乳寧口服液治療乳腺增生大鼠的藥效學研究

王林麗，楊巧虹，李卓恒，盧來春，呂金勝

（1.中國人民解放軍第三軍醫大學大坪醫院藥學部，重慶 400042； 2.重慶醫療器械質量檢驗中心，重慶 401147）

乳寧口服液治療乳腺增生大鼠的藥效學研究

王林麗1，楊巧虹2，李卓恒1，盧來春1，呂金勝1

（1.中國人民解放軍第三軍醫大學大坪醫院藥學部，重慶 400042； 2.重慶醫療器械質量檢驗中心，重慶 401147）

目的 研究乳寧口服液對大鼠乳腺增生的治療作用。方法 建立乳腺增生大鼠模型，灌胃給藥乳寧口服液，觀察低、中、高劑量[0.5，2.5，5.0 mL/(kg·d)]組大鼠的行為學改變、乳房情況，以及血液中激素水平的變化。結果 低、中、高劑量乳寧口服液均能顯著改善乳腺增生大鼠模型行為學異常、乳房情況，以及血液中雌二醇（E2)、孕酮（P)、催乳素（PRL)水平（P＜0.01），且呈一定的量效關系。結論 乳寧口服液對乳腺增生有一定治療作用。

乳寧口服液；乳腺增生；大鼠模型；性激素

乳寧口服液為治療乳腺增生癥的醫院復方制劑，主要由香附、川芎、夏枯草、王不留行、麥芽、白芍、當歸、丹參 、延胡索、橘核、柴胡、瓜蔞、甘草等藥材組方[1]。本研究中考察了乳寧口服液對乳腺增生模型大鼠的治療作用，旨在為臨床用藥提供進一步的藥理學試驗依據。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動物

DU650型紫外分光光度計。乳寧口服液(第三軍醫大學大坪醫院自制，批號為101206)。SD大鼠，體重（200±20）g，由第三軍醫大學大坪醫院實驗動物中心提供；動物受試環境為第三軍醫大學大坪醫院實驗動物中心，實驗設施使用合格證號為 SYXK-(軍)2010-032，動物質量合格證號為SCXK-(軍)2010-008；飼料、飲水和墊料均符合實驗動物質量控制標準。

1.2 方法

乳腺增生大鼠模型的建立[2-4]：取健康雌性未孕SD大鼠，后腿肌肉交替注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg/kg，每日1次，連續25 d后改用黃體酮4 mg/kg肌肉注射，每日1次，連續5 d，建立乳腺增生病模型，造模期間每天觀察各組大鼠乳頭變化情況。造模第30天肉眼觀察可見模型組大鼠乳頭較空白組大鼠明顯增大，同時隨機處死模型組大鼠10只，取第2對乳頭制作病理切片。結果高倍鏡下可見腺泡和導管上皮明顯增生，乳腺腺泡直徑增大，乳腺腺泡數量增加，乳腺小葉平均直徑增大，乳腺小葉數增加，證明造模成功。于造模第21天開始給予相應藥物。

分組與給藥：取造模成功雌性大鼠60只，隨機分為5組，每組12只，即乳寧口服液高、中、低劑量組（R1，R2，R3組），給藥劑量分別為0.5，2.5，5.0 mL/（kg·d），相當于臨床日用量的1，5，10倍；三苯氧胺陽性對照組（S組），給藥劑量為2.5 mL/(kg·d)；模型對照組（M組）。另取健康雌性未孕大鼠12只，作為空白對照組（K組）。各給藥組采取等容不等濃度法灌胃給藥，M組和K組給予等量生理鹽水，每日給藥1次，連續給藥30 d后處死動物。

取材處理[5-7]：造模結束后，大鼠禁食24 h，稱重、脫毛，用游標卡尺測量大鼠左側腋窩下第2對乳頭的直徑，隨后摘取眼球并取血5～6 mL，放置15 min后，用低溫離心機離心15 min，分離出血清，置冰箱內保存，用放射免疫法測定生殖激素3項。再用脫頸椎法處死所有大鼠，用打孔器取下左側第二對完整乳房，直徑約8 mm，測量乳頭的直徑、高度。

2 結果

2.1 對大鼠行為學的影響

K組大鼠皮毛光澤，形態活潑，反應敏捷，食量、糞便均正常，體重增長正常，無死亡。M組大鼠豎毛，皮毛欠光澤，精神不振或煩躁不安、易激惹，反應遲鈍，食量減少或亢進，糞便時稀軟，身體嚴重消瘦或體重增長迅速，進食、排便、活動減少或增加，死亡2只。乳寧口服液給藥組（R1，R2，R3組）及陽性對照組（S組）大鼠皮毛尚可，大鼠體形均接近K組，飲食較正常，糞便正常，無動物死亡。

2.2 對大鼠乳房情況的影響

結果見表1。造模后，M組大鼠的乳頭高度及直徑明顯增大，各用藥組大鼠的乳頭高度同M組相比有不同程度的變化，乳寧口服液給藥組（R1，R2，R3組）乳頭高度明顯降低(P＜0.01)，乳頭直徑均縮小(P＜0.01)，3個劑量組呈一定的量效關系。

