α1-酸性糖蛋白、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白評價(jià)炎性狀態(tài)及與C反應(yīng)蛋白相關(guān)性分析

α1-酸性糖蛋白、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白評價(jià)炎性狀態(tài)及與C反應(yīng)蛋白相關(guān)性分析

賀政新，張麗娜，安黎云，陳晶*

(解放軍白求恩國際和平醫(yī)院 檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)科，河北 石家莊050082)

機(jī)體炎性狀態(tài)評估是臨床檢驗(yàn)診斷重要的分析內(nèi)容，對自身免疫性和感染性等疾病的診斷、治療和病情監(jiān)測具有重要意義。當(dāng)前，對血清一些急性期蛋白(acute-phase protein，APP)水平進(jìn)行測定用于監(jiān)測炎性狀態(tài)已經(jīng)在臨床得到廣泛的開展，最為常用的指標(biāo)為C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)[1]。α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein,AAG)、觸珠蛋白(HP)和銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin,CP)也是常見的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在臨床亦有廣泛應(yīng)用，本文通過探討這三項(xiàng)指標(biāo)的檢測結(jié)果對炎癥診斷的意義及與CRP的一致性和相關(guān)性，以進(jìn)一步了解血清AAG、HP和CP在臨床炎癥診療中的意義和價(jià)值。

1材料與方法

1.1研究對象

2011年3月至2011年7月我院住院和門診懷疑存在炎性反應(yīng)的病人164例，其中男性88例，年齡10天至93歲，中位年齡38歲；女性66例，年齡16天至77歲，中位年齡39歲，剔除二次復(fù)查的數(shù)據(jù)，健康體檢者30例(對照組)，男性15例，女性15例，年齡3歲至84歲，中位年齡35歲。根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)、PCR病毒定量檢查等病原學(xué)檢查，結(jié)合患者癥狀體征、外周血和骨髓細(xì)胞學(xué)、胸片等綜合判斷，將患者分為細(xì)菌感染組、可疑炎癥組合病毒感染組。①細(xì)菌感染組39人，其中男性23人，女性16人，年齡3月至93歲，中位年齡48歲。包括肺炎19例，急性胃腸炎9例，胸膜炎6例，其它部位細(xì)菌感染5例。②可疑炎癥組82例，其中男性42例，女性40例，年齡3月至86歲，中位年齡38歲。包括發(fā)熱待查38例，自身免疫病26例，癌癥9例，白血病7例，糖尿病2例。③病毒感染組33例，其中男性18例，女性15例，年齡2月至63歲，中位年齡36歲。包括乙型肝炎21例，病毒性感冒7例，水痘3例，皰疹病毒感染2例，肝炎患者中4例伴有肝硬化。

1.2血標(biāo)本的采集

抽取清晨空腹肘靜脈血3 ml，注入無抗凝劑的真空采血管中，4 000 rpm離心10分鐘，取血清測定。

1.3儀器和試劑

AAG、HP、CP和CRP測定試劑為德國西門子公司生產(chǎn)，并使用相配套的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控物質(zhì)，該試劑檢測原理基于免疫比濁法，所用儀器為德國西門子公司特定蛋白分析儀(型號BNP Prospec)。CRP參考范圍參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版》為<8.2 mg/L，AAG、HP、CP參考范圍參照試劑說明書分別為0.5-1.2 g/L，0.3-2.0 g/L和0.2-0.6 g/L。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1細(xì)菌感染組、病毒感染組AAG、HP、CP和CRP水平比較

可疑炎癥組主要為發(fā)熱待查和免疫性疾病患者，其特點(diǎn)是不能確定其發(fā)生炎癥與否，所以對這一組數(shù)據(jù)不進(jìn)行血清急性期蛋白水平的比較分析。細(xì)菌感染組、病毒感染組與正常對照組結(jié)果見表1。AAG、HP和CRP在細(xì)菌感染組患者血清中含量明顯升高，與病毒感染組、正常對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表1　AAG、HP、CP和CRP在不同組間水平比較

*:與正常對照組相比，P<0.05;#:與病毒感染組相比，P<0.05

2.2AAG、HP和CRP 血清水平診斷細(xì)菌性炎癥的敏感度與特異度

以臨床細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，繪制AAG、HP、CP和CRP診斷細(xì)菌感染的ROC曲線(圖1)，并根據(jù)曲線計(jì)算AAG、HP和CRP診斷細(xì)菌感染的敏感度和特異度。

