牙周基礎治療對牙周炎患者齦溝液和血清IL-6、IL-8和PAF水平的影響

趙　靚, 曹　遠

(沈陽醫學院附屬中心醫院 口腔科, 遼寧 沈陽, 110024)

牙周基礎治療對牙周炎患者齦溝液和血清IL-6、IL-8和PAF水平的影響

趙靚, 曹遠

(沈陽醫學院附屬中心醫院 口腔科, 遼寧 沈陽, 110024)

摘要:目的探討牙周基礎治療對牙周炎患者齦溝液和血清白細胞介-6 (IL-6)、IL-8和血小板活化因子(PAF)水平的影響。方法慢性牙周炎患者45例設為實驗組，接受牙周基礎治療。另選取30例牙周健康且無全身系統疾病患者為對照組。觀察實驗組治療前和治療后1個月牙周袋探診深度(PD)和附著喪失(AL)參數變化，以及齦溝液中IL-6、IL-8和PAF含量變化，并與對照組比較。結果①治療后實驗組PD和AL值均較治療前顯著下降(P<0.05或P<0.01); ② 治療前，實驗組血清和齦溝液中IL-6、IL-8和PAF水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)，治療后實驗組上述指標均較治療前降低，除齦溝液中IL-8水平外，差異有統計學意義(P<0.05); ③ 相關性分析顯示，慢性牙周炎患者PD值與齦溝液PAF水平、齦溝液IL-6和血清IL-6呈正相關(P<0.05); AL值與齦溝液PAF、血清PAF和血清IL-6、水平呈正相關(P<0.05)。結論IL-6、IL-8和PAF可能在牙周炎疾病中發揮著重要作用，牙周基礎治療能有效改善局部牙周情況，促進局部炎癥控制。

關鍵詞:牙周炎; 牙周基礎治療; 炎癥因子; 齦溝液

牙周炎是常見的口腔細菌感染疾病，以牙周袋形成、牙根面結締組織附著喪失和牙槽骨吸收為主要特點。牙周炎疾病過程涉及細菌及其毒性產物引發的感染，不僅僅是口腔局部的慢性炎癥反應，還和全身多種疾病，如冠狀動脈粥樣硬化性心臟病等相關[1]，而齦溝液在牙齦組織的防御系統中占有重要地位。目前，牙周基礎治療作為牙周序列治療的第一階段，能有效祛除牙菌斑、毒性產物和病變組織，改善預后[2]。本研究通過觀察牙周炎患者基礎治療前后齦溝液中相關炎癥因子水平變化，初步探討牙周基礎治療對患者局部和全身炎癥反應的影響。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取2013年6月—2014年6月于沈陽醫學院附屬中心醫院口腔科就診的慢性牙周炎患者45例為研究對象，設為實驗組，其中男26例，女19例；年齡40～72歲，平均(57.93±4.26)歲。牙周炎診斷依據Armitage等[3]關于牙周疾病分類標準，并符合: ① 口腔內殘留牙≥20顆(磨牙≥4顆)，牙周袋探診深度(PD)≥5 mm占全口1/3以上，根據附著喪失(AL)程度為中重度(AL≥3 mm); ② 入組前 6個月內無牙周疾病治療史，3個月內無抗生素或非甾體類抗炎藥使用史。排除標準: ① 侵襲性牙周炎患者; ② 伴有嚴重的系統疾病、心臟病或惡性腫瘤患者。另選取同期30例牙周健康且無全身系統疾病患者為對照組，其中男15例，女15例；年齡39～70歲，平均(57.21±4.84)歲。2組性別、年齡等一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。受試者均簽署知情同意并自愿配合相關檢查。

