中醫治法對高尿酸血癥大鼠模型AngⅠ，AngⅡ水平的影響*

高萬飛，徐厚謙，金 華

1武威職業學院中醫康復技術系，甘肅 武威733000；2甘肅中醫學院中醫內科教研室

高尿酸血癥是一種慢性代謝類疾病，與肥胖、高血壓、胰島素抵抗等代謝綜合征密切相關［1］，成為心血管疾病、腎臟疾病、糖尿病的危險因素［2］。近年來，隨著人們生活方式和飲食結構的改變，高尿酸血癥的發病率明顯上升。目前，中醫藥防治高尿酸血癥取得了一定療效，但具體治療方法卻各有差別，本研究通過觀察不同中醫基礎方對高尿酸血癥大鼠AngⅠ，AngⅡ水平的影響，進一步甄別本病病機，為治療高尿酸血癥及其并發癥提供臨床用藥參考。

1 材料與方法

1.1 動物 雄性Wistar大鼠135只，SPF級，體質量(190～210)g。由甘肅中醫學院科研實驗中心提供，實驗動物合格證號為SCXK(甘)2004-007-0001536。

1.2 藥物試劑及儀器 腺嘌呤(蘭州生物工程化學試劑公司，批號：F20060526)；鹽酸乙胺丁醇片(成都錦華制藥廠，批號：060502)；別嘌呤醇片(上海信誼萬象制藥廠，批號：060501)；碘[125I]血管緊張素Ⅰ放射免疫分析藥盒(北京科美東雅生物技術有限公司提供，批號：國藥準字S20063121)；碘[125I]血管緊張素Ⅱ放射免疫分析藥盒(北京科美東雅生物技術有限公司提供，批號：國藥準字S20063128)；主要儀器為全自動生化分析儀(日本日立7170A型)；KDC-2044型低溫高速離心機離心機(科大創新股份有限公司中佳分公司生產，型號：H.H.S21-4)。

1.3 方法

1.3.1 造模劑的配備 將腺嘌呤10 mg/mL，乙胺丁醇片25 mg/mL溶于蒸餾水中配置成混懸液。

1.3.2 中藥制劑的配備 1)滋腎陰方，藥物組成：熟地黃、山茱萸、山藥，劑量按《小兒藥證直訣》六味地黃丸用量比例，為 2∶1∶1；2)溫腎陽方，藥物組成：巴戟天、肉蓯蓉、肉桂，劑量按《圣濟總錄》地黃飲子用量比例，為 1∶1∶1；3)健脾方，藥物組成：黨參、白術、白扁豆，劑量按《和劑局方》四君子湯用量比例，為 4∶4∶3；4)活血方，藥物組成：川芎、當歸、紅花，劑量按《醫宗金鑒》桃紅四物湯用量比例，為 2∶3∶2；5)化痰方，藥物組成：半夏、陳皮、茯苓，劑量按《和劑局方》二陳湯用量比例，為2∶2∶1；6)利濕方，藥物組成：萆薢、石菖蒲、車前子，劑量按《醫學心悟》程氏萆薢分清飲用量比例，為 5∶2∶4。

上述6類復方用藥由甘肅中醫學院附屬醫院鑒定并提供，按比例稱取，水煎，過濾，濃縮，制成1.8 g/mL的藥液，每kg體質量給藥量分別相當于成人每kg體質量用藥量的30倍［3］，藥液裝入瓶中高壓滅菌，4℃保存。

1.3.3 西藥的制備 將別嘌呤醇以5.4mg/kg按5.4mg/mL溶于蒸餾水中配置成混懸液。

1.4 動物分組、造模及給藥

1.4.1 動物分組 將大鼠適應性喂養（室溫20～24℃）7天，隨機分為9組，分別為空白對照組、模型組、西藥治療組與不同中醫治法的滋腎陰組、溫腎陽組、健脾組、活血組、化痰組、利濕組，每組15只。空白對照組予10mL/kg蒸餾水灌胃，1次/d。其余各組參照文獻［3］造模方法及預實驗結果，將“1.3.1”項下混懸液（造模劑）按體質量10mL/kg劑量灌胃，連續灌胃21天。第21天大鼠尾靜脈取血1mL，分離血清，用全自動生化分析儀測定各組血清尿酸水平。

1.4.2 給藥及指標檢測

1.4.2.1 給藥 第22天開始給各組大鼠早、晚8時各灌胃1次，連續灌胃14天?？瞻讓φ战M予10mL/kg蒸餾水灌胃。模型組上午予造模劑10mL/kg，下午10 mL/kg蒸餾水灌胃；中藥滋腎陰組、溫腎陽組、健脾組、活血組、化痰組、利濕組分別給予相應藥物灌胃3mL/次；西藥治療組給予別嘌呤醇混懸液1mL/kg灌胃。第35天末給藥60分鐘后，25%烏拉坦腹腔注射麻醉各組大鼠，股動脈取血，離心，分離血清，測定各組血清尿酸水平。

1.4.2.2 血漿AngⅠ、AngⅡ測定 靜脈取血5mL，迅速注入放在冰水浴冷卻的酶抑制抗凝試管中，搖勻，立即放回冰水浴中冷卻，待離心時取出。1 000 rpm離心5分鐘 (4℃離心機)，分離出血漿(此操作應在15分鐘內完成)，-25℃(AngⅠ)或-20℃(AngⅡ)保存待測(按說明書以放免法測定，單位：ng/mL)。