表1 乳寧口服液對乳腺增生大鼠乳頭高度及直徑的影響（±s，mm，n=12）

表1 乳寧口服液對乳腺增生大鼠乳頭高度及直徑的影響（±s，mm，n=12）

注:與M組比較， P＜0.01。下表同。

組別K組M組R1組R2組R3組S組劑量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5乳頭高度0.79±0.03 1.24±0.02 0.86±0.03 0.99±0.05 1.12±0.04 0.95±0.03乳頭直徑1.17±0.05 1.91±0.08 1.45±0.04 1.52±0.09 1.59±0.05 1.50±0.03

2.3 對大鼠血清性激素水平的影響

結果見表2。造模后大鼠血清雌二醇（E2）、催乳素（PRL）含量顯著高于K組，孕酮（P）則顯著低于K組，高、中、低劑量乳寧口服液均能顯著降低大鼠的E2及PRL水平，升高孕激素水平(P＜0.01)，并呈一定的量效關系。

表2 乳寧口服液對大鼠血清性激素水平的影響±s，n=12）

表2 乳寧口服液對大鼠血清性激素水平的影響±s，n=12）

組別K組M組R1組R2組R3組S組劑量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5 E2（pg/mL）67.80±2.55 106.01±2.90 78.34±2.13 88.68±1.99 96.07±1.16 77.01±1.72 P（ng/mL）38.32±1.07 26.06±0.85 35.75±1.14 31.06±0.77 29.22±1.17 34.35±1.41 PRL（ng/mL）12.59±0.96 21.26±0.86 14.75±0.84 17.66±0.69 19.40±0.59 15.55±0.73

3 討論

乳腺增生癥是女性常見的乳房疾病，2%～4%的患者可發生囊性增生而引起癌變[7-8]，臨床多用雄性激素或雌激素拮抗劑治療，療效雖好，但不良反應較大。對于乳腺增生癥，中醫藥以疏肝解郁、活血通絡、補腎壯陽、消炎散結為治療原則[9]。

乳寧口服液處方為醫院臨床長期使用的治療乳腺增生的中醫驗方。本研究中通過建立乳腺增生大鼠模型，觀察乳寧口服液對模型大鼠的行為學狀況、乳房情況（包括乳頭的高度和直徑），以及血清E2，P，PRL水平的影響。研究結果顯示，低、中、高劑量乳寧口服液均能顯著改善模型大鼠的行為學異常、乳房情況以及血清E2，P，PRL水平的異常。這表明了乳寧口服液對乳腺增生模型大鼠具有顯著的治療作用，而是否還能改善其他乳腺增生相關指標的異常，有待進一步研究。

[1]陳彥清，康啟仁，崔金楠，等.乳寧口服液的制備及質量控制[J].中華醫藥薈萃雜志，2003，2(4)：30-31.

[2]陳 奇.中藥藥理研究方法學[M].北京：人民衛生出版社，1993：541-649.

[3]黃月玲，文端成，韋永芳，等.大鼠乳腺增生模型的建立[J].廣東醫學，2002，22(4)：362-363.

[4]陳志春，段曉波，胡芝華.大鼠乳腺增生實驗方法及藥物作用觀察[J].中國藥理學通報，1991，7(2)：156.

[5]朱萱萱，張忠華，邱召娟.桂枝茯苓膠囊治療乳腺增生大鼠的實驗研究[J].現代中西醫結合雜志，2006，15(5)：571-576.

[6]林成仁，馬雪瑛，王 敏，等.青香丸(濃縮丸)對家兔乳腺增生的影響及機理研究[J].中國實驗方劑學雜志，2003，9(5)：35-38.

[7]丁喜貴.自擬安癖湯合玉乳散治療乳腺增生223例臨床觀察[J].山西中醫，1993，9(5)：19.

[8]倪依東，梁海清，田少鵬，等.乳核散結片對乳腺增生大鼠治療作用的研究[J].中藥藥理與臨床，2004，20(4)：35-36.

[9]林至君.乳腺增生癥的辨治思路[J].中醫雜志，1995，36(8)：494-495.

Pharmacodynamic Study of Runing Oral Liquid in Treating Hyperplasia of Mammary Glands in Rats

Wang Linli1,Yang Qiaohong2,Li Zhuoheng1,Lu Laichun1,Lyu Jinsheng1
(1.Department of Pharmacy,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing,China 400042; 2.Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices,Chongqing,China 401147)

Objective To study the effect of Runing Oral Liquid in treating hyperplasia of mammary glands in rats.M ethods The rat model of hyperplasia of mammary glands s was established.The behavioral changes,mammary tissue and levels of serum hormones in rats were observed after administration of Runing Oral Liquid[0.5,2.5,5.0 mL/(kg·d)]by gavage.Results The low-,medium-, high-dose of Runing Oral Liquid could remarkably improve the behavioral abnormality,breast status and levels of serum estradiol(E2), progesterone(P)and prolactin(PRL)in rats with hyperplasia of mammary glands(P＜0.01).Conclusion Runing Oral Liquid has certain therapeutic effect on hyperplasia of mammary glands.

Runing Oral Liquid；hyperplasia of mammary glands;rat model;sex hormone

王林麗，女，大學本科，副主任藥師，研究方向為中藥制劑的研究與開發，（電子信箱）wll20126＠163.com；楊巧虹，女，大學本科，主要從事醫療器械質量檢驗工作，本文通訊作者，（電子信箱）87831702＠q.com。

2014-05-14；

2014-09-10)

R285.5；R286

A

1006-4931(2015)13-0016-02