豬O型口蹄疫疫苗免疫抗體消長動態研究

項朝榮，王儒磊，趙建東，衛陸梅，衛一新，惠永華

(1.濟源市動物疫病預防控制中心，河南濟源 459000；2.濟源市動物衛生監督所，河南濟源 459000)

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豬O型口蹄疫疫苗免疫抗體消長動態研究

項朝榮1，王儒磊2，趙建東1，衛陸梅1，衛一新1，惠永華2

(1.濟源市動物疫病預防控制中心，河南濟源 459000；2.濟源市動物衛生監督所，河南濟源 459000)

[目的] 掌握豬O型口蹄疫疫苗免疫后的抗體消長規律。[方法] 應用豬O型口蹄疫滅活疫苗1、滅活疫苗2和合成肽疫苗對198頭試驗豬進行至少2次免疫，定期采血后用液相阻斷ELISA檢測方法測定免疫前后抗體效價。[結果] 在首次免疫時，疫苗免疫效果受母源抗體的干擾較大；仔豬首免后抗體很難達到完全保護(大于6log2)水平，應適當縮短首免與二免的間隔時間，盡量減少免疫空白期；合成肽疫苗的首免效果較滅活疫苗好，首次免疫推薦使用合成肽疫苗；如果生豬飼養周期過長，免疫2次的生豬出欄時抗體不能達到完全保護水平；規模場試驗豬的母源抗體水平低于散養戶，隨著試驗豬日齡的增加和免疫的加強，規模場試驗豬的免疫抗體滴度逐漸高于散養戶。[結論] 該研究可為研究豬O型口蹄疫抗體變化和制定豬O型口蹄疫疫苗的免疫程序提供參考和借鑒。

豬O型口蹄疫；疫苗免疫；抗體檢測；抗體消長；分析

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引起偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，該病傳播速度快，感染率高，對社會及國際貿易危害嚴重，世界動物衛生組織(OIE)將其列為A類動物傳染病之首。我國是受口蹄疫危害的國家之一，也是世界上最大的豬肉生產國和消費國。豬口蹄疫防控是我國動物疫病防控的重中之重。為了制定科學免疫程序，有效防控該病，筆者對豬O型口蹄疫疫苗的免疫抗體消長動態進行了檢測。

1 材料與方法

1.1 試驗動物試驗豬為母豬免疫背景基本一致的仔豬198頭，選自河南省濟源市6個生豬規模場和9個散養戶。

1.2 試驗材料

1.2.1疫苗。疫苗購自河南省政府招標的3個疫苗廠家，疫苗批號分別為：2136002、2136012、2136034；H120742J、H120743J；20120501、20120611、20120705。所用疫苗均由濟源市畜牧局提供。

1.2.2檢測試劑。口蹄疫液相阻斷ELISA檢測試劑，批號為2012102901，購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所。

1.3 試驗場地動物免疫接種試驗在各養殖場內完成，血清學試驗在濟源市動物疫病預防控制中心實驗室完成。

1.4 試驗方法198頭試驗豬分為3大組、9小組，第1大組的72頭規模場試驗豬分別用豬O型口蹄疫滅活疫苗1、滅活疫苗2和合成肽疫苗進行2次免疫，第2大組的72頭規模場試驗豬分別用豬O型口蹄疫滅活疫苗1、滅活疫苗2和合成肽疫苗進行3次免疫，第3大組的54頭散養戶試驗豬分別用豬O型口蹄疫滅活疫苗1、滅活疫苗2和合成肽疫苗進行3次免疫，免疫方法與免疫劑量按照疫苗說明書進行。試驗豬從10日齡開始每月開展1次抗體檢測，跟蹤抗體的消長規律。

1.5 數據處理及結果判定FMD抗體效價與保護性關系通常以3個區帶來表述[1]，小于3log2時為敏感帶(易受感染)，3log2～6log2時為灰色帶(不完全保護或部分保護)，大于6log2時為保護帶(完全保護)。

