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ASO測定陽性在診斷溶血性鏈球菌感染中的臨床意義
馬春利
(陜西省寶雞市人民醫院 兒科, 陜西 寶雞, 721000)
關鍵詞:溶血性鏈球菌感染; 抗鏈球菌溶血素O; 抗DNA酶B
兒童感染A族鏈球菌(GAS)后,可引起上呼吸道感染、猩紅熱、風濕熱、皮膚感染、腎小球腎炎和風濕性心臟病等。GAS感染后可產生多種外毒素和侵襲性酶,嚴重者可導致中毒性休克綜合征(TSS),后者病死率高達20%~30%[1], 嚴重危及患兒健康和生命安全。A族溶血性鏈球菌感染后,在細胞外產生抗鏈球菌溶血素O(ASO)和抗DNA酶B抗體[2]。測定血清中相應的ASO等抗體滴度,能為臨床明確診斷GAS感染提供依據。
1資料與方法
收集本院2013年5月—2014年12月明確診斷為鏈球菌感染的137例患兒的臨床資料,依據各類型疾病相關診斷標準對患兒進行分組。其中急性風濕熱組29例:男17例,女12例,年齡1~14歲,平均(6.53±2.18)歲;急性咽炎、扁桃體炎組36例:男19例,女17例,年齡2~12歲,平均(7.13±2.05)歲;急性腎小球腎炎組35例:男18例,女17例,年齡3~14歲,平均(7.29±2.24)歲;風濕性心臟病組37例(活動期20例,非活動期17例):男18例,女19例,年齡2~13歲,平均(6.41±2.56)歲。各組患者性別、年齡等資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。
① 咽拭子培養:用棉簽取患兒咽喉部分泌物送檢; ② ASO測定:抽取外周靜脈血3 mL, 經高速離心后取血清待檢。采用免疫散射比濁法測定ASO滴度,正常值<223 U/mL[3]。本研究選用BNⅡ特種蛋白分析儀(西門子公司),嚴格按標準規程進行操作; ③ 抗DNA 酶B 檢測:采用微量中和法,滅活血清后3倍稀釋,加入DNA 酶B 抗原溫育15 min,然后加甲基綠-DNA 底物,置入溫箱24 h后,根據底物顏色消退程度確定抗DNA 酶B 抗體的滴度。采用美國心臟病學會推薦的標準[4],間隔2 次測定有2個滴度的抗體升高即可診斷陽性。抗DNA 酶B 檢測陽性值為7~18 歲≥240 U/mL, 2~6歲≥60 U/mL。本研究試劑由廣東省心血管病研究所風濕熱鏈球菌實驗室提供;④炎癥指標:抽取外周靜脈血檢測血常規、CRP及紅細胞沉降率(ESR)。
2結果
咽拭子培養陽性率、ASO陽性率、抗DNA酶B陽性率及聯合檢測陽性率呈依次增高趨勢,各種檢測方法結果陽性率比較均有顯著差異(P<0.05), 且檢測方法不同,對相關溶血性鏈球菌感染疾病的檢測陽性率不同,見表1。

表1 咽拭子培養、ASO與抗DNA酶B檢測陽性率觀察[n(%)]
在GAS 感染后,ASO抗體反應高峰時間、抗體滴度持續時間分別為(4.28±1.05)d和(52.38±4.08)d,均明顯低于抗DNA酶B檢測的(5.47±1.36)d和(163.06±15.16)d,差異有統計學意義(P<0.05)。
137例鏈球菌感染患兒炎癥指標檢測中, C反應蛋白(CRP)為(34.16±6.45) g/L, 血沉(ESR)(18.06±4.87) mm/h, 白細胞計數(WBC)為(10.76±2.34)×109/L, 中性粒細胞計數為(6.29±2.63)×109/L。
3討論
GAS感染率高,全球每年約有6 億人口發生鏈球菌感染性咽喉炎,皮膚感染例數高達1億[5]。鏈球菌感染后通過變態反應可引起風濕熱和腎小球腎炎, GAS感染后可產生多種外毒素和侵襲性酶,部分患兒感染侵襲性GAS, 可因TSS發生死亡[6]。因此應早期檢測、明確診斷GAS 感染,及時進行病因治療,以改善患兒預后。
抗鏈球菌溶血素O(ASO)測定是目前檢測GAS 感染的常用血清學檢測方法。β溶血性鏈球菌分為20個組,其中鏈球菌A、C、G族均可引起ASO升高[7]; ASO測定陽性率受干擾的因素較多,急慢性肝炎、高脂血癥、腎病綜合征時可出現非特異性ASO 增高;當血清標本發生溶血、或保存不當被細菌污染后, ASO滴度也可發生改變[8]。目前ASO測定采用微量特定蛋白免疫散射比濁法,靈敏度相對較低,可導致部分患者漏檢[9]。本組數據中,ASO陽性率為40.15%, 其中急性風濕熱組、急性咽炎、扁桃體炎組、急性腎小球腎炎組、風濕性心臟病活動期組和非活動期組檢測陽性率分別為55.17%、22.22%、60.00%、45.00%、5.88%, 數據說明ASO測定陽性率在診斷溶血性鏈球菌感染中的有較高的臨床意義。
微量中和法檢測GAS抗DNA酶B抗體是近年來開始的一種新方法,對測定鏈球菌感染具有較高的特異性和敏感性[10]。GAS細胞外產物脫氧核糖核酸B具有較強的抗原性,當機體感染GAS后,抗DNA酶B升高,且抗DNA酶B不受肝功能、血脂水平及血清標本污染等因素的影響,具有良好的穩定性,檢測陽性率較高[11]。本研究中抗DNA 酶B陽性率為59.12%,其中急性風濕熱組、急性咽炎、扁桃體炎組、急性腎小球腎炎組、風濕性心臟病活動期組和非活動期組檢測陽性率分別為68.97%、33.33%、82.86%、85.00%、17.65%。
ASO和抗DNA酶B有不同的抗體動力學,因此各檢測方法中抗鏈球菌抗體中滴度高峰及維持陽性時間不一[12]。GAS感染2周后開始出現ASO, 3~5周達高峰,抗體高滴度持續時間約2個月。抗DNA酶B抗體反應高峰出現時間遲,抗體滴度持續時間長,二者之間可作為梯度檢測,取到聯合互補作用。本研究結果還顯示,聯合檢測陽性率72.26%, 其中各組檢測陽性率分別為89.66%、52.78%、94.29%、90.00%、17.65%。由此表明ASO聯合抗DNA酶B檢測能顯著提高GAS感染檢測陽性率。
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收稿日期:2015-01-20
中圖分類號:R 556
文獻標志碼:A
文章編號:1672-2353(2015)17-188-02
DOI:10.7619/jcmp.201517071