尿液分析儀與顯微鏡檢測尿液WBC和RBC結(jié)果的探討

尿液分析儀與顯微鏡檢測尿液WBC和RBC結(jié)果的探討

孫圣明，肖世玉

(常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，湖南 常德415000)

尿液分析儀是一種半定量分析技術(shù)，操作簡便、快速、準(zhǔn)確、結(jié)果可靠，在許多國家已經(jīng)把它作為常規(guī)方法在臨床檢驗(yàn)中廣為應(yīng)用[1]。但隨著自動(dòng)化尿液分析儀的普及忽視了傳統(tǒng)的人工顯微鏡檢查,結(jié)果造成漏診或誤診。傳統(tǒng)的尿液顯微鏡檢測是一種物理檢測法，素有尿液有性成分檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”之稱。本文通過比較尿液分析儀與顯微鏡檢測尿液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的結(jié)果，就兩種方法結(jié)果不一致性問題進(jìn)行分析，對(duì)尿液分析儀篩檢尿液RBC及WBC正常標(biāo)準(zhǔn)加以探討，提高尿液檢測的準(zhǔn)確性，為臨床診治提供更準(zhǔn)確的依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1標(biāo)本隨機(jī)選取常德職院附屬第一醫(yī)院2013年3月到6月住院部需進(jìn)行尿常規(guī)檢查的1000例標(biāo)本作為研究對(duì)象，其中男性標(biāo)本 408 例，女性標(biāo)本 592 例。

1.1.2儀器與試劑MT-N600型尿液分析儀(長春瑞克醫(yī)療儀器有限公司)；CX21BIM-SET5生物顯微鏡(日本奧林巴斯)；低速離心機(jī)LC-32(安徽中科中佳，尿沉渣專用)；MT-N600尿液分析儀原裝配套的試紙條和質(zhì)控液(長春瑞克醫(yī)療儀器有限公司)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)本處理接收標(biāo)本、編號(hào)、充分混勻后分為2管，每管10 ml，并于2小時(shí)檢測完。

1.2.2尿液分析儀檢測檢測標(biāo)本前，先用MT-N600配套的質(zhì)控品進(jìn)行校準(zhǔn)。校準(zhǔn)后，取每份標(biāo)本的其中一管依次用配套的試紙條(均為同一批號(hào))浸入尿液1-2秒，取出試紙條置于吸水紙上將多余的尿液拭去，放入分析儀中，通過儀器檢測尿液中的紅細(xì)胞及白細(xì)胞水平。

1.2.3顯微鏡手工法取另一管標(biāo)本于離心機(jī)以1500轉(zhuǎn)/min進(jìn)行離心，5分鐘后取出標(biāo)本。傾倒或吸取上清液留取沉淀物0.2 ml，混勻后約取20 μl置于載玻片上，用18 mm×18 mm蓋玻片覆蓋后顯微鏡檢查。先用低倍鏡(10×10)觀察全片，在用高倍鏡(10×40)仔細(xì)觀察10視野中，檢查尿液中的紅細(xì)胞及白細(xì)胞水平，取其平均值，做好詳細(xì)的記錄。

1.2.4結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)尿液分析儀結(jié)果分為-、+/-、+、++、+++/++++五個(gè)等級(jí);顯微鏡檢測結(jié)果依據(jù)紅細(xì)胞大于3個(gè)/HP為陽性，白細(xì)胞大于5個(gè)/HP為陽性。

1.2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件包，利用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1尿液分析液與顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞和白細(xì)胞結(jié)果見表1、表2。結(jié)果顯示：尿液分析儀檢測白細(xì)胞的結(jié)果為(-)、(+/-)和(+)時(shí)，與顯微鏡檢測的結(jié)果差異較大，其不一致率為22.4%、19.2%、18.1%。尿液分析儀檢測紅細(xì)胞的結(jié)果為(+/-)和(+)時(shí)，與顯微鏡檢測的結(jié)果差異較大，其不一致率分別為84.9%、36.2%。

表1　尿液分析儀與顯微鏡檢測WBC的結(jié)果比較

表2　尿液分析儀與顯微鏡檢測RBC的結(jié)果比較

2.2紅、白細(xì)胞不同篩選標(biāo)準(zhǔn)與顯微鏡檢測結(jié)果比較尿液分析儀檢測白細(xì)胞和紅細(xì)胞分別以(+/-)和(+)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)與顯微鏡檢測的結(jié)果比較，見表3-6。結(jié)果顯示：白細(xì)胞不管是以尿液分析儀(+/-)還是(+)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)，兩方法陽性率差異較大(P>0.01)。紅細(xì)胞以尿液分析儀(+/-)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，兩方法陽性率差異較小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；以尿液分析儀(+)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，兩方法陽性率差異較大(P>0.01)。

表3　白細(xì)胞以尿液分析儀(+/-)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)

注：χ2=99.6,P<0.01

表4　白細(xì)胞以尿液分析儀(+)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)

注：χ2=276.4,P<0.01

表5　紅細(xì)胞以尿液分析儀(+/-)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)

注：χ2=3.3，P>0.05

表6　紅細(xì)胞以尿液分析儀(+)為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)

注：χ2=88.9，P<0.01

2.3紅細(xì)胞不同篩選標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較見表7。結(jié)果顯示：當(dāng)紅細(xì)胞篩選標(biāo)準(zhǔn)為(+/-)時(shí)，整體數(shù)據(jù)較為理想。