1.2　方法

1.2.1治療方法：慢性牙周炎患者接受口腔衛生宣教和牙周治療，包括牙周清潔、齦下刮治、根面平整和清除牙根菌斑和牙石。

1.2.2樣本收集: ① 口腔檢查：檢測研究對象全口牙均檢測頰、舌側遠中、正中和近中6個位點的PD、AL并計算平均值; ② 齦溝液收集：測試前囑患者漱口，選取檢測牙，氣槍吹干取樣牙頰面及鄰近牙齦組織，清潔器去除菌斑，將事先備好的(2×10) mm無菌濾紙輕輕插入取樣牙周袋，直至輕微阻力為止，30 s后取出，若濾紙條帶血或沾染唾液則重新取樣。之后立即將濾紙條裝入Eppendorf管密封, -70 ℃保存備檢; ③ 血清樣本收集：清晨空腹狀態下抽取10 mL外周靜脈血，3 000 r/min離心15 min后收集血清，并置于Eppendorf管中后密閉封口，-70 ℃冰箱保存備檢; ④ 實驗室檢查。裝有濾紙條的Eppendorf管解凍后，加入1 mL PBS緩沖液放置1 h，室溫下震蕩10 min后于4 ℃低溫下離心20 min，吸取離心后上清液分裝與另一Eppendorf管內備用。采用雙抗夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測齦溝液中血小板活化因子(PAF)水平，齦溝液和血清中白細胞介素6(IL-6)和IL-8水平，分析過程嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3　觀察指標

觀察實驗組治療前和治療后1個月PD、AL、SBI和PI參數變化，以及齦溝液中IL-6、IL-8和PAF含量變化，并與對照組比較。

1.4　統計學處理

2結果

2.1　2組PD和AL比較

治療前，實驗組PD和AL值均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05); 接受治療后1個月，實驗組PD和AL值均顯著下降(P<0.05或P<0.01), 但仍然高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1　2組PD和AL比較(±s)　mm

表1　2組PD和AL比較(±s)　mm

組別PDAL對照組(n=30)1.51±0.160.18±0.07實驗組(n=45)治療前3.42±0.64*3.11±0.33*治療后3.05±0.33*#2.85±0.28*##

與對照組比較，*P<0.05;

與治療前比較，#P<0.05, ##P<0.01

2.2　2組齦溝液和血清中IL-6、IL-8和PFA水平

治療前，實驗組血清和齦溝液中IL-6、IL-8和PAF水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。治療后實驗組上述指標均較治療前降低，除齦溝液中IL-8水平外，差異有統計學意義(P<0.05)。治療后實驗組上述指標水平仍然高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。見表2。

表2　2組齦溝液和血清中IL-6、IL-8和PFA水平(±s)

表2　2組齦溝液和血清中IL-6、IL-8和PFA水平(±s)

組別IL-6血清/(pg/mL)齦溝液/(ng/mL)IL-8血清/(pg/mL)齦溝液/(pg/mL)PAF血清(ng/mL)齦溝液/(ng/mL)對照組(n=30)12.39±3.210.42±0.132.02±0.5721.20±4.922.26±0.4615.20±2.62實驗組(n=45)治療前19.87±3.68**3.26±1.32*7.02±2.21*92.52±31.40*7.66±3.21312.33±122.51*治療后15.42±2.29**##1.78±0.56*#4.54±1.63*#83.77±27.20*5.10±1.21#132.49±69.31*#

與對照組比較，*P<0.05, **P<0.01; 與治療前比較，#P<0.05, ##P<0.01。

2.3　炎癥因子水平與PD和AL相關性分析

相關性研究顯示，慢性牙周炎患者中, PD值與齦溝液PAF值(r=0.32,P<0.05), 齦溝液IL-6(r=0.29,P<0.05)和血清中IL-6(r=0.21,P<0.05)呈正相關；AL值與齦溝液PAF值(r=0.28，P<0.05)，血清PAF(r=0.13，P<0.05)和血清中IL-6(r=0.36，P<0.05)呈正相關。