圖1　AAG、HP、CP和CRP四種急性期蛋白診斷細(xì)菌性

根據(jù)所繪制的ROC曲線，CRP、AAG和HP的AUC值分別為0.989、0.914、和0.801，對細(xì)菌性炎癥有較高的診斷價(jià)值，而CP的 AUC值為0.427，小于0.5，可視為無診斷價(jià)值。AAG最佳臨界值為1.38 g/L，此時(shí)敏感度和特異度分別為82.1%和93.3%；HP最佳臨界值為2.05 g/L，此時(shí)敏感度和特異度分別為69.2%和90.0%；CRP的最佳臨界值為2.65 mg/L，此時(shí)敏感度和特異度分別為97.4%和90.0%(表2)。

表2　AAG、HP和CRP對細(xì)菌性炎癥診斷的敏感性

2.3AAG、HP、CP和CRP判斷炎癥的一致性與相關(guān)性分析

以AAG、HP、CP和CRP各自的參考值上限為標(biāo)準(zhǔn)，將超過參考上限的樣本檢測結(jié)果定義為“陽性”，在參考范圍之內(nèi)的檢測結(jié)果定義為“陰性”，用以分析這AAG、CP和HP對炎癥判斷與CRP的一致性(表3)。經(jīng)kappa檢驗(yàn)，AAG與CRP有較好的一致性(kappa=0.753，P<0.01)，HP與CRP對于炎癥判斷也存在一致性(kappa=0.575，P<0.01)。

表3　AAG、HP、CP與CRP判斷炎性狀態(tài)的一致性

對AAG、HP、CP和CRP四組數(shù)據(jù)進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，AAG、HP與CRP有良好的相關(guān)性(表4)，AAG與HP也呈明顯相關(guān)(r=0.715，P<0.01)，但CP與其余三項(xiàng)指標(biāo)相關(guān)程度均不高。

表4　AAG、HP與CRP的相關(guān)性分析

3討論

急性期蛋白是臨床用以判斷患者機(jī)體炎性狀態(tài)的重要指標(biāo)，作為微生物培養(yǎng)的重要補(bǔ)充手段協(xié)助診斷。它們伴隨組織損傷、局部缺血、急性感染與炎癥反應(yīng)而升高，在感染、炎癥、組織損傷等應(yīng)激原作用于機(jī)體后的短時(shí)間(數(shù)小時(shí)至數(shù)日)內(nèi)含量發(fā)生較大幅度的變化，并在機(jī)體的非特異性免疫中發(fā)揮著重要的作用[3,4]。急性期蛋白由糖皮質(zhì)激素介導(dǎo)肝細(xì)胞合成和分泌，多種細(xì)胞因子參與了急性期蛋白的基因表達(dá)和調(diào)控，其中以IL-6影響最大[5]。不同炎癥過程、不同組合的細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同種類，不同濃度的APP，反過來可影響炎癥的性質(zhì)、程度和轉(zhuǎn)歸。

臨床上，APP常被用作一些炎癥反應(yīng)或感染性疾病的預(yù)測和診斷工具，其變化不受發(fā)熱、血沉加快和白細(xì)胞增加等因素的影響。其中，C-反應(yīng)蛋白的檢測應(yīng)用最為廣泛，CRP含量是一項(xiàng)代表炎癥與組織壞死程度的指標(biāo)，在炎癥和損傷早期含量就會增高，在有效抗炎治療和感染控制后其濃度則迅速下降，因此CRP可作為細(xì)菌感染的早期診斷指標(biāo)，也是區(qū)分病毒與細(xì)菌感染的參考指標(biāo)之一[6]。AAG、HP和CP也是臨床用于判斷炎性狀態(tài)的檢測指標(biāo)。AAG是血清中類黏蛋白的主要成分之一，主要由肝巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞產(chǎn)生，被認(rèn)為是反映炎癥活動或急性狀態(tài)的敏感指標(biāo)[7]。觸珠蛋白為陽性急性期蛋白，主要生物學(xué)特性是與游離的血紅蛋白特異性地牢固結(jié)合為復(fù)合物，此復(fù)合物不能從腎小球?yàn)V過，防止血紅蛋白損害腎臟，也是機(jī)體加強(qiáng)鐵再利用的一種方式[8]。本研究顯示，AAG、HP與CRP類似，在炎癥反應(yīng)時(shí)明顯升高，可以用來區(qū)分細(xì)菌性感染和病毒性感染。通過繪制對細(xì)菌性感染診斷的ROC曲線，可以認(rèn)為這三個(gè)指標(biāo)(AAG、HP、CRP)對細(xì)菌性炎癥有較高的診斷價(jià)值，在臨界值選取合適的情況下，檢測對于診斷細(xì)菌感染的敏感度可以分別達(dá)到82.1%、69.2%和97.4%，特異度可以分別達(dá)到93.3%、90.0%和90.0%。在機(jī)體炎性狀態(tài)判斷中，AAG、HP與CRP有較高的一致性，在血清中濃度變化也存在較好的相關(guān)性。由此可見，AAG、HP和CRP一樣，可以作為臨床用于判斷機(jī)體炎性狀態(tài)的重要指標(biāo)，對于細(xì)菌性炎癥有良好的診斷價(jià)值。CP屬于α2糖蛋白，主要由肝臟合成，是臨床上診斷Wilson肝豆?fàn)詈俗冃宰钪匾闹笜?biāo)[9]，在感染性疾病和組織損傷時(shí)，血清CP含量升高[10]。從我們統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)看，CP血清水平在細(xì)菌感染患者、病毒感染患者和健康人之間并無顯著變化，在ROC曲線上AUC<0.5，提示該指標(biāo)對炎性疾病的診斷沒有價(jià)值。這一結(jié)論與國內(nèi)部分研究相悖[11,12]，與金耀建[13]等的研究結(jié)論一致，說明這一問題還可以通過更精確的測定手段和更精細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來論證。

