朱名毅,姚金光,劉 津,姜 艷△
(1.右江民族醫學院科學實驗中心,廣西百色 533000;2.右江民族醫學院附屬醫院,廣西百色 533000)
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miR-200c對舌癌Tca8113細胞增殖和凋亡的影響*
朱名毅1,姚金光2,劉 津2,姜 艷1△
(1.右江民族醫學院科學實驗中心,廣西百色 533000;2.右江民族醫學院附屬醫院,廣西百色 533000)
目的 探討miR-200c對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞增殖和凋亡的影響。方法 將miR-200c的模擬物通過脂質體轉染到人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞內,通過四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測細胞增殖能力、流式細胞術檢測細胞周期和細胞凋亡率、Westernblot檢測半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Bcl-2蛋白的表達。結果 與對照組相比,miR-200c模擬物20、40、80nmol/L組的Tca8113細胞生長受到明顯抑制,差異有統計學意義(P<0.05),miR-200c模擬物的濃度越大,作用時間越長,抑制效果越明顯(P<0.05);轉染miR-200c模擬物48h后,Tca8113細胞停滯于G0/G1期,細胞凋亡率顯著增加,差異有統計學意義(P<0.05);Westernblot證明20、40、80nmol/L組Bcl-2蛋白表達量明顯低于對照組,而Caspase-3蛋白表達量明顯高于對照組(P<0.05)。結論miR-200c過表達可抑制舌癌Tca8113細胞增殖并誘導細胞凋亡。
舌腫瘤;miR-200c;細胞增殖;細胞凋亡
微RNA(microRNA,miRNA)是近年來發現的一類由18-25個短寡核苷酸組成的內源性非編碼單鏈小分子RNA。miRNA廣泛存在于各種生物中,參與細胞的發育、分化、增殖、凋亡、遷移等多種生物學過程[1]。miRNA可作為癌基因或抑癌基因,與許多腫瘤的發生、發展密切相關,目前的研究發現舌鱗癌中存在 miRNA 差異性表達,改變某些特異 miRNA 的表達水平,可影響舌癌的發生、發展[2-3]。miR-200c具有調節下游靶基因表達的作用,在腫瘤中miR-200c主要通過調控轉錄因子的表達參與腫瘤轉移的上皮間質轉化過程[4-6]。很少有文獻報道miR-200c在腫瘤細胞增殖、凋亡過程中的作用及其機制。本文通過體外將miR-200c模擬物轉染入舌癌細胞,上調 miR-200c的表達,觀察其對舌癌細胞增殖、凋亡的影響,并檢測Bcl-2和Caspase-3蛋白表達的變化,分析其相關機制。
1.1 材料 人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株由廣西醫科大學鄺曉聰教師贈送。……