Ki-67和p53在乳腺癌中的表達與臨床病理分期的關(guān)系

楊 猛，戴殿祿，崔國忠，陳 亮，丁明劍

(河北省滄州市中心醫(yī)院，河北 滄州 061001)

臨床研究

Ki-67和p53在乳腺癌中的表達與臨床病理分期的關(guān)系

楊 猛，戴殿祿，崔國忠，陳 亮，丁明劍

(河北省滄州市中心醫(yī)院，河北 滄州 061001)

目的探討蛋白Ki-67和p53表達與乳腺癌臨床病理分期的關(guān)系及其對判定預(yù)后的價值。方法回顧性分析417例乳腺癌患者病理資料，并對Ki-67和p53的表達情況與臨床分期的相關(guān)性進行分析。結(jié)果本研究共納入417例乳腺癌患者，蛋白Ki-67陽性385例(92.3%)，蛋白p53陽性155例(37.2%)，三陰型56例(13.4%)，非三陰型361例(86.6%)。蛋白Ki-67和p53的表達與乳腺癌病理組織分型有關(guān)(P均<0.05)，而與發(fā)病時間、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、乳頭浸潤、TNM分期、病理組織分級、發(fā)病年齡、是否絕經(jīng)、發(fā)病部位和直徑等因素?zé)o關(guān)。在三陰性和非三陰性乳腺癌病理組織中，蛋白Ki-67表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),p53表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論Ki-67和p53在乳腺癌中高表達，對判斷預(yù)后有一定的價值。

乳腺腫瘤；病理；蛋白；非組蛋白核蛋白；抑癌基因

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，我國乳腺癌患者多為絕經(jīng)前的女性，發(fā)病年齡相對早。乳腺癌組織中雌激素受體(Estrogen receptor,ER)、孕激素受體(Progestrone receptor，PR)和表皮生長因子受體( Human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)表達對預(yù)后的判斷及治療方案的選擇具有重要的指導(dǎo)意義[1]。三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)是指ER、PR、HER2均表達缺失的乳腺癌，預(yù)后最差[2]。因此尋找TNBC的預(yù)后因素和生物學(xué)指標(biāo)，對判斷疾病進展和指導(dǎo)治療等尤為重要。Ki-67定位于腫瘤細胞核，是腫瘤細胞增殖的可靠指標(biāo)[3]。p53定位于細胞核，是腫瘤細胞異常增生的重要標(biāo)志,對乳腺癌的治療具有重要的指導(dǎo)意義[4]。本研究針對我院2013年1月—2014年1月收治的417例乳腺癌患者的病理資料進行回顧性分析，了解Ki-67與p53表達與各預(yù)后影響因素的關(guān)系，旨在探討Ki-67和p53對患者預(yù)后的影響。

1 臨床資料

1.1一般資料 收集上述時期我院收治的經(jīng)手術(shù)后證實417例乳腺癌患者的臨床資料，均經(jīng)術(shù)后病理證實為原發(fā)乳腺癌；患者臨床病理資料完整，可進行TNM分期、組織分級及免疫組化檢查；患者術(shù)前均無放化療史，無內(nèi)分泌治療史。免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果TNBC 56例，非TNBC 361例。

