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大鼠腦缺血再灌注損傷過程中TRAF6的表達變化*

2015-02-20 06:44:31何曉英李小剛
重慶醫(yī)學(xué) 2015年10期
關(guān)鍵詞:檢測

袁 平,何曉英,李小剛

(瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,四川瀘州 646000)

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大鼠腦缺血再灌注損傷過程中TRAF6的表達變化*

袁 平,何曉英,李小剛

(瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,四川瀘州 646000)

目的 觀察腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)在大鼠腦缺血再灌注損傷中的作用。方法 將40只成年健康SD大鼠按照隨機對照的原則,分成5組,每組8只:假手術(shù)組,缺血組,缺血再灌注2 h組 (R2 h組),缺血再灌注12 h組(R12 h組),缺血再灌注24 h組(R24 h組)。構(gòu)建大鼠腦缺血再灌注損傷模型,RT-PCR和Western blot檢測TRAF6的表達變化。免疫組化檢測定位TRAF6蛋白。結(jié)果 與假手術(shù)組比較,缺血組和R2 h組、R12 h組、R24 h組TRAF6表達明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TRAF6主要定位于神經(jīng)元細胞細胞質(zhì)。結(jié)論 大腦遭受缺血再灌注損傷時,活化的TRAF6參與腦細胞死亡。

腫瘤壞死因子受體相關(guān)肽和相關(guān)蛋白質(zhì)類;腦缺血;再灌注損傷;細胞死亡

缺血性腦卒中仍舊是全球主要致死和致殘的疾病之一,其病理、生理特點是腦血管的缺血以及再灌注,伴隨血流的減少以及再灌注時自由基等的生成,最終導(dǎo)致腦細胞的損傷以及死亡[1]。有研究發(fā)現(xiàn),Toll樣受體信號通路介導(dǎo)的炎癥免疫反應(yīng)參與腦缺血再灌注損傷過程,但具體的分子機制不清楚[2]。本研究通過構(gòu)建大鼠腦缺血再灌注損傷(ischemic-reperfusion injury,I/R)模型,檢測Toll樣受體下游關(guān)鍵接頭蛋白腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(tumor necrosis factor-associated 6,TRAF6)的表達變化,旨在探討腦I/R的分子機制。

1 材料與方法

1.1 材料 成年健康SD大鼠40只,體質(zhì)量220~260 g,購于瀘州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。2,3,5-triphenyletetrazolium chloride (TTC)染色試劑購自美國Sigma公司,Trizol試劑盒購自Invitrogen 公司,Reagents試劑盒購自寶生物工程公司,熒光定量儀iCycler iQ購自美國Bio-Rad公司,蛋白定量試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。……

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