox-AT對HCA的預測價值高于CRP，兩者存在明顯的正相關性，其原因可能是炎癥反應促進了降解細胞外基質的細胞因子金屬基質蛋白酶9和NE的釋放，進而引起Ox-AT生成增加。IL-8是炎癥介導因子，本研究結果顯示其與NE、Ox-AT在pPROM合并HCA孕婦血清及其新生兒臍帶血中有著相似的變化，且呈明顯正相關，說明IL-8水平檢測亦可較好地反映pPROM孕婦的HCA發生情況及嚴重程度。

HCA無特異臨床表現，無有效預測方法，因此一旦發生極易誘發母兒并發癥。本研究結果顯示，HCA組母體并發癥及新生兒并發癥發生率均明顯高于無HCA組，同時HCA組剖宮產率也明顯升高，這可能與pPROM并發HCA可能增加了子宮收縮、感染有關。

綜上所述，孕婦血清和新生兒臍帶血中NE、Ox-AT、IL-8水平變化與pPROM合并HCA及母兒并發癥的發生密切相關。因此，動態監測孕婦血清NE、Ox-AT、IL-8水平變化，有利于盡早預測pPROM合并HCA的發生及妊娠結局，從而及時采取干預措施，降低母兒并發癥的發生風險。

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The relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes with chorioamnionitis, pregnancy outcome

WANG Miaoying1，JIAO Pengzeng2，ZHAO Yuanyuan1

(1.Handan Central Hospital, Handan 056001, Hebei, China；2.The First Hospital of Handan,Handan 056001,Hebei,China)

Objective It is to investigate the relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes (pPROM) with chorioamnionitis (HCA) and pregnancy outcome.Methods 53 pregnant?women with pPROM who delivered in our hospital were selected and were divided into HCA group(n=22) and non HCA group(n=31) according to whether HCA occurring.The levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in serum of pregnant women and neonatal umbilical cord blood were compared between two groups.The levels of NE,Ox-AT,IL-8,CRP,WBC in neonatal umbilical cord blood were compared between different severity of HCA in HCA group.Pregnancy outcome was recorded in both groups.Results The levels of WBC, CRP in serum of pregnant women and newborn's cord blood had no obvious difference between both groups.The levels of NE, Ox-AT, IL-8 in HCA group were significantly higher than those in non HCA group (P<0.05); the levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in neonatal umbilical cord blood of pregnant women with severe HCA were significantly higher than those of ones with mild or moderate HCA.There were positive correlations between maternal serum NE, Ox-AT, IL-8 and those of neonatal umbilical cord blood (P<0.01).There were weak correlation between NE, Ox-AT, IL-8 and WBC, CRP (P<0.05).There was positive correlation between NE and IL-8, Ox-AT, or between Ox-AT and IL-8(P<0.05).The rate of cesarean section, neonatal asphyxia, puerperal morbidity ,pneumonia in HCA group were significantly higher than those in non HCA group, the rate of maternal complications, neonatal complications in HCA group were higher than those in non HCA group (P<0.05).Conclusion Dynamic monitoring the changes of serum NE, Ox-AT, IL-8 level of pregnant women is beneficial to early forecast the occurrence of pPROM with HCA and pregnancy outcome, thus to take intervention measure, and to reduce risk of maternal and neonatal complications.

protease; interleukin-8；preterm premature rupture of the membrane; chorioamnionitis

王妙英，女，碩士，副主任醫師，主要從事產科并發癥的診治工作。

焦朋增，E-mail：13931000564@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.20.007

R0714.433

A

1008-8849(2015)20-2188-04

2015-01-15