1.2組織學(xué)評價

1.2.1生化指標(biāo) ER及PR陽性定義為≥1%腫瘤細胞核內(nèi)表達激素受體標(biāo)記陽性；HER-2陽性定義為免疫組化檢測()，即>10%的腫瘤細胞呈現(xiàn)強的完整的細胞膜著色，()著色時需行熒光原位雜交(FISH)確定[5]。Ki-67定位于細胞核、呈棕黃色顆粒彌漫分布，陽性>5%。以上試劑購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司(TA500265)。p53定位于細胞核，呈棕黃色顆粒，陽性>10%,試劑購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司(PR-256)。所有試劑均按照說明書配比濃度進行稀釋。染色步驟: 切片標(biāo)本采用二甲苯脫蠟，梯度乙醇脫水。應(yīng)用0.5%過氧化氫溶液對內(nèi)源性過氧化物酶進行封閉(15min)，切片放入檸檬酸緩沖液(pH 6.0)中，微波加熱法進行抗原修復(fù)(150s)。PBS溶液充分漂洗3次，每次3min；再用3%的普通馬血清室溫進行孵化20min，以阻斷非特性抗體。傾去上清液，分別滴加一抗(p53，Ki-67)置于4℃冰箱中過夜12h。取出標(biāo)本室溫復(fù)溫5min。傾去上清液，滴加二抗(兔抗鼠IgG)，在37℃的溫度中孵育30min。PBS溶液充分漂洗3次，每次3min,避光滴加DAB顯色液(購自Bioss公司中國)，復(fù)染、反藍、封片。本病理判定由2名病理科醫(yī)生分別進行評估。

1.2.2病理學(xué)指標(biāo) 腫瘤TNM分期參照第7版AJCC TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進行[6]。病理組織學(xué)分級采用改良Scarff-Bloom-Richardson分級系統(tǒng)(Nottingham方案)，評估參數(shù)包括腫瘤腺管結(jié)構(gòu)、細胞核多形性和核分裂數(shù)3個指標(biāo)[7]。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。臨床資料采用百分比描述統(tǒng)計，組間比較行2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1患者臨床資料 本研究共納入417例乳腺癌患者，發(fā)病患者就診時間0～360d,平均30d;年齡25～83歲，中位年齡50歲；腫瘤直徑0.3～6.5cm，平均2.02cm；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)0～25個，平均3.9個。腫瘤直徑<2cm 289例，2～5cm 121例，>5cm 7例。病理類型：浸潤性導(dǎo)管癌合并小葉癌36例(8.6%)，浸潤性導(dǎo)管癌302例(72.4%)，小葉癌26例(6.2%)，導(dǎo)管內(nèi)癌29例(7.0%)，髓樣癌9例(2.2%)，其他15例(3.4%)。乳頭浸潤22例(5.3%)，未浸潤395例(94.7%)。右側(cè)乳腺癌179例，左側(cè)乳腺癌238例。TNBC 56例(13.4%)，非TNBC 361例(86.6%)。病理分級：浸潤型導(dǎo)管癌中Ⅰ～Ⅱ級288例(92.9%)，Ⅲ級22例(7.1%)；TNM 分期：0期24例(5.8%)，Ⅰ期151例(36.2%)，Ⅱ期213例(51.1%)，Ⅲ期29例(7.0%)。Ki-67陽性385例(92.3%)，p53陽性155例(37.2%)。

2.2預(yù)后因素分析 417例乳腺癌患者的病理組織中，Ki-67和p53的表達與患者年齡、發(fā)病時間、腫瘤直徑、是否絕經(jīng)、發(fā)病部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、乳頭浸潤、TNM分期和病理組織分級等因素?zé)o關(guān)；與病理組織分型有關(guān)，其差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。Ki-67的表達在TNBC和非TNBC組的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而p53的表達在2組中的分布具有明顯不同(P<0.05)，見表2。相關(guān)性分析顯示,Ki-67表達與p53表達呈明顯正相關(guān)(r=22.22,P<0.05)。

表1 Ki-67和p53在乳腺癌不同預(yù)后影響因素中表達情況 例

表2 Ki-67和p53在TNBC和非TNBC中的表達比較 例

3 討 論

乳腺癌是臨床常見的惡性腫瘤, 其生物學(xué)特征具有高度異質(zhì)性，病理表現(xiàn)不同，其分子生物學(xué)特性以及治療方案上存在很大的差別。國內(nèi)研究報道影響乳腺癌患者預(yù)后的因素包括直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、乳頭浸潤、病理分型、TNM分期、病理組織分級[8]。TNBC占所有乳腺癌的10%～17%[9-10]，HER-2高表達則提示細胞核的增殖能力強，故其侵襲和轉(zhuǎn)移能力強；近年來的研究證明三個受體均為陰性是乳腺癌預(yù)后不良的有力預(yù)測指標(biāo)[11]。

