枸櫞酸鉀緩釋片的制備及其釋放度的方法研究

鄭 娣，劉宇婧，張自強，錢偉剛，王 柏*中國藥科大學藥學院，南京 98；南京澤恒醫藥技術開發有限公司，南京 0046；上海朝暉藥業有限公司，上海 0908

枸櫞酸鉀緩釋片的制備及其釋放度的方法研究

鄭 娣1，劉宇婧2，張自強2，錢偉剛3，王 柏1*
1中國藥科大學藥學院，南京 211198；2南京澤恒醫藥技術開發有限公司，南京 210046；3上海朝暉藥業有限公司，上海 201908

目的：制備枸櫞酸鉀緩釋片并對其體外釋放度進行研究。方法：采用正交設計法對枸櫞酸鉀緩釋片處方進行優化，并采用相似因子對其體外釋放行為進行評價；以高效液相色譜法檢測枸櫞酸鉀緩釋片的釋放度。結果：正交設計結果表明，硬脂酸對枸櫞酸鉀的釋放影響較為明顯，通過Higuchi方程及Peppas方程擬合，確定枸櫞酸鉀緩釋片的釋藥機制為擴散與溶蝕雙重作用。結論：應用硬脂酸為骨架材料即可制備具有理想釋藥行為的枸櫞酸鉀緩釋片，其釋放度符合《中華人民共和國藥典》2010年版標準且與參比緩釋片（UROCIT-K）相似。

枸櫞酸鉀；緩釋片；HPLC法；累積釋放度

枸櫞酸鉀（potassium citrate）具有補充鉀離子和堿化尿液的作用，臨床用于防治各種原因引起的低血鉀癥及防治尿結石復發。常規的枸櫞酸鉀制劑難以確保尿液在一天持續堿化，故將其制成緩釋制劑，達到全天抑制尿液中草酸鈣結晶形成的良好療效[1]。

美國枸櫞酸鉀蠟質緩釋片（UROCIT-K）在歐美及港臺地區都有銷售，療效顯著，能有效地提高低枸櫞酸尿癥患者的尿中枸櫞酸鹽和尿鉀水平，降低尿鈣水平，提高尿液pH值。但目前枸櫞酸鉀劑量大，其緩釋片可重達2 g，不利于服用。

本文通過制備枸櫞酸鉀緩釋片以求達到持續釋藥，減少服藥量，提高患者順應性目的。通過3因素3水平的正交設計法對枸櫞酸鉀緩釋片的處方進行優化，同時建立了HPLC法對其釋放度進行分析；根據Higuchi方程及Peppas方程擬合，研制的枸櫞酸鉀緩釋片的釋放可能為擴散與溶蝕雙重作用。

1 儀器與試藥

Agilent 1100系列高效液相色譜儀 （美國Agi-lent公司）；DP-30A單沖式壓片機 （北京國藥龍立科技有限公司）；RC-806智能溶出儀 （天津市天大天發科技有限公司）；pH計（Sartorius PB-10）。

枸櫞酸鉀緩釋片（由制劑室制備，批號：20140901）；枸櫞酸鉀（湖南華日制藥有限公司）；枸櫞酸鉀緩釋片（規格1080 mg，商品名UROCIT-K誖，美國Mission Pharmacal，批號：XP01111）；硬脂酸（湖州展望藥業有限公司）；聚乙二醇4000（廣東汕頭市西隴化工廠）；乳糖（德國美劑樂公司）；硬脂酸鎂（湖州展望藥業有限公司）；所用試劑為分析純；水為純化水。

2 方法與結果

2.1 枸櫞酸鉀緩釋片的制備

將枸櫞酸鉀、硬脂酸、聚乙二醇、乳糖分別粉碎，過80目篩，按處方量混勻，以5%聚維酮K30水溶液為粘合劑，濕法制粒，過16目篩，制粒，50℃烘燥2 h，過16目篩，整粒，加入處方量硬脂酸鎂，混合，壓片，片重約為1290 mg。壓力控制在8～10 kg。

2.2 正交設計

通過預實驗，初步確定以硬脂酸為枸櫞酸鉀緩釋片的緩釋材料[1]，聚乙二醇和乳糖為致孔劑。分別以硬脂酸（A）、聚乙二醇（B）和乳糖（C）為3因素，考察各自用量對枸櫞酸鉀的釋放度的影響。