1.5 統計學方法 數據采用SPSS 13.0統計軟件處理，計量資料以(χ±s)表示，各組間比較采用單因素方差分析，各組均數間的兩兩比較采用LSD-t法，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 造模結果 造模第21天剔除各組血清UA沒有升高和自然死亡的大鼠，其余各組UA水平與空白對照組相比顯著升高(P＜0.05)，說明該實驗造模成功［4］，見表 1。

表1 第21天、第35天各組大鼠血清UA水平變化情況(χ±s)μmol/L

2.2 血漿AngⅠ、AngⅡ水平 AngⅡ水平方面，與空白對照組比較，模型組、溫腎陽組、滋腎陰組、健脾組，P＜0.01，其余各治療組P＞0.05；與模型組比較，西藥治療組、活血組、利濕組、化痰組P＜0.01，其余各治療組P＞0.05；與西藥治療組比較，活血組、利濕組、化痰組P＞0.05，溫腎陽組、滋腎陰組、健脾組P＜0.01；活血組、利濕組、化痰組組間比較P＞0.05，溫腎陽組、滋腎陰組、健脾組組間比較P＞0.05。

AngⅠ水平方面，與模型組比較，除活血組有顯著性差異外，其余中醫治療組血清AngⅠ濃度無明顯差異，但西藥治療組、利濕組、化痰組血清AngⅠ濃度低于模型組。說明活血法有明顯降低血清AngⅠ作用，利濕、化痰法有降低血清AngⅠ的趨勢；模型組AngⅡ含量與空白對照組比較均升高(P＜0.01)，說明腺嘌呤和乙胺丁醇能顯著升高高血漿中AngⅡ的濃度?；钛M、利濕組、化痰組AngⅡ濃度低于模型組(P＜0.01)，與西藥治療組比較無顯著性差異(P＞0.05)，與其余各中藥治療組相比有顯著差異(P＜0.01)，表明活血、利濕、化痰法能明顯降低血漿中AngⅡ的濃度，且治療效果高于其他中藥治療組(P＜0.01)，見表2。

表2 對高尿酸血癥大鼠模型血漿AngⅠ、AngⅡ水平的影響

3 討論

AngⅠ、AngⅡ是腎素-血管緊張素-醛固酮系統的主要物質，AngⅠ由腎素作用于血管緊張素原形成，它的生理活性很弱，可引起輕微縮血管反應。AngⅡ由AngⅠ經AngⅠ轉化酶作用而形成，AngⅡ的受體廣泛分布于心肌、血管、肝、腎等器官，通過與受體介導結合而引起強烈縮血管作用，促進血管平滑肌細胞增值，久之出現血管壁彈性減弱［5］；尿酸可增加腎皮質腎素的表達［6］，增加AngⅡ釋放，兩者都可使腎血管收縮，導致高血壓病、動脈硬化或腎性高血壓。

AngⅡ不但引起大血管病變，而且可造成微血管損害。微血管病變可導致組織缺氧，不僅使血乳酸水平增高致腎臟清除尿酸減少，而且使尿酸形成過程中的底物，如腺嘌呤、次黃嘌呤以及酶增加，導致血尿酸增加。

高尿酸血癥臨床表現多以水腫、關節疼痛、尿少等為主，辨證為“瘀血”“痰”“濕”。與先天腎精不足，氣化功能衰退；后天飲食失養，過食肥甘厚味及辛辣炙煿之品，傷及脾胃，致津液不歸正化，停而為濕濁，或聚而為痰。濕阻氣機，釀久成痰；痰阻經脈，津停而為濕濁。二者相互影響，相互為病。久而阻滯經絡，血行瘀滯。因此，隨年齡的增加腎精衰少，發病率升高。遇寒冷、饑餓、飲酒、吸煙、食“腥膻”等“發物”而誘使本病發作，病機為脾腎虧虛，痰濕內蘊，瘀血阻滯，虛為本，實為標，臨床多見虛實夾雜證。本研究結果表明，活血、化痰、利濕治法優于其他治療方法，進一步證明痰、濕、瘀是本病的基本病機。

對于高尿酸血癥患者，實驗室檢查僅可見血尿酸增高，無其他明顯癥狀可辨。但此類患者一般伴有肥胖、血脂及血液黏稠度增高等痰、濕、瘀血之證，此時給予化痰、利濕、活血法辨證論治，配合使用具有短期內降低血清尿酸濃度的藥物可緩解患者癥狀、預防腎臟功能損害的發生。

［1］ Kim Es，Kwon HS，Ahn CW，et al.Serum uric acid level is associated w ith metabolic syndrome and m icroalbuminuria in Korean patients with type 2 diabetes mellitus［J］.JournalofDiabetesand ItsComplications，2010，25(5)：309-313.

［2］ M linar B，Marc J，Janez A，et al.Molecular mechanisms of insulin resistance and associated diseases［J］.Clin Chim Acta，2007，375(1-2)：20-35.

［3］ 熊湘明，曲竹秋.大鼠高尿酸血癥模型建立［J］.天津中醫學院學報，2001，20(4)：28-29.

［4］ 楊維杰，徐厚謙，金華，等.不同中醫治法對高尿酸血癥模型大鼠血清尿酸水平的影響比較［J］.中醫兒科雜志，2007，3(2)：25-27.

［5］ Jin M，Yang F，Yang I，et al.Uric acid，hyperuricemia and vascular diseases［J］.Front Biosci，2012，17：656-669.

［6］ Filtopoulos V，Hadjiyannakos D，Vlassopoulos D.New insights into uric acid effects on the progression and prognosis of chronic kidney disease［J］.Ren Fail，2012，34(4)：510-520.