異甘草酸鎂對APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷的保護作用

金娟 李祥楊 善峰

230011安徽合肥市安徽醫科大學附屬合肥醫院消化內科

異甘草酸鎂對APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷的保護作用

金娟 李祥楊 善峰

230011安徽合肥市安徽醫科大學附屬合肥醫院消化內科

目的：探討異甘草酸鎂對APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷的保護作用。方法：收集56只SD大鼠，隨機分成正常組、模型組、不同劑量異甘草酸鎂組（12.5 mg/kg，25 mg/kg，50 mg/kg）、NAC組（40 mg/kg）、CsA組（15 mg/kg），比較各組的效果。結果：異甘草酸鎂能明顯改善APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷的肝功能，各項生化指標均明顯改善。結論：異甘草酸鎂能夠明顯改善APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷，對治療APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷有較大的臨床意義。

異甘草酸鎂；APAP；誘導；大鼠

異甘草酸鎂是單一18-α異構體甘草酸，對肝損傷以及刀豆蛋白A誘導的藥物性肝損傷模型發揮顯著的保護效應[1]。但是，在對非甾體類抗炎藥（NSAID）對乙酰氨基酚（APAP）引起的藥物性肝損傷的治療效果尚未見報道。為探討異甘草酸鎂對APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷的保護作用，本文收集56只SD大鼠進行研究，現將研究結果報告如下。

資料與方法

實驗動物：SD大鼠56只，體重200～250 g，雌雄各半，購于南京醫科大學實驗動物中心。

藥品和試劑：APAP購自上海晶純試劑有限公司；谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）試劑盒為長春匯力技術有限公司產品；丙二醛（MDA），髓過氧化物酶（MPO），谷胱甘肽（GSH），谷胱甘肽二硫化物（GSSG），谷胱甘肽（GSSH）和超氧化物歧化酶（SOD），線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH），線粒體H+，K+-ATPase活力測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所；羅丹明123 N-乙酰半胱氨酸（NAC）購自Solarbio生物公司產品。環孢素A（CsA）瑞士諾華制藥公司產品。異甘草酸鎂注射液江蘇正大天晴藥業股份有限公司提供。

實驗方法：①模型建立：APAP 2 g/kg溶于200 μL生理鹽水中灌胃處理，正常對照組給予等劑量生理鹽水。②動物分組：56只SD大鼠隨機分成正常組、模型組、不同劑量異甘草酸鎂組（12.5 mg/kg，25 mg/kg，50 mg/kg）、NAC組（40 mg/kg）、CsA組（15 mg/kg），共7組。③給藥方式與時間：異甘草酸鎂各劑量組均在APAP灌胃前開始連續5 d；NAC及CsA組于APAP灌胃前1 h給予1次。均以腹腔注射給藥。④檢測方法：APAP灌胃24 h后，10％水合氯醛30 mg/kg腹腔內注射麻醉，正中切口進腹，暴露血管，于腹主動脈取血分離血清，并行肝臟灌流，取下肝臟組織。檢測ALT、AST。取肝臟組織，用冷生理鹽水制成肝勻漿，用考馬斯亮蘭法測定蛋白質含量，測定MDA、MPO含量和SOD活性。另取肝臟相同部位組織固定于10％福爾馬林中，行HE染色。

表1 異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠ALT、AST及TBil的影響（x±s）

表2 異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠肝臟病理積分的影響（x±s）

表3 異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠線粒體NADH、SDH和ATPase的影響（x±s）

結果

異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠ALT、AST及TBil的影響，見表1。

異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠肝臟病理的影響，見表2。

異甘草酸鎂對APAP誘導的藥物性肝損傷大鼠線粒體NADH、SDH和ATPase的影響，見表3。

討論

實驗結果表明，大鼠腹腔注射APAP后可導致嚴重肝損傷，甚至發生嚴重的出血和壞死。而對這些肝臟受損的大鼠使用異甘草酸鎂，能夠有效地防治由APAP引起的肝損傷，能夠明顯地改善肝功能，保護作用十分明顯。此外，NAC及CsA也能夠有效地降低血清轉氨酶及膽紅素水平，從而發揮保護肝臟的作用，減輕其病理損傷。

研究發現，APAP的肝毒性機理還與氧自由基的產生與膜脂質過氧化有關。結果表明APAP引起肝臟MDA及MPO水平明顯升高，降低SOD活性，而異甘草酸鎂可降低肝臟MDA及MPO水平，升高SOD。

本研究可見，APAP使大鼠線粒體中NADH、SDH及ATPase活性顯著降低，而異甘草酸鎂可明顯提高異常的NADH、SDH及ATPase活性，可見異甘草酸鎂在保護線粒體電子呼吸鏈，維持線粒體正常能量代謝中起到重要作用。

由此可見，異甘草酸鎂能夠明顯改善APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷，對治療對APAP誘導的大鼠藥物性肝損傷有較大的臨床意義。

[1]董麗萍，于鋒，柳鏡，等.異甘草酸鎂對D-氨基半乳糖急性肝損傷模型小鼠的保護作用研究[J].中國藥房，2006，17（2）：902-904.

Protective effect of magnesium oxalate on drug-induced liver injury induced by APAP in rats

Jin Juan，Li Xiangyang，Shan Feng
Department of Gastroenterology，Hefei Hospital Affiliated to Medical University of Anhui of Hefei City，Anhui 230011

Objective：To explore the protective effect of magnesium oxalate on drug-induced liver injury induced by APAP in rats.Methods：56 SD rats were selected，they were randomly divided into the normal group，the model group，the different doses of magnesium oxalate groups（12.5 mg/kg，25 mg/kg，50 mg/kg），the NAC group（40 mg/kg），the CsA group（15 mg/kg），we compared the effect of each group.Results：Magnesium oxalate can improve liver function of drug-induced liver injury induced by APAP in rats，and the biochemical parameters were obviously improved.Conclusion：Magnesium oxalate can improve drug-induced liver injury induced by APAP in rats obviously，it had great clinical significance to the treatment of drug-induced liver injury induced by APAP in rats.

Magnesium oxalate；APAP；Induce；Rats

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.33.2