采用綜合評分法[2]，即測定緩釋片在0．5、1、3 h的累積釋放量（Q），分別以35%～55%、50%～70%、80%為標準進行評分，以Q0．5h和Q1h越接近中間值越佳，公式：[（Q0．5h-45%）2+（Q1h-60%）2]1/2此反映了0．5 h、1 h時釋放度的偏差，此偏差值越小越佳；3 h時應釋放80%以上，Q3h值越大越佳。故以Q為基礎，設計綜合評分Y，公式：[Y=Q3h-[（Q0．5h-45%）2+（Q1h-60%）2]1/2]，對以上3個因素進行考察，每因素分設3水平，以正交表L9（34）安排試驗，以體外釋放度為指標，分別對結果進行分析，試驗因素水平及結果見表1。從初試結果看，因素A的極差最大，表明枸櫞酸鉀緩釋片的釋放受硬脂酸用量影響較大，而受致孔劑聚乙二醇（B）和乳糖用量（C）的影響較小。根據以上結果確定A2B1C2為最優處方。

表1 正交試驗設計及結果

2.3 高效液相色譜分析方法

2.3.1 色譜條件 采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱：Sepax-HP C18（4．6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0．5%NH4H2PO4水溶液（用磷酸調節pH至2．5）95∶5；流速：1．0 mL·min-1；檢測波長：210 nm；柱溫：25℃；進樣量：20 μL。

2.3.2 專屬性考察 取空白溶劑、枸櫞酸鉀緩釋片空白輔料、對照品溶液及緩釋片溶液，分別按上述方法制備成相應的供試品溶液，依“2．3．1”色譜條件檢測，結果表明，空白溶劑和空白輔料對枸櫞酸鉀的檢測無干擾，本方法的專屬性良好。見圖1。

圖1 HPLC色譜圖

2.3.3 線性關系考察 取枸櫞酸鉀對照品適量，精密稱定，用水溶解并稀釋制成每毫升中約含0．21、0．42、0．64、0．85、1．06、1．27 mg系列濃度的溶液。精密量取上述溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明，枸櫞酸鉀濃度在0．21～1．27 mg· mL-1范圍內與吸收度呈良好線性關系，其回歸方程為A=801．4555c+1．9867，r2=0．9998（n=6）。

2.3.4 重復性試驗 取本品，按照含量測定分析方法配制6份供試品溶液，分別進樣測定含量，進行重復性試驗。試驗結果：均值為100．6%；RSD為0．65%，小于2．0%。表明該方法的重復性較好。

2.3.5 加樣回收率試驗 按處方比例制備空白輔料混合物，分別加入標示量80%、100%、120%的枸櫞酸鉀，混合均勻，按照含量測定方法配制供試品溶液，精密量取20 μL進樣，記錄圖譜，按照外標法計算得枸櫞酸鉀回收率為100．2%，RSD=0．74%（n=9）。

2.4 釋放度的研究

按《中國藥典》2010年版二部附錄XC第二法，取6片枸櫞酸鉀緩釋片，以蒸餾水900 mL為溶出介質，溫度為37℃±0．5℃，轉速50 r·min-1，在0．5、1、3 h時分別取溶液2 mL，濾過，并及時補液2 mL。精密量取續濾液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算每片在各個時間點的累積釋放量[3]。

2.4.1 釋放介質對枸櫞酸鉀釋放的影響 取枸櫞酸鉀緩釋片（批號：20140901）6片，照《中國藥典》2010年版二部附錄X C第二法，分別以水、0．1 mol· L-1鹽酸，pH 4．5、pH 6．8的磷酸緩沖液為釋放介質，溶出體積為900 mL，轉速為50 r·min-1，依法操作，分別于0．5、1、3 h取樣，濾過，取續濾液作為供試品溶液；另取對照品適量，精密稱定，以水溶解并定量稀釋制成每毫升中約含枸櫞酸鉀1 mg的溶液，作為對照品溶液。依“2．3．1”色譜條件檢測，并計算各個時間點的累積釋放量，繪制釋放曲線，見圖2A。

由結果看出，以水和pH 6．8磷酸緩沖液為溶出介質時，枸櫞酸鉀的釋放曲線無明顯差異，0．5 h釋放達到40%。pH 4．5磷酸緩沖液和0．1 mol·L-1鹽酸為溶出介質時，釋放較緩慢，3 h釋放未達到85%。同時參考USP的溶出條件，確定以水為溶出介質。

2.4.2 轉速對枸櫞酸鉀釋放的影響 照《中國藥典》2010年版二部附錄X C第二法，以水為釋放介質，溶出體積為900 mL，溫度37℃±5℃，分別考察轉速為50、75、100 r·min-1時枸櫞酸鉀的釋放情況，見圖2B。