急性期蛋白多種多樣，在炎性疾病的臨床診斷治療過程當(dāng)中，可以考慮同時(shí)檢測多種急性期蛋白并對它們的變化進(jìn)行動態(tài)性監(jiān)測，以消除不同指標(biāo)在血清中變化規(guī)律的不同步及治療因素、個(gè)體差異等對單一指標(biāo)的影響，有助于了解疾病的發(fā)展及臨床療效，對判斷病情和選擇治療方法具有一定的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]Pultar J,Sauer U,Domnanich P,et al.Aptamer-antibody on-chip sandwich immunoassayfor detection of CRP in spiked serum[J].Biosens Bioelectron,2009,24(5):1456.

[2]陳衛(wèi)中,倪宗贊,潘曉平,等.用ROC曲線確定最佳臨界點(diǎn)和可疑值范圍[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2005,32(7):729.

[3]Gabay C,Kushner I.Acute-phase proteins and other systemic response to inflammation[J].N Engl J Med,1999,340:448.

[4]Trautwein C,Boker K,Manns MP.Hepatocyte and immune system:acute phase reaction as a contribution to early defence mechanisms[J].Gut,1994,35:1163.

[5]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].江蘇:東南大學(xué)出版社,2006：590-592.

[6]夏尤佳,沈朝斌,戴強(qiáng).C-反應(yīng)蛋白與小兒呼吸道感染關(guān)系的meta分析[J].臨床兒科雜志,2008,26(6):535.

[7]Vasileiadou K,Pantazidis G,Papadopoulou K et al.alpha1-Acid glycoprotein production in rat dorsal air pouch in response to inflammatory stimuli,dexamethasone and honey bee venom[J].Exp Mol Pathol，2010,89(1):63.

[8]李慶云,萬歡英,李敏,等.中國南方漢族人觸珠蛋白遺傳多態(tài)性與OSAHS合并高血壓的關(guān)系[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2008,28(9):1068.

[9]高正,劉浩.谷膠病患者血清銅、血漿銅藍(lán)蛋白和尿銅含量的評價(jià)[J].國外醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)地理分冊,2009,30(1):12.

[10]Musci G,Polticelli F,Calabrese L.Structure/function relationships in ceruloplasmin[J].Adv Exp Med Biol,1999,448:175.

[11]李玉峰,朱曉東,朱建幸,等.新生兒細(xì)菌感染血清免疫球蛋白M和銅藍(lán)蛋白的變化[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2003,18(6):440.

[12]周春紅.血清銅藍(lán)蛋白和a1酸性糖蛋白的檢測在兒童感染性疾病中的應(yīng)用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,23(12):1328.

[13]金耀建,溫懷凱.肺炎患兒血清中C-反應(yīng)蛋白、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、a1-酸性糖蛋白的檢測及其臨床意義[J].臨床兒科雜志,2002,20(8):480.

收稿日期：(2013-09-13)

文章編號：1007-4287(2015)03-0468-03

通訊作者*