γ-干擾素釋放試驗在結核桿菌感染診斷中的應用價值

歐 江綜述，曾維瓊審校

（重慶醫科大學附屬第二醫院感染科，重慶400010）

γ-干擾素釋放試驗在結核桿菌感染診斷中的應用價值

歐 江綜述，曾維瓊審校

（重慶醫科大學附屬第二醫院感染科，重慶400010）

結核；綜述；γ-干擾素釋放試驗

結核病一直以來都是一種威脅人類生命的傳染病，據相關文獻報道，每年死于結核病者約170萬人，其中38萬人（35.0%）同時伴人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染，同時每年有110萬新增結核病患者伴HIV感染[1]；而全球約33.3%人口存在潛伏性結核桿菌感染（latent tuberculosis infection，LTBI）；確診結核的“金標準”依舊是在患者體內相關組織中檢出或培養出結核分枝桿菌，其培養周期長達4～8周，但陽性率較低，故結核病漏診率和誤診率一直較高；而目前臨床上主要根據癥狀、胸部X線片、胸部CT、結核菌素皮膚試驗（tuberculin skintest，TST）、診斷性治療等方法作出診斷，不僅檢測率低且費時，更延誤了診治的最佳時機；而隨著實驗室方法的不斷發展，人們漸漸發現γ-干擾素釋放試驗（interferon gamma release assays，IGRAs）在診斷結核桿菌感染中具有重要的輔助作用[2-4]，現將IGRAs在臨床結核桿菌感染診斷中的應用價值綜述如下。

1 IGRAs在結核桿菌感染診斷中的應用價值

IGRAs分為結核桿菌感染T細胞檢測試驗，即T細胞免疫斑點法、結核（T cell immunity spot method.tuberculosis，T-SPOT.TB）和結核桿菌感染T細胞免疫檢測試驗，即T細胞免疫吸附法（quanti-FERON-TB gold in-tube，QFT-GIT）。T-SPOT.TB應用酶聯免疫斑點技術檢測經結核分枝桿菌特異性抗原ESAT-6（6×103早期分泌抗原靶點）和 CFP-10（10×103培養濾過蛋白）刺激后分泌γ-干擾素的斑點細胞形成數，而QFT-GIT則是應用酶聯免疫吸附試驗檢測經結核分枝桿菌特異性抗原ESAT-6和CFP-10刺激后分泌γ-干擾素的濃度；Pai等[5]對T-SPOT. TB和QFT-GIT 2種方法的靈敏度和特異度進行研究發現，T-SPOT.TB靈敏度為90.0%，特異度為93.0%；QFTGIT靈敏度為78.0%，在非卡介苗接種者特異度為99.0%，在卡介苗接種者特異度為96.0%，故認為在特異度相差不大的情況下，QFT-GIT靈敏度明顯低于 T-SPOT.TB。Sester等[6]對使用IGRAs診斷活動性肺結核（active tuberculosis，ATB）的文獻進行了meta分析，從結核病高發區選擇了參與測試的患者，在348例培養陽性或臨床診斷為ATB患者中，QFT-GIT總靈敏度為80.0%，在569例測試者中QFT-GIT總特異度為79.0%；而在749例培養陽性或臨床診斷為ATB患者中T-SPOT.TB總靈敏度為81.0%，在1 070例測試者中T-SPOT.TB總特異度為59.0%。T-SPOT.TB出現不確定結果的比例為3.4%，明顯低于QFT-GIT（7.0%）。國內霍霏霏等[7]對31例經培養陽性診斷為肺外結核患者進行T-SPOT.TB，檢測陽性29例，靈敏度為93.5%。李秦等[8]使用IGRAs檢測已確診為結核病的657例患者，將205例非結核桿菌感染患者作為對照組，結果發現，IGRAs診斷結核病靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率、準確率分別為84.9%、58.5%、41.5%、15.1%、78.7%。韋海旭等[9]使用T-SPOT.TB檢查疑診或待排結核的37例患者發現，T-SPOT.TB在結核桿菌感染患者中陽性率為83.3%，明顯高于TST陽性率（41.7%）、涂片找抗酸桿菌陽性率（26.7%）、結核分枝桿菌分離培養陽性率（22.2%）。T-SPOT.TB診斷結核病靈敏度和特異度分別為83.3%、96.4%，顯著優于TST。周政等[10]使用IGRAs、TST、抗酸染色和培養分別檢測60例肺結核患者、54例非結核性肺疾病患者和35例健康體檢者，IGRAs診斷肺結核特異度為89.9%，靈敏度為88.3%，尤其是診斷ATB的靈敏度高達93.8%，而TST靈敏度為66.7%，抗酸染色靈敏度為31.7%，分枝桿菌培養靈敏度為46.7%，認為IGRAs具有靈敏度、特異度高、耗時短等特點，是一種可逐漸代替TST診斷結核桿菌感染的新的輔助檢查方法。