圖2 溶出介質（A）和轉速（B）對釋放度的影響

由結果看出，轉速為50 r·min-1時，滿足枸櫞酸鉀對釋放度的限度要求，確定轉速為50 r·min-1。

2.5 f2因子的評價

取市售UROCIT-K和自制枸櫞酸鉀緩釋片（批號20140901），照《中國藥典》2010年版二部附錄X C第二法，以900 mL水為溶出介質，溫度37℃±0．5℃，轉速50 r·min-1，依法操作，分別于0．5、1、3 h取樣，濾過，精密量取續濾液20 μL進樣，計算每片在各個時間點的累積釋放量，并用相似因子法對溶出試驗數據進行統計分析，釋放曲線見圖3。

圖3 自制與進口緩釋片釋放度比較

相似因子法計算的基本假設是試驗制劑與對照制劑的累積溶出度的差的平方和Q最小。相似因子f2=50×log[（1+Q/n）-0．5×100]，如果50≤f2≤100，則表示兩制劑的溶出度相似。

本試驗中f2=76，可以判斷，自制枸櫞酸緩釋片與國外市售片UROCIT-K釋放行為完全相似。

2.6 釋藥機制

枸櫞酸鉀在片劑中的釋藥機制可能存在藥物的擴散和骨架溶蝕的共同作用。

取按處方A2B1C2制備的枸櫞酸鉀緩釋片，照釋放度方法測定，分別于0．25、0．5、1、1．5、2、2．5、3 h時取樣，應用零級、一級、Higuchi方程及Peppas方程分別對Q和時間（t）進行擬合[9]，得到線性方程分別為：

Peppas方程中的n是表示釋放機制的特征參數，參數與制劑骨架的形狀有關，對于圓柱形制劑，當n＜0．45時，藥物的釋放機制為Fick擴散：當n＞0．89時，為骨架溶蝕機制；當0．45＜n＜0．89時，為非Fick擴散（即藥物擴散和骨架溶蝕協同作用）。從釋放擬合結果看，本品n=0．5182，枸櫞酸鉀的釋放可能為擴散與溶蝕的共同作用[5]。

3 討 論

對枸櫞酸鉀緩釋片的釋放介質以及轉速進行研究，最終以水為釋放介質，轉速為50 r·min-1。

枸櫞酸鉀為小分子水溶性藥物，其制成緩釋制劑要比脂溶性藥物更困難。枸櫞酸鉀緩釋片中藥物釋放機制可能由藥物擴散和骨架溶蝕兩種途徑進行。硬脂酸為水不溶性骨架，藥物釋放是通過骨架中許多彎彎曲曲的孔道擴散進行的，同時骨架本身也可能慢慢溶蝕，從而釋放藥物，達到緩釋作用。

[1]閆 明，鄒梅娟，齊 翔，等．極易溶藥物枸櫞酸鉀緩釋片的研制[J]．中國醫藥導報，2011，8（1）：66-8．

[2]向軍濤，蔣琳蘭．硝苯地平緩釋片的制備及其體外釋放度考察[J]．中國藥房，2007，18（7）：526-7．

[3] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典 [S]．二部．北京：化學工業出版社，2010：1014．

[4]陳龍浩，鄒江冰，孟 靜，等．枸櫞酸鉀緩釋片的制備[J]．廣東藥學院學報，2010，26（5）：449-51

[5]Veiga F,Salsa T,Pina ME．Oral controlled release dosage forms．II．Glassy polymers in hydrophilic matri-ces[J]．Drug Dev Ind Pharm,1998,24(1):1-9．

Preparation and Release of Potassium Citrate Sustained-Release Tablets

ZHENG Di1,LIU Yu-jing2,ZHANG Zi-qiang2,QIAN Wei-gang3,WANG Bo1
1School of Pharmacy,China Pharmaceutical University,Nanjing 211198;2Nanjing Zeheng Pharmaceutical Technology Co.,Ltd.,Nanjing 210046;3Shanghai Zhaohui Pharmaceutical Co.,Ltd.,Shanghai 201908

Objective:To prepare the potassium citrate sustained-release tablets and to investigate the release profile in vitro of the sustained-release tablets．Methods:HPLC was used as the analytical method,an orthogonal design method was used to optimize the formulation and a similarity factor method was used to evaluate the in vitro release behavior．Results:Stearic acid affected the release more obviously．Determined by Higuchi equation and Peppas equation fitting,the release of potassium citrate sustained-release tablets included dual mechanisms of diffusion and erosion．Conclusion:Applying stearic acid as the backbone,potassium citrate extended release tablets have the desired release behavior,in line with the release standard of"Chinese Pharmacopoeia"2010 version,and is similar to the reference sustained-release tablets(UROCIT-K)．

Potassium Citrate;Sustained-release tablet;HPLC;Release profile

R943

A

1673-7806（2015）03-256-03

鄭娣，女，碩士 E-mail:zhengdi_cpu@163.com

*通訊作者王柏，男，碩士生導師，副教授 E-mail:bwangcpu@hotmail.com

2015-03-12

2015-05-08