血清干擾素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在腎癌患者治療中的表達及意義

魏雪菲, 徐　佩, 陳載融, 郭萬華

(南京大學醫學院附屬南京鼓樓醫院 核醫學科, 江蘇 南京, 210029)

血清干擾素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在腎癌患者治療中的表達及意義

魏雪菲, 徐佩, 陳載融, 郭萬華

(南京大學醫學院附屬南京鼓樓醫院 核醫學科, 江蘇 南京, 210029)

摘要:目的探討射頻消融術(RFA)以及根治性手術治療腎細胞癌患者手術前后血清干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)及白介素-10(IL-10)的表達及臨床意義。方法應用ELISA法對120例腎癌患者治療前與術后1周、1月及3月血清中的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量進行檢測。結果RFA組及根治組術后1周血清IFN-γ、IL-6、IL-10均升高(P<0.05); RFA組術后1、3月僅IFN-γ升高(P<0.05), 根治組術后1月僅IL-10升高(P<0.05); 2組IL-4水平手術前后均無顯著差異(P>0.05)。結論檢測腎癌患者治療前后細胞因子水平對于監測疾病發展、評價手術效果、判斷預后有一定的作用。

關鍵詞:干擾素-γ; 白介素-4; 白介素-6; 白介素-10; 腎細胞癌

腎細胞癌(RCC)是泌尿系統中常見的惡性腫瘤之一，約有25%的RCC患者首診時已為晚期[1], 其對化療和放療均不敏感，目前手術是公認的治療原發性腎癌唯一有效的方法[2]。近來還有人[3]提出射頻消融結合腎血管栓塞術治療瘤體較大的腎癌是一種安全、可行的方法。各種細胞因子的分泌異常及異常炎癥細胞的出現在RCC的發病過程中發揮著重要的作用[4], 如干擾素-α(IFN-α)[5]、干擾素-γ(IFN-γ)[6]、白介素-2(IL-2)[7]、白介素-4(IL-4)[8]、白介素-6(IL-6)[9]、白介素-9(IL-9)[10]、白介素-10(IL-10)[11]等。本文通過檢測RCC患者血清中IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10水平在治療前及治療后1周，1、3個月的變化，探討細胞因子在RCC疾病發生中的作用，現報告如下。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取本院2012年1月—2014年6月住院患者120例，男78例，女42例，年齡26～69歲，平均年齡(2.5±13.4)歲，病理診斷為腎細胞癌患者。所有病例都未合并或已排除其他疾病如腎結核、腎結石、腎感染性疾病、腎良性腫瘤、腎盂腫瘤、腎間葉腫瘤、后腹腔其他腫瘤等；所有患者術前均未行放療、化療、免疫治療或靶向治療。正常對照組30例，為本院健康體檢人群。

1.2　方法

人IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10 ELISA試劑盒均購于江蘇凱基生物科技發展有限公司，酶標儀為BIO-RAD公司的Benchmark酶標儀。

RFA治療組(60例):根據腫瘤的直徑、位置以及鄰近血管與臟器的關系，分為超聲引導下經皮射頻消融術、腹腔鏡輔助下射頻消融術以及開放射頻消融術。根治術組(60例)均采用腹腔鏡腎腫瘤根治性切除術。

所有病例均于術前1 d和治療后1周, 1、3個月清晨空腹抽取靜脈血3 mL, 靜脈血標本采集后應立即離心,將獲得的血清置-70 ℃冰箱保存待檢。采用雙抗體夾心ELISA法檢測所有標本的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量，檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3　統計學處理

采用SPSS 20.0軟件進行統計學處理，結果均以均數±標準差表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

各組標本血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10檢測結果見表1。RCC患者除血清IL-4外, IFN-γ、IL-6及IL-10測定結果與對照組比較有顯著差異。RFA組術后血清IFN-γ水平均高于術前(P<0.05), 術后1周的IL-6、IL-10水平較術前均升高(P<0.05), 術后1、3個月較術前均下降(P<0.05); 根治組術后1周IFN-γ水平較術前升高(P<0.05), 術后1、3個月與術前比較無顯著差異(P>0.05)，術后1周IL-6水平較術前升高(P<0.05), 術后1個月與術前比較無顯著差異(P>0.05), 術后3個月較術前明顯下降(P<0.05), 術后1周及1月的IL-10水平較術前升高(P<0.05),術后3個月與術前比較無顯著差異(P>0.05); 2組IL-4水平手術前后均無顯著差異(P>0.05)。

