ICP-MS法測定某中藥膠囊中鉻含量的方法驗證

宋艷剛，李 波，王國祥

麗珠集團利民制藥廠，廣東 韶關 512028

膠囊是由藥用明膠加輔料精制而成的帽、體兩節膠囊殼，主要用于盛裝固體藥物。2012年4月“鉻超標藥用膠囊事件”后，國家食品藥品監督管理局對2012年5月1日后新上市的膠囊劑藥品實行鉻限量檢驗，確保公眾用藥安全［1］。

《中國藥典》2010年版已對膠囊中的有害元素鉻進行了限量要求，采用原子吸收光譜法檢測。近年來，隨著質譜技術的快速發展，電感耦合等離子體質譜儀(ICP-MS)的應用也越來越普遍，其具有極低的檢出限，使方法更加準確可靠，靈敏便捷，逐漸成為食品藥品中元素分析的首選方法［2-6］。本研究擬對ICP-MS法測定某中藥膠囊中鉻含量的方法進行驗證，為下一步取代藥典方法提供依據。

1 材料與方法

1.1 儀器 Agi lent 7700x型電感耦合等離子體質譜儀［(美國安捷倫公司，包括第三代八級桿碰撞反應池系統(ORS3)；高精度、高靈敏度、耐高鹽、高效Micromist同心霧化器，Pel tier半導體控溫(-5～20℃)，高純石英雙通道霧室，石英矩管，鎳采樣錐和截取錐，數字式固態射頻發生器，X型提取透鏡組，OmegaⅢ離子透鏡雙曲面四級桿，9個數量級同時雙通道模式檢測器］；MARS5型微波消解儀(美國CEM公司)；PALL Cascada AN超純水機(美國頗爾公司)；AE200電子天平(瑞士梅特勒公司)。

1.2 試藥 硝酸(優級純，德國默克公司)；鉻(GSBG62017-90)單元素標準溶液（國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院，濃度為100μg/mL）；鍺(GSB04-1728-2004)單元素標準溶液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心，濃度均為1 000μg/mL）；復方五指柑膠囊(麗珠集團利民制藥廠，批號：130504、130605、131108)；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 標準儲備液的制備 取鉻單元素標準溶液(1 000μg/mL)，用5%硝酸稀釋制成每1mL含鉻10.0μg、20.0μg的鉻標準儲備液。

2.2 標準溶液的制備 精密量取鉻標準儲備液(10μg/mL)適量，用5%硝酸溶液稀釋成每1mL含鉻 0、1、5、10、50、100 ng的對照品溶液，臨用新配。

2.3 內標溶液的制備 取鍺標準溶液適量，用5%硝酸溶液稀釋成適宜濃度。

2.4 供試品溶液的制備 取復方五指柑膠囊，傾出內容物，稱取空膠囊約0.2 g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐內，加硝酸8mL，混勻，蓋上內蓋，旋緊外套，置微波消解儀中按設定程序進行消解。消解完成后，取出，放冷，用超純水轉移并用重量法定容至50 g，搖勻，用0.22μm濾膜濾過，棄去初濾液，收集續濾液作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液，作為空白校正，見表1。

表1 微波消解程序

2.5 ICP-MS工作條件參數 射頻功率：1 412W；采樣深度：8.0mm；載氣流速：0.65 L/min；輔助氣流速：13.0 L/min；冷卻氣流速：0.80 L/min；蠕動泵轉速：50 r/min；重復次數：3。

2.6 測定法 按照電感耦合等離子體質譜法(《中國藥典》2010年版(一部)附錄 D)測定，以72Ge為內標，儀器的內標進樣管在儀器分析工作過程中始終插入內標溶液中，依次將儀器的樣品管插入各個濃度的標準溶液中進行測定(濃度依次遞增)，以每一濃度測得的3次讀數與內標讀數比值的平均值為縱坐標，相應濃度為橫坐標，做標準曲線。另將儀器的樣品管插入供試品溶液中，測定，取3次讀數的平均值。從標準曲線上計算得相應濃度，扣除相應樣品空白，計算各元素的含量，即得。

2.7 線性關系 取系列標準溶液，按上述方法進行檢測，用其檢測值對濃度進行線性回歸，得標準曲線y=9160.5932x+568.9267，結果在0～100ng/g濃度范圍內與檢測值線性關系良好，r=0.999 9，見圖1。

圖1 標準曲線圖

2.8 檢出限與定量限 測定11份空白樣品溶液，以其響應值的3倍所對應的濃度進樣檢測，作為檢測限，以其響應值的10倍所對應的濃度進樣檢測，作為定量限，經計算，方法的檢測限為0.02 ng/g，定量限為 0.07 ng/g。

2.9 精密度實驗 取供試品溶液1份，連續進樣6次，測定，結果測定值的RSD值為0.78%，表明儀器精密度良好，見表2。

表2 精密度實驗結果

2.10 重復性實驗 取樣品6份，按照供試品溶液制備方法制備，依法測定，結果測定值的RSD值為3.5%，表明方法重復性良好，見表3。

表3 重復性實驗結果

2.11 加樣回收率實驗 取樣品9份，分別各取3份加入鉻標準儲備液 (20μg/mL)4、8、12μL，按照供試品溶液制備方法制備，依法測定，結果回收率平均值為90.65%，RSD值為2.83%，表明方法回收率良好，見表4。

表4 加樣回收率實驗結果

2.12 與藥典測定方法比較 使用本方法與原子吸收分光光度法對同批次樣品進行檢測，結果見表5。

表5 與藥典方法比較結果

3 討論

電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)是近年來逐步被認同和快速發展的用于檢測重金屬元素含量的方法，與傳統的原子吸收光譜法測重金屬等相比，具有檢測靈敏度高，可以同時測定多種元素等優勢，操作簡便、快捷，在2010版《中國藥典》中已被廣泛應用［2］。通過驗證，該方法的鉻元素標準曲線在0～100 ng/g濃度范圍內，線性良好，相關系數r=0.999 9，檢測限為0.02 ng/g，定量限為0.07 ng/g，儀器精密度、樣品重復性和回收率良好，表明該方法準確可靠。從驗證結果看，膠囊劑藥品中鉻含量小于百萬分之二，符合中國藥典標準，該方法實測值較藥典方法(原子吸收光譜法)高，說明該方法靈敏度更高，可在實際工作中運用此方法檢測膠囊劑藥品中的鉻元素含量。

［1］ 向靖宇，萬建平，楊小軍，等.從“鉻超標藥用膠囊事件”分析我國藥品安全監管［J］.中國藥房，2013，24(25)：2308-2310.

［2］ 朱琳嬌，陳運動，吳永江.電感耦合等離子體質譜法檢測明膠空心膠囊中10種元素的含量［J］.中國現代應用藥學，2013，30(11)：1228-1232.

［3］ 郭素平.膠囊中鉻元素的測定方法驗證分析［J］.山西中醫，2013，29(7)：50-51.

［4］ 劉永成，張麗英.石墨爐原子吸收光譜法測定膠囊中總鉻的不確定度分析［J］.黑龍江醫藥，2013，26(4)：584-586.

［5］ 李坤，胥艷，姜童祥.微波消解+石墨爐原子吸收光譜法快速測定硬質空心膠囊中鉻［J］.中國衛生檢驗雜志，2013，23(16)：3313-3315.

［6］ 張大成，馬新文，趙冬梅，等.藥用膠囊中鉻元素的LIBS快速檢測［J］.藥物分析雜志，2013，33(12)：2070-2073.