3討論

慢性牙周炎以牙周袋和袋壁持續性炎癥、牙槽骨吸收和牙齒逐漸松動為臨床表現，是成年人牙齒缺失的主要原因。研究[4]顯示，牙周炎病理改變和機體免疫應答過程中產生的多種細胞因子有關，而后者也參與牙周組織修復、改建。IL-6是一種多效應細胞因子，與機體的免疫防御功能密切相關，除細菌、病毒等外源性因素外，替他炎癥細胞因子促使其表達和釋放增加[5]。有研究[6]顯示，IL-6通過參與調節急性炎性期蛋白質的生成，加重炎性反應，減弱牙周組織修復能力，加重牙槽骨破壞進程。Ishida等[7]從基因闡述了IL-6啟動子區域內單一CpG去甲基化狀態可能導致血清IL-6升高，并參與慢性牙周炎發生發展。本研究中，與對照組相比，實驗組治療前血清和齦溝液中IL-6含量均顯著升高，提示IL-6和牙周局部和全身炎癥程度相關，于常春榮等[8]研究結論基本一致。但Severino等[9]報道了22例慢性牙周炎患者接受牙周基礎治療后1和3個月，齦溝液中lL-6水平差異無統計學意義，考慮可能和入組患者自身差異有關。IL-8是一種較強的中性粒細胞趨化劑，能夠聚集并激活中性粒細胞釋放超氧化物，造成組織傷害，于CRP一樣是心血管疾病的重要標志物。IL-8作為一種雙向調節因子，其濃度、總量的變化能反映牙周組織炎癥狀況[10]。本研究中，實驗組齦溝液和血清中IL-8水平較對照組增高，但治療后齦溝液中IL-8水平變化差異不顯著，這與朱治宇等[11]研究結論存不同，可能與研究納入人群年齡不同有關。

另一方面，PAF在炎癥反應激活和血栓形成中扮演著重要作用，是動脈粥樣硬化的關鍵啟動因子[12]，主要由單核細胞、中性粒細胞、血小板等分泌，發揮細胞內、外信號傳導作用。研究[13]提示，PAF來源于感染的牙周組織而并非唾液腺，牙周炎患者經基礎治療后齦溝液中PAF濃度會明顯降低。本研究中，經牙周基礎治療后實驗組齦溝液中PAF水平顯著下降。目前，對于PAF的研究著重于在心血管和動脈粥樣硬化疾病方面的研究，CHEN等[14]報道了相對于冠心病患者，冠心病并發牙周炎患者齦溝液中PAF水平顯著增高，但單純牙周炎和冠心病患者間并無顯著差異。本研究中，牙周炎患者AL值與齦溝液和血清PAF水平呈正相關，提示PAF參與口腔炎癥反應，潛在增加心血管疾病的易感性[15]。

綜上所述，牙周組織的破壞可能與局部升高的炎癥因子水平有關，并刺激機體產生全身免疫反應，IL-6、IL-8和PAF可能在牙周炎疾病中發揮著重要作用，牙周基礎治療能有效改善局部牙周情況，促進局部炎癥控制。

參考文獻

[1]Tonetti M S, Dyke T E. Periodontitis and atherosclerotic cardiovascular disease: consensus report of the Joint EFP/AAP Workshop on Periodontitis and Systemic Diseases[J]. J Clin Periodontol, 2013, 40(s14): 24.

[2]Saito A, Hosaka Y, Kikuchi M, et al. Effect of initial periodontal therapy on oral health-related quality of life in patients with periodontitis in Japan[J]. J Periodontol, 2010, 81(7): 1001.

[3]Armitage G C. Periodontal diagnoses and classification of periodontal diseases[J]. Periodontol 2000, 2004, 34(1): 9.

[4]陳宏宇, 巫家曉. 牙周炎的研究進展[J]. 醫學綜述, 2013, 19(6): 1037.

[5]Zhang Y, Zhong L, Liang P, et al. Relationship between microorganisms in coronary atheromatous plaques and periodontal pathogenic bacteria[J]. Chin Med J(Engl), 2008, 121(16): 1595.

[6]王磊. 白細胞介素 6 與牙周炎的關系[J]. 牙體牙髓牙周病學雜志, 2003, 13(1): 53.