2 結果與分析

2.1 試驗豬疫苗免疫前后抗體消長變化從表1可以看出，10日齡9個試驗組的平均抗體滴度全部處于保護帶；37日齡(首免)，8個試驗組的平均抗體滴度仍處于保護帶；68日齡(首免后31 d，二免)，只有1個試驗組的平均抗體滴度處于保護帶，甚至有1個試驗組的平均抗體滴度處于敏感帶；99日齡(二免后31 d)時，7個試驗組的平均抗體滴度處于保護帶，2個試驗組的平均抗體滴度處于灰色帶；125日齡(二免后57 d，部分組三免)時，9個試驗組的平均抗體滴度全部處于保護帶；150日齡(部分組二免后82 d，部分組三免后25 d)時，9個試驗組的平均抗體滴度全部處于保護帶。

表1 不同日齡試驗豬抗體的平均滴度變化

2.2 不同疫苗廠家抗體消長的比較從圖1可以看出，10日齡和37日齡未免疫疫苗時，3組試驗豬平均抗體滴度基本一致；首免后31 d，3組試驗豬平均抗體滴度均有所下降，但下降幅度差異較大，其中合成肽疫苗免疫豬抗體滴度下降幅度最小，不到1個滴度，滅活疫苗1免疫豬抗體滴度下降幅度最大，約4個滴度；此后幾次檢測，合成肽疫苗免疫豬抗體滴度一直高于滅活疫苗免疫豬。

圖1 不同廠家疫苗免疫試驗豬的抗體滴度變化

2.3 不同免疫次數的抗體消長比較從圖2可以看出，10日齡、37日齡、68日齡、99日齡和125日齡，2組試驗豬平均抗體滴度基本一致；150日齡，免疫3次試驗豬抗體滴度較25 d前略有上升，免疫2次試驗豬抗體滴度較25 d前明顯下降。

圖2 不同免疫次數試驗豬的抗體滴度變化

2.4 不同養殖類型抗體消長的比較從圖3可以看出，10日齡、37日齡未免疫疫苗和68日齡首免后31 d，散養戶平均抗體滴度略高于規模場；99日齡、125日齡和150日齡，隨著試驗豬的生長和免疫次數增多，規模場平均抗體滴度略高于散養戶。

圖3 不同養殖類型試驗豬的抗體滴度變化

3 討論

(1)該試驗結果表明，仔豬首免后抗體下降明顯，說明在首次免疫時疫苗免疫效果受母源抗體干擾較大。據報道，母源抗體可從細胞免疫和體液免疫2個方面對疫苗免疫產生干擾[1]，其作用機理主要是加速抗原物質的清除、對弱毒疫苗起中和作用、母源抗體對特異性抗原位點的“封閉”而阻止抗原位點與機體免疫相關細胞上的抗原受體結合等，從而導致免疫系統不能對抗原物質產生反應。因此，在豬O型口蹄疫免疫中應重視母源抗體對疫苗的干擾作用，選擇合適的時機進行疫苗免疫。在實際生產中，當母源抗體降至不完全保護水平時，對疫苗免疫效果的干擾較小，此時是接種疫苗的最佳時機。該試驗結果表明，仔豬經過1次免疫抗體很難達到完全保護水平，二免后抗體能達到完全保護水平且有效抗體持續時間長。魏孔福等[2]2007年報道的O型口蹄疫疫苗免疫牛抗體消長動態的LPB-ELISA檢測結果也表明，畜群經過1次免疫不能獲得良好的保護率，只有在一免后進行加強免疫，才能達到預期目的。首免后至二免有效抗體產生以前仔豬處于免疫空白期，因此在生產中要適當縮短首免與二免間隔時間，盡量減少免疫空白期。

(2)該試驗結果表明合成肽疫苗免疫效果受母源抗體的干擾較滅活疫苗小，這與王文娟等[3]報道的豬O型口蹄疫滅活疫苗與合成肽疫苗免疫抗體水平的比較結果一致。豬O型口蹄疫合成肽疫苗是僅含免疫決定簇組分的小肽，由于不是全病毒，母源抗體對其干擾作用相對較小，首免后抗體滴度明顯高于滅活疫苗。由于首免基礎好，加強免疫后抗體滴度仍高于滅活疫苗。因此，仔豬首免使用合成肽疫苗可以達到較好的免疫效果，首次免疫推薦使用合成肽疫苗。