表1　RCC患者治療前后與對照組血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10檢測情況比較　pg/mL

與對照組比較, *P<0.05; 與同組治療前比較, #P<0.05。

3討論

免疫因素在惡性腫瘤的發生發展中發揮了重要作用[12], 機體的荷瘤狀態會引發免疫應答，機體發揮抗腫瘤免疫反應以細胞免疫為主，主要效應細胞是CD4+和CD8+T淋巴細胞。CD4+T細胞中的Th1型細胞和CD8+T細胞中的Tc1型細胞可釋放IL-2、IFN-γ等MHCⅠ類分子來刺激NK細胞和CTL細胞活化，激活單核細胞、巨噬細胞和NK細胞介導的腫瘤細胞殺傷途徑，促進腫瘤細胞凋亡；而CD4+T細胞中的Th2型細胞和CD8+T細胞中的Tc2型細胞可分泌IL-4、IL-6、IL-10等MHCⅡ分子來抑制MHCⅠ類分子的表達，降低抗原遞呈能力，影響CTL對腫瘤抗原的識別，使腫瘤細胞逃避特異性CTL的殺傷作用[13]。IL-10在介導免疫耐受方面具有重要作用。Th1、Th2型細胞因子水平及比例變化在機體免疫調節中具有重要意義, Th2向Th1漂移可促進抗腫瘤效應，若Th1/Th2比例向Th2偏移則會造成免疫抑制狀態，干擾抗腫瘤免疫反應，有可能發生腫瘤細胞的免疫逃避[14]。

腎癌患者免疫功能缺陷和紊亂, CD4+T細胞水平和CD4+/CD8+比值明顯降低CD8+T細胞水平升高[15]。本研究結果顯示，腎癌患者射頻消融術及根治性手術1周，各種細胞因子的表達較術前均有明顯上升，且2組患者細胞因子水平相當，但在術后1個月及3個月后, 2組患者血清細胞因子水平出現顯著性差異。其可能原因為：術后1周時由于手術過程中的創傷、出血、應激等因素可導致機體不同程度的免疫功能紊亂以及術后炎性反應導致了細胞因子的大量釋放，因此在1周時未表現出顯著性差異，當術后1個月患者細胞因子水平的差異才逐漸表現出來，根治組患者基本恢復到術前水平, RFA組IFN-γ水平明顯升高, IL-6、IL-10水平降低。

臨床實驗[16]表明, IFN-γ水平升高有助于機體抗腫瘤免疫功能的恢復，促進腫瘤細胞的凋亡效應; IL-4可誘導腫瘤免疫并可排斥已形成的惡性腫瘤; IL-6水平的降低有利于解除機體的免疫抑制狀態，增強免疫功能; IL-10水平的下降還能刺進Th1細胞及其分泌的細胞因子的作用，提高其抗原遞呈能力，減少對腫瘤細胞的免疫耐受[17]。本研究中RFA治療后腎癌患者血清IFN-γ水平明顯升高, IL-6、IL-10水平降低，這種細胞因子的改變提示RFA治療可以上調患者體內Th1型細胞因子的表達，同時抑制患者Th2型細胞因子的表達，促進Th1/Th2比例向Th2逆轉，增強了腎癌患者的機體抗腫瘤免疫反應，與國外報道一致[18]。由于本文中檢測的免疫指標有限，隨訪時間較短，因此需要加大標本量及檢測指標進一步研究其內在關系，使之與臨床關系更加確定。

綜上所述，分析腎癌患者治療前后的免疫相關細胞因子水平可以探查腎癌患者機體的免疫狀態，為腎癌的綜合治療、療效觀察、手術方法評價及預后判斷等提供了新的思路。

參考文獻

[1]仉潔, 鐘理, 石偉, 等. 腎細胞癌免疫治療的研究進展[J] .中國腫瘤生物治療雜志, 2013, 20(1): 120.

[2]楊豐強, 劉敏, 朱凱, 等. 腎癌患者血清中可溶性人類主要組織相容性復合體Ⅰ類鏈相關基因A蛋白的表達和臨床意義[J]. 上海醫學, 2013, 36(7): 880.