Ki-67抗原是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原[12]，表達于細胞核，分子量為345～395kD，是細胞增殖狀態(tài)中的標(biāo)記抗原，反映細胞增殖情況。Ki-67被廣泛地應(yīng)用于判定各種腫瘤的增殖活性及作為影響腫瘤預(yù)后的因素之一。國外報道Ki67的表達對乳腺癌預(yù)后判斷有重要意義[13]。國內(nèi)研究認為Ki-67的表達與乳腺癌年齡、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無明顯相關(guān)，與乳腺癌浸潤性導(dǎo)管癌分級呈明顯正相關(guān)，陽性表達率為66.0%～79.3%[14-16]。本研究結(jié)果顯示Ki-67的表達與患者年齡、發(fā)病時間、腫瘤直徑、是否絕經(jīng)、發(fā)病部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、乳頭浸潤、TNM分期和病理組織分級等因素?zé)o明顯相關(guān)性，并且在TNBC和非TNBC組的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義；Ki-67表達只與病理組織分型有關(guān)，乳腺髓樣癌中Ki-67表達明顯高于其他類型腫瘤，提示Ki-67在髓樣癌中具有較高的增殖活性，且預(yù)后不良。

p53基因位于人類17p13.1區(qū)帶，編碼393個氨基酸，分野生型和突變型。Kim等[17]認為p53基因突變與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示p53在乳腺癌中的陽性率為37.2%，且與 Ki67表達呈正相關(guān),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)，提示p53表達可能通過增加腫瘤增殖速率影響預(yù)后，p53基因突變率高的乳腺癌細胞惡性度高，侵襲性強。 Ki-67的表達與患者年齡、發(fā)病時間、腫瘤直徑、是否絕經(jīng)、發(fā)病部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、乳頭浸潤、TNM分期和病理組織分級等因素?zé)o關(guān)，表明p53是獨立于其他影響乳腺癌預(yù)后因素的免疫組化指標(biāo)。p53的表達在TNBC和非TNBC組的分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，p53陽性組中TNBC患者比例明顯高于陰性組中TNBC患者，提示p53陽性合并TNBC的患者預(yù)后可能劣于其他組患者。

總之，p53和Ki-67的表達主要是伴隨著腫瘤的惡性程度而變化,二者是相互獨立又相互補充的預(yù)后判定因素。聯(lián)合檢測Ki-67、p53及ER、PR和HER-2指標(biāo)有助于判斷乳腺癌的預(yù)后。

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The relationship between the expression of Ki-67and p53in breast cancer and its clinical pathological stage

YANG Meng, DAI Dianlu, CUI Guozhong, CHEN Liang, DING Mingjian

(Cangzhou Central Hospital, Cangzhou 061001, Hebei, China)

Objective It is to approach the relationships of the expression of protein Ki-67and P53in breast cancer with its clinic pathological stage, and predict the value for prognosis.Methods The clinical data of 417cases of breast cancer were analyzed retrospectively.The relationship of Ki-67and p53expression with clinical indexes was analyzed by correlation analysis.Results 417patients with breast cancer were included.In this study, 385cases (92.3%) with Ki-67positive, 155cases (37.2%) with p53positive; 56cases (13.4%) were triple-negative breast cancer, 361cases (86.6%) were nor-triple negative breast cancer.The expression of Ki-67and p53protein was associated with the histopathological classification in breast cancer (allP<0.05), but with no difference in the factors including the time of disease symptom, lymph node metastasis, nipple of invasion, TNM stage, histopathologic classification, age, menopausal status, site of cancer and diameter.However, in the groups of triple-negative breast cancer and nor-triple negative, there were obviously difference in expression of p53(P<0.05), but nor in Ki-67(P>0.05).Conclusion High expression of Ki-67and p53in breast cancer has certain value in prognosis.

breast neoplasms; pathology; protein; Ki-67; anti-oncogene

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.18.010

R737.9

B

1008-8849(2015)18-1966-03

2014-06-20