(3)該試驗結果表明，試驗豬二免后82 d抗體仍處于保護帶，但滅活疫苗組的抗體已接近保護帶與灰色帶的臨界線，與及時進行三免的試驗豬相比，平均抗體低將近2個滴度。在實際生產中，如果生豬飼養周期過長，免疫2次的生豬出欄時抗體不能達到完全保護水平。因此，飼養周期超過180 d的生豬，應在二免后60 d再免疫1次豬O型口蹄疫疫苗。

(4)不同養殖類型的比較結果表明，規模場試驗豬母源抗體水平低于散養戶，仔豬母源抗體水平與母體特異抗體水平呈正相關[1]，此次選取的試驗豬母豬免疫背景基本一致，規模場可能因為母豬批量免疫，免疫效果不如散養戶。在試驗過程中規模場和散養戶試驗豬的疫苗免疫全部由試驗人員親自完成，免疫日齡和免疫劑量一致，隨著試驗豬日齡的增加和免疫的加強，規模場試驗豬免疫抗體滴度逐漸高于散養戶，這可能與規模場的飼養管理水平較高有關，有待進一步研究。

(5)由于受條件限制，此次試驗采樣檢測間隔時間較長，只能粗略掌握試驗豬疫苗免疫前后抗體消長規律，下一步將不斷完善研究數據，探索更詳細的抗體變化規律，更好為養殖場戶的豬O型口蹄疫免疫提供參考和指導。

[1] 高世杰，竇永喜，程愛華，等.母源抗體對豬口蹄疫疫苗免疫應答的影響[J].中國獸醫學報，2011，31(1)：45-48.

[2] 魏孔福，祁淑蕓，林密，等.O型口蹄疫疫苗免疫牛抗體消長動態的LPB-ELISA檢測[J].中國獸醫科學，2007，37(9)：787-790.

[3] 王文娟，鄧紅江，王群英，等.豬O型口蹄疫滅活疫苗與合成肽疫苗免疫抗體水平檢測[J].中國獸醫雜志，2013，49(11)：41-42.

Dynamic Analysis of Immune Antibodies of Type O of Porcine Foot-and-mouth Disease Vaccine

XIANG Chao-rong1，WANG Ru-lei2，ZHAO Jian-dong1et al

(1.Jiyuan Animal Disease Control and Prevention Center, Jiyuan, Henan 459000；2.Jiyuan Animal Health Supervision Institute, Jiyuan, Henan 459000)

[Objective] The research aimed to grasp the dynamic change laws of antibody after the vaccine immunization of porcine type O foot-and-mouth disease.[Method] 198 test pigs were immunized for at least twice with inactivated vaccine, inactivated vaccine 2 and synthetic peptide vaccine of porcine type O FMD vaccine.After routine sampling, the immune antibody titer was determined by using liquid-phase blocking ELISA.[Result] In the first immunization, the interference of maternal antibody on the immune effect of the vaccine was larger.The antibody of piglets after the first immunization was difficult to achieve complete protection (more than 6log2).So the interval time between the first immunization and the second immunization should be reduced and the immune blank period should be reduced as possible.The first immunization effect of the synthetic peptide vaccine was better than that of inactivated vaccines.So the synthetic peptide vaccine was recommended to be used in the first immunization.If the breeding period of pigs was too long, the antibody level of marketing pigs immunized for twice couldn’t reach the complete protection level.The maternal antibody level of test pigs in large-scale pig farm was lower than that in scatter-raised farm.With the increasing age and immunization procedure of pigs, the immune antibody titer of test pigs in large-scale pig farm was gradually higher than that in scatter-raised farm.[Conclusion] The research could provide references for studying the antibody changes of porcine type O FMD and establishing the vaccine immunization program of porcine type O FMD.

Porcine type O foot-and-mouth disease; Vaccine immunization; Detection of antibody; Dynamic changes of antibody

項朝榮(1982-)，女，河南南陽人，獸醫師，碩士，從事動物疫病防治。

2015-01-31

S 855

A

0517-6611(2015)08-109-03