[3]Yamkado K, Nakatsuka A, kobayashi S, et al. Radiofrequency ablation combined with renal arterial embolization for the treatment of unresectable renal cell carcinoma larger than 3.5cm: initial experience[J]. Cardiovaasc Intervent Radiol, 2006, 29: 389.

[4]Topalian S, Weiner G, Pardoll D.Cancer immunotherapy comes of age [J]. J Clin Oncol, 2011, 29(36): 4828.

[5]鮑鎮美. 腎癌的生物治療[J]. 實用腫瘤雜志, 2010, 15: 7.

[6]Cheng C, Qu Q X, Shen Y, et al.Overexpression of B7-H4 in tumor infiltrated dendritic cells[J]. J Immunoassa Immunochem, 2011, 32(4): 353.

[7]馬登揚, 陳挺, 蔣悅, 等. 干擾素α(IFN-α)和白細胞介素2(IL-2)聯合應用預防腎癌根治術后復發和轉移的遠期效果評價[J]. 海峽藥學, 2013, 25(6): 59.

[8]邊寶娟. 特發性腎病綜合征血清IL-2、IL-4、IL-6的臨床意義[J]. 現代醫院, 2011, 11(3): 10.

[9]趙國志, 劉陽, 賴永通, 等. 檢測血清可溶性白介素- 6 受體的動態變化在腎移植中的臨床應用及其價值[J]. 重慶醫科大學學報, 2013, 38(3): 300.

[10]余麗芳, 高建飛, 章必成. 輔助性T細胞9與腫瘤免疫[J].臨床誤診誤治, 2013, 26(6): 102.

[11]Ljungberg B, Cowan N, Hanbury D, et al. EAU guidelines on renal cell carcinoma: the 2010 update[J]. Eur Urol, 2010, 58: 398.

[12]Topalian S L, Weiner G J, Pardoll D M.Cancer immunotherapy comes of age [J].J Clin Oncol, 2011, 29: 4828.

[13]陳偉, 張金平, 王林輝, 等. 局限性腎透明細胞癌術后應用干擾素輔助治療免疫功能分析[J]. 第二軍醫大學學報, 2012, 33(9): 1028.

[14]閻永貞, 那可, 魏曉東, 等. 腫瘤免疫逃逸機制的研究進展[J]. 復旦學報: 醫學版, 2013, 40(5): 619.

[15]McAchran S, Lesani O, Resnick M. Radiofrequency ablation of renal tumors: past, present, and future[J].Urology, 2005, 66(5): 15.

[16]王丹鳳, 時燕萍. 子宮肌瘤與機體免疫功能相關性探討[J].遼寧中醫藥大學學報, 2012, 6(11): 100.

[17]于春寶, 左云, 王俊玲, 等.肺結核病人細胞免疫功能的研究[J].臨床肺科雜志, 2008, 13(2): 138.

[18]Mickisch G H. Rational selection of a control arm for randomised trials in metastaic renal cell carcinoma[J]. Eur Urol, 2003, 43(6): 670.

Expressions and significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 in treatment of patients with renal cell carcinoma

WEI Xuefei, XU Pei, CHEN Zairong,GUO Wanhua

(DepartmentofNuclearMedicine,NanjingDrumTowerHospitalAffiliatedtoMedical

CollegeofNanjingUniversity,Nanjing,Jiangsu, 210008)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expressions and clinical significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before and after operation in patients with renal cell carcinoma by treatment of radiofrequency ablation and radical operation. MethodsELISA was used to detect the levels of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before operation and one week, one month and three months after operation in 120 patients with renal cancer. ResultsLevels of IFN-γ、IL-6、IL-10 increased significantly one week after operation in both of RFA group and radical operation group (P<0.05). IFN-γ increased significantly one month and three month after operation in the RFA group (P<0.05), while IL-10 increased significantly one month after operation in the radical operation group (P<0.05). There was no significant difference of IL-4 level before and after operation in both groups (P>0.05). ConclusionDetection of cytokine levels before and after treatment in patients with renal cancer is beneficial for monitoring disease development, evaluating surgical effects and judging prognosis.

KEYWORDS:interferon-γ; interleukin-4; interleukin -6; interleukin-10; renal cell carcinoma

通信作者:郭萬華, E-mail: wanhuaguo@163.com

基金項目:國家自然科學基金資助項目(81171363)

收稿日期:2014-08-20

中圖分類號:R 692

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)07-068-03DOI: 10.7619/jcmp.201507019