表7　紅細(xì)胞不同篩選標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比較

3討論

傳統(tǒng)顯微鏡鏡檢與尿液分析儀是基于兩種不同原理的檢測手段，前者通過顯微鏡的放大作用，直觀、真實(shí)地分析呈現(xiàn)于鏡下的細(xì)胞等有形成分；后者利用尿液中相應(yīng)的化學(xué)成分使尿多聯(lián)試帶上各種含特殊試劑的膜塊發(fā)生顏色變化，然后在尿液分析儀上進(jìn)行比色得出結(jié)果。因此總體檢測結(jié)果大致相符的情況下，也可能造成臨床上另一些化學(xué)分析法與鏡檢法結(jié)果不相符的情況。

尿液分析儀檢測白細(xì)胞原理是基于中性粒細(xì)胞中含有特異性酯酶，能水解試帶中的吲哚酚酯分解出吲哚和有機(jī)酶，吲哚酚可進(jìn)一步氧化成靛藍(lán)，或吲哚酚和重氮鹽反應(yīng)生成紫紅色縮合物而顯色，顏色深淺與中性粒細(xì)胞的含量成正比。但尿液白細(xì)胞中的其他細(xì)胞如單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞因其不含酯酶均不參加反應(yīng)。當(dāng)患者尿液白細(xì)胞為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞時(shí)便無法檢出，故造成一定的漏檢。當(dāng)尿液分析儀測白細(xì)胞的結(jié)果為(-)、(+/-)和(+)時(shí)，不如顯微鏡下看到的多。因而，造成兩者的差異較大。加上較高的葡萄糖濃度(160 mmol/L)或高比重可使WBC陽性率降低[2],還有乳糜尿及深棕色、尿蛋白>5 g/L或尿中大劑量先鋒霉素I或慶大霉素等時(shí),均產(chǎn)生假陰性結(jié)果。鏡檢的陽性率明顯高于尿液分析儀，所以白細(xì)胞(+/-)和(+)為篩選標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，兩法測得白細(xì)胞陽性有明顯差異(P<0.01)。當(dāng)然，白細(xì)胞的影響因素較多，除此之外如上皮細(xì)胞、女性患者白帶增多、陰道排泄物的污染及甲醛、呋喃坦啶導(dǎo)致白細(xì)胞遭到破壞[3]，使其特異性酯酶游離于尿中;以及炎癥反應(yīng)造成膿細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清楚，形態(tài)改變無法在顯微鏡下辨認(rèn)[4]都會(huì)造成干化學(xué)實(shí)驗(yàn)陽性，鏡檢為陰性，操作中應(yīng)注意。

尿液分析儀測紅細(xì)胞原理是利用游離血紅蛋白溶解RBC或肌紅蛋白中血紅素能催化過氧化氫釋放新生態(tài)氧，使色原氧化而顯色，其顏色深淺與血紅蛋白含量有關(guān)。尿液分析儀對(duì)血紅蛋白非常敏感，既可檢出完整的紅細(xì)胞，又可檢出游離的紅細(xì)胞，而鏡檢只能檢出完整的紅細(xì)胞，所以尿液分析儀檢測紅細(xì)胞為陰性時(shí)與鏡檢一致；部分標(biāo)本化學(xué)法為陽性，但鏡檢為陰性，如尿液分析儀結(jié)果為(+/-)和(+)時(shí)。尿液的滲透壓、酸堿度、肌紅蛋白、某些氧化物和細(xì)菌的污染使紅細(xì)胞被破壞[5，6]；腎病患者，紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道破壞或尿比重過低，尿pH值偏高，均易造成紅細(xì)胞破壞，造成所謂紅細(xì)胞干化學(xué)檢測的“假陽性”現(xiàn)象。所以尿液分析儀檢測紅細(xì)胞的陽性率高于顯微鏡，對(duì)于以紅細(xì)胞(+/-)為尿液紅細(xì)胞正常篩選標(biāo)準(zhǔn)較理想，也就不難理解。當(dāng)然，高維生素C(尿液中通常所含的少于1.42 mmol/L維生素C不會(huì)影響結(jié)果)、高比重、高蛋白會(huì)影響尿液分析儀的靈敏度;由于食物或藥物所致，尿液pH呈堿性，生成褐色顆粒[5]，會(huì)導(dǎo)致干化學(xué)試紙條失效，造成假陰性，但這些因素的影響較小。

尿液分析儀檢測篩選的目的是以不遺漏陽性病人為原則，顯微鏡檢查才是尿液檢查的確正試驗(yàn)，才能保證檢測結(jié)果的真實(shí)性和可信性。對(duì)于干化學(xué)測定法與顯微鏡鏡檢所表現(xiàn)出的矛盾加以綜合分析，檢驗(yàn)醫(yī)生須結(jié)合臨床合理解釋檢測結(jié)果，得出正確的檢驗(yàn)報(bào)告，避免漏診和誤診，向患者提供準(zhǔn)確的、有價(jià)值的診斷信息。

當(dāng)然，本文只是針對(duì)本實(shí)驗(yàn)室MT-N600型尿液分析儀所得到的結(jié)果。不同型號(hào)的儀器和試條可能得出的試驗(yàn)結(jié)果不盡相同，應(yīng)注意選擇各自的正常篩選標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，本文認(rèn)為在大批量的尿液檢測時(shí)，以尿液分析儀測得紅細(xì)胞弱陽性為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)；尿液分析儀測得白細(xì)胞陰性為正常篩選標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，其結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果的差異較小。

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收稿日期：(2014-12-25)

文章編號(hào)：1007-4287(2015)03-0482-03