2 IGRAs在免疫力低下患者伴結核桿菌感染診斷中的應用價值

Cattamanchi等[11]對中低收入國家HIV陽性患者中使用IGRAs診斷LTBI患者進行了meta分析，QFT-GIT總靈敏度為65.0%，低于T-SPOT.TB靈敏度（72.0%）。Richeldi等[12]納入120例肝移植患者、116例HIV感染者、95例惡性血液病患者共331例免疫力低下患者進行IGRAs，結果表明，T-SPOT.TB陽性率為18.4%，QFTGIT陽性率為15.1%，而TST陽性率為10.9%，故認為IGRAs能更準確地診斷LTBI，但QFT-GIT出現不確定性結果比例為7.2%，明顯高于T-SPOT.TB（0.6%）。Jung等[13]使用IGRAs檢測119例懷疑肺結核的免疫力低下患者（糖尿病29例、惡性腫瘤53例、應用免疫抑制劑23例、終末期腎病14例）發現，QFT-GIT診斷ATB靈敏度為59.0%，低于T-SPOT.TB（72.0%），尤其是在應用免疫抑制劑伴ATB患者中QFT-GIT靈敏度（11.1%）顯著低于T-SPOT.TB（40.0%）。Smith等[14]認為，對免疫力低下患者應將IGRAs與TST聯合應用診斷LTBI，從而提高靈敏度。國內康振等[15]對納入的9項IGRAs診斷艾滋病患者LTBI的研究進行meta分析，結果顯示，IGRAs靈敏度為44.0%，特異度為91.0%，陽性似然比為4.83，陰性似然比為0.59，比值比為10.85，而TST靈敏度、特異度、陽性似然比、陰性似然比、比值比分別為82.0%、75.0%、2.01、0.41、6.50，認為IGRAs不適于結核桿菌感染的篩查，更適于進一步的鑒別診斷艾滋病患者是否伴LTBI。Jones等[16]納入207例HIV感染者，對已知LTBI危險因素與IGRAs及TST進行統計學橫斷面分析，QFT-GIT陽性11例，TST陽性13例，QFT-GIT與TST結果之間的一致性較低（Kappa值為0.38），認為QFT-GIT在HIV感染人群伴LTBI的診斷中可能較TST更有價值。

3 IGRAs在兒童結核桿菌感染診斷中的應用價值

時春虎等[17]選擇TST作為參考試驗，一共納入13篇文獻并應用meta分析方法對QFT-GIT和T-SPOT.TB 2種IGRAs診斷兒童結核桿菌感染的準確性進行了評估，其中10篇文獻報道了QFT-GIT對兒童LTBI的診斷價值，匯總靈敏度、匯總特異度、匯總陽性似然比、匯總陰性似然比、匯總診斷優勢比分別為40.0%、87.0%、6.21、0.46、15.58。4篇文獻報道了 T-SPOT.TB對兒童LTBI的診斷價值，匯總靈敏度、匯總特異度、匯總陽性似然比、匯總陰性似然比、匯總診斷優勢比分別為74.0%、84.0%、4.66、0.42、13.71（95%可信區間：3.71～50.72）。因此，認為對兒童LTBI的篩查，IGRAs并不適用，而適于進一步診斷兒童是否處于LTBI。鮑磊等[18]納入114例臨床懷疑肺結核患兒，使用QFT-GIT檢測45例，使用TSPOT.TB檢測69例。QFT-GIT在兒童肺結核診斷中的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為84.6%、81.3%、91.7、76.5，T-SPOT.TB靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為72.3%、93.7%、97.1、53.6。孫琳等[19]使用靈敏度和特異度作為診斷價值的評價指標，對IGRAs和TST應用于兒童結核桿菌感染診斷的相關文獻進行meta分析，QFT-GIT在結核桿菌感染患兒中總靈敏度為67.0%，在對照組中總特異度為91.0%；T-SPOT. TB在結核桿菌感染兒童中總靈敏度為57.0%，在對照兒組中總特異度為 88.0%；TST在結核桿菌感染患兒中總靈敏度為70.0%，在對照組中總特異度為43.0%，因此，認為IGRAs在兒童結核桿菌感染的篩查中具有重要價值，特別是在有卡介苗接種史及ATB患者密切接觸史兒童中的篩查價值更大。Pavic等[20]研究顯示，在5歲以下兒童中QFT-GIT陽性率為13.0%，TST陽性率為17.0%，其差異不大。Bergamini等[21]使用IGRAs檢測496例兒童（0～19歲）后發現，在4歲以上兒童中T-SPOT. TB和QFT-GIT出現不確定結果的差異并不大，但在4歲以下兒童中T-SPOT.TB出現不確定結果明顯低于QFT-GIT。Cruz等[22]對210例兒童進行了前瞻性研究，其中13例經培養陽性診斷為ATB兒童（中位年齡8.6歲）中T-SPOT.TB靈敏度為92.0%，明顯高于TST靈敏度（77.0%）。Nicol等[23]使用IGRAs檢測243例南非兒童，在經培養陽性的結核確診患兒中T-SPOT.TB陽性率為50.0%，明顯低于TST陽性率（80.0%）。因此，應將IGRAs和TST合用于兒童結核桿菌感染的診斷。

綜上所述，確診結核桿菌感染在全世界均是一個重要難題，由于傳統檢驗技術的缺陷，導致大量LTBI患者漏診，而IGRAs的出現在結核桿菌感染診斷中的應用具有很高價值，雖然，IGRAs不能完全取代傳統TST，但在結核桿菌感染診斷的實驗室方法中卻具有不可替代的作用；而在臨床應用中TST、影像學、IGRAs等檢查方法的合理聯合應用對確診結核桿菌感染具有重要的應用價值。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.17.014

A

1009-5519（2015）17-2608-03

2015-04-17）

歐江（1990-），男，重慶城口人，碩士研究生，主要從事感染疾病方向的研究；E-mail：414814793@qq.com。