豬人工授精的技術要點
房立本
(黑龍江省綏棱縣閣山鄉畜牧獸醫站152200)
1精液采集
青年公豬和老年公豬每5天采精1次為宜,成年公豬可以每周2次。采精前先準備好套上采精袋和過濾紙的集精杯、干凈的毛巾和紙巾,保存在恒溫的密閉容器里待用。把公豬趕入采精室,采精人員戴兩層一次性乳膠手套,擠掉包皮積尿后先用0.5%的高錳酸鉀溶液將公豬包皮及其周圍皮膚洗凈消毒,用清水擦洗公豬下腹部,將水分吸干。當公豬準備射精時,用干凈的紙巾擦凈陰莖頭,待其射出帶膠體狀物后,收集濃白的精液部分。集精完成后,迅速標上公豬的標簽,放入密閉容器,送實驗室處理。
2精液品質檢查
精液的感觀評定非常重要,正常的公豬精液顏色是乳白色或灰白色,具有一種特殊的腥味。精液乳白色程度越高,表明精子密度越大。顏色和氣味異常的精液不宜使用。公豬的平均射精量為250mL,范圍在150~500mL,發現射精量過少,必須查明原因,只有都符合正常要求的精液才能作進一步的檢查和處理。
鏡檢主要內容包括精子活力、密度及精子形態的檢查。精子的活力是指原精液在37℃下呈直線運動的精子占全部精子總數的百分率。取一滴精液在載玻片上,加蓋蓋玻片,然后放在顯微鏡下鏡檢,計算一個視野中呈直線運動的精子數目,來評定等級。一般地,鮮精活率應在80%以上,當活率低于40%時精液不可再用于輸精。密度的測定最常用的方法是白血球計數器。計算板法雖然比較準確,但費工費時,在生產條件下不便采精后都做檢查,現在已經有了自動化程度很高的專門儀器,將分光光度計、電腦處理機、數字顯示或打印機匹配,只要將一滴 精液加入分光光度計中,就可以很快得到所需的精子密度和精子總數。 正常精液精子密度平均2.5億,從鏡檢看精子密度高的精液往往呈云霧狀。正常精子形似蝌蚪,凡精子形態為卷尾、雙尾、折尾、無尾、大頭、小頭、長頭、雙頭、大頸、長頸等均為畸形精子。畸形精子的檢查方法是:取原精液一滴,均勻涂在載玻片上,干燥1~2min后,用95%的酒精固定2min,用蒸餾水沖洗,再干燥片刻后,用美藍或紅藍墨水染色3min,再用蒸餾水沖洗,干燥后即可鏡檢。鏡檢時,通常計算500個精子中的畸形精子數,求其百分率,一般豬的畸形精子率不能超過18%。
3精液的保存與運輸
精液常用的保存方法為低溫保存,但要注意,不能把稀釋完的精液馬上放入恒溫箱,應該在室溫下放置一段時間,讓其慢慢降溫到室溫后再放到恒溫箱進行保存。精液稀釋液應在精液稀釋前1h配制,稀釋液要放置在37℃水浴箱內預熱,在稀釋前要根據精液的溫度調整稀釋液的溫度。精液稀釋粉劑完全溶解后要求靜置40~50min,這樣稀釋液的pH值和滲透壓才穩定,對精子發揮良好的保護作用。溶解稀釋粉時水的溫度要求控制在25~35℃,最高溫度不超過40℃。溫度過高,將使抗生素失效。精液稀釋粉分裝完畢后,要在室溫下逐步降溫1h,再放進17℃的冰箱內保存。冰箱內放置兩個靈敏度高的溫度計,以隨時監測冰箱內的溫度,使溫度保持恒定。在保存過程中,為防止精子沉積使精子活力下降,應每隔12h輕輕上下搖勻,注意控制力度。
精液運輸過程中,注意保持輸精瓶或輸精袋的密封性,防止精液外流與產生震蕩。精液運輸過程中要注意保持溫度的恒定。場內使用,可直接用厚棉墊包裹精液放入泡沫箱進行運輸。短距離運輸時,可在厚棉墊外放入恒溫保溫袋進行運輸。
4輸精
輸精時,先用肥皂水把母豬外陰沖洗干凈,然后再用1.5%~2.0%的高錳酸鉀溶液清洗,再用清水沖冼2次,以確保輸精過程中精子不被污染,并趕一頭試情公豬在母豬欄外,刺激母豬性欲提高,促進精液的吸收。輸精者雙手帶上無菌橡膠手套,輸精管要高溫消毒,并保持一定的溫度。輸精者在母豬后軀用左腳踩壓在母豬的背部,左手翻開母豬陰戶,右手將輸精管沿著稍斜上方的角度慢慢插入陰道內,當輸精管插入25~30cm后,會感到有一點阻力。此時,輸精管頂端已到了子宮頸口,用手再將輸精管左右旋轉,稍一用力,將裝有精液的注射器接到輸精管上,間歇性推動注射器活塞,緩緩將精液注入母豬子宮頸口,1~2min后。為防止精液倒流,輸完精后,不要急于拔出輸精管,將精液瓶或袋取下,將輸精管尾部打折,插入去蓋的精液或袋孔內。