[7]Ishida K, Kobayashi T, Ito S, et al. Interleukin-6 gene promoter methylation in rheumatoid arthritis and chronic periodontitis[J]. J Periodontol, 2012, 83(7): 917.

[8]常春榮, 韓東, 孫尚敏, 等. 牙周基礎治療對慢性牙周炎患者齦溝液白細胞介素 6, 腫瘤壞死因子α及血清高敏C反應蛋白的影響[J]. 中國醫科大學學報, 2013, 42(2): 135.

[9]Severino V O, Napimoga M H, de Lima Pereira S A. Expression of IL-6, IL-10, IL-17 and IL-8 in the peri-implant crevicular fluid of patients with peri-implantitis[J]. Arch Oral Biol, 2011, 56(8): 823.

[10]Tsai C C, Ho Y P, Chen C C. Levels of interleukin-1 beta and interleukin-8 in gingival crevicular fluids in adult periodontitis[J]. J Periodontol, 1995, 66(10): 852.

[11]朱治宇, 劉國勤. 慢性牙周炎治療前后患牙齦溝液中IL-8和TNF-α水平變化比較[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2010, 26(11): 1111.

[12]Yost C C, Weyrich A S, Zimmerman G A. The platelet activating factor (PAF) signaling cascade in systemic inflammatory responses[J]. Biochimie, 2010, 92(6): 692.

[13]Keles G C, Cetinkaya B O, Ayas B, et al. Levels of gingival tissue platelet activating factor after conventional and regenerative periodontal surgery[J]. Clin Oral Investig, 2007, 11(4): 369.

[14]Chen H, Zheng P, Zhu H, et al. Platelet-activating factor levels of serum and gingival crevicular fluid in nonsmoking patients with periodontitis and/or coronary heart disease[J]. Clin Oral Investig, 2010, 14(6): 629.

[15]Schenkein H A, Loos B G. Inflammatory mechanisms linking periodontal diseases to cardiovascular diseases[J]. J Clin Periodontol, 2013, 40(s14): 51.

Influence of periodontal basic treatment

on levels of GCF and serum IL-6, IL-8

and PAF in patients with periodontitis

ZHAO Jing, CAO Yuan

(DepartmentofStomatology,AffiliatedCentralHospitalofShenyangMedicalCollege,

Shenyang,Liaoning, 110024)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the influence of periodontal basic treatment on the levels of gingival crevicular fluid (GCF) and serum interleukin (IL)-6 and IL-8 as well as platelet activating factor (PAF) in patients with periodontitis. MethodsA total of 45 patients with periodontitis were selected as experimental group and treated with periodontal basic treatment. Another 30 periodontal healthy people without general systematic diseases were selected as control group. The probing depth (PD) and attachment loss (AL) of periodontal pocket as well as level changes of IL-6, IL-8 and PAF in GCF in the experimental group before treatment and 1 month after treatment were observed. Results① After treatment, PD and AL values decreased evidently in the experimental group (P<0.05 orP<0.01); ② Before treatment, levels of IL-6, IL-8 and PAF in serum and GCF were markedly higher in the experimental group than the control group (P<0.05 orP<0.01), and these indexes after treatment in the experimental group reduced notably than those before treatment except for IL-8 level in GCF(P<0.05); ③ Correlation analysis showed that PD value was in positive association with PAF level in GCF and IL-6 level in both GCF and serum (P<0.05), whereas AL value was positively associated with PAF level in both GCF and serum and IL-6 level in serum in patients with chronic periodonitis (P<0.05). ConclusionIL-6, IL-8 and PAF levels play important roles in periodonitis, and periodontal basic treatment can effectually improve local periodontal conditions and promote the control of local inflammation.

KEYWORDS:periodontitis; periodontal basic treatment; inflammatory factor; gingival crevicular fluid

中圖分類號:R 781.4

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)19-067-03

DOI:10.7619/jcmp.201519020