紅景天苷對梗阻性黃疸大鼠的肝保護作用及機制探討

張立超，王晨宇，曹慧芳，李濤，馬利鋒，侯森林，康建省，劉懷軍

(1河北醫科大學第二醫院，石家莊050000;2河北北方學院附屬第一醫院)

梗阻性黃疸常表現為高膽紅素血癥，高膽紅素對細胞的毒性較強，常導致肝細胞的氧化應激損傷［1］。丙二醛(MDA)、SOD是反應氧化應激的重要指標。紅景天苷是紅景天經現代化學分離提取后的主要成分，有抗疲勞、抗衰老、抗炎鎮痛、免疫調節、清除自由基等多種藥理作用，已用于心血管病、全腦缺血再灌注損傷的治療中［2，3］。2012年10月～2014年10月，我們觀察了紅景天苷對梗阻性黃疸大鼠的肝保護作用，并探討其分子機制。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 8～9周雌性SD大鼠40只(購自河北醫科大學第二醫院實驗動物中心)，體質量250～300 g，均予標準飼料、飲水飼喂，維持正常晝夜節律，適應性飼養5 d。AU-2700全自動生化分析儀購自日本奧林巴斯光學株式會社，紅景天苷購自上海源葉生物。

1.2 動物分組和干預 40只大鼠禁食12 h、禁水4 h后隨機分為對照組、模型組、低濃度組和高濃度組，每組10只。對照組行梗阻性黃疸假手術，2%的苯巴比妥鈉100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游離膽總管但不結扎。其余組均制備梗阻性黃疸模型:2%的苯巴比妥鈉100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游離并雙重結扎膽總管。大鼠清醒后予正常飲水和喂食。造模24 h后，對照組和模型組均經腹腔注射生理鹽水0.5 mL/100 g，1次/d。低濃度組和高濃度組分別經腹腔注射15 mg/100 g、30 mg/100 g紅景天苷，1次/d。

1.3 血清AST、ALT、直接膽紅素(DBIL)、總膽紅素(TBIL)水平檢測 分別于干預7、14 d時采集大鼠腹尾部動脈血1 mL，2 000 r/min離心15 min，取上清，保存備用。采用全自動生化分析儀檢測血清AST、ALT、DBIL、TBIL水平。

1.4 血清MDA、SOD檢測 于干預7、14 d時采集大鼠腹尾動脈血1 mL，采用酶標儀檢測MDA、SOD。

1.5 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。計量資料以s表示，組間比較采用one-way ANOVA，并采用LSD、SNK、Duncan法進行組內比較。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平，見表1。干預7、14 d時各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA水平均為模型組＞低濃度組＞高濃度組＞對照組，P均＜0.05;干預7、14 d時各組SOD水平均為模型組＜低濃度組＜高濃度組＜對照組，P均＜0.05。見表1。

3 討論

梗阻性黃疸是指因膽總管結石、膽管狹窄或者膽管癌等良、惡性疾病引起的膽管系統阻塞，導致膽汁的排泄受阻而使膽紅素反流入血引起的黃疸［4］。梗阻性黃疸可導致DBIL升高、肝功能障礙、胃腸屏障功能障礙［5］、解毒功能障礙和組織愈合能力差等［6］。以往，臨床常用的治療方法多以解除膽管系統梗阻為主［7］。近年研究發現，黃疸可導致機體出現氧化應激反應［8］，導致肝臟、腎臟、大腦等出現氧化應激損傷。TBIL可抑制細胞膜生物功能，導致細胞內核酸、核蛋白的合成下降，降低線粒體活化活力，使其能量代謝下降，最后對細胞產生毒性作用［9］。脂質和蛋白質氧化損傷是高膽紅素血癥特別是TBIL介導的機體損傷的重要機制之一［10］。

表1 各組血清AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比較(s)

表1 各組血清AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比較(s)

注:與對照組同時間比較，*P＜0.05;與模型組同時間比較，ΔP＜0.05;與低濃度組同時間比較，#P＜0.05。

10干預7 d 47.10±6.02 107.03±12.02 5.22±0.92 7.08±0.75 1.30±0.02 200.03±21.92干預14 d 38.35±8.13 115.46±13.31 6.91±1.04 8.21±1.15 1.91±0.13 199.03±22.01模型組 10干預7 d 141.23±17.90* 341.78±23.05* 200.13±15.03* 243.89±22.63* 6.41±1.02* 135.33±9.38*干預14 d 234.12±21.83* 553.18±43.47* 271.89±22.78* 350.18±39.29* 17.72±1.58* 103.30±9.23*低濃度組 10干預7 d 139.21±13.04*Δ 270.89±22.87*Δ 172.39±19.93*Δ 202.51±19.61*Δ 5.44±0.33*Δ 140.18±13.54*Δ干預14 d 210.43±12.53*Δ 468.98±32.51*Δ 230.76±21.34*Δ 310.56±29.21*Δ 12.21±0.92*Δ 118.98±11.27*Δ高濃度組 10干預7 d 110.89±9.86*Δ# 201.65±21.34*Δ# 130.78±28.10*Δ#177.16±13.55*Δ# 4.15±0.32 169.98±13.62*Δ#干預14 d 132.65±8.26*Δ# 358.43±23.01*Δ# 189.88±18.54*Δ#252.15±41.23*Δ# 7.50±0.57 139.14±18.65*Δ#對照組

紅景天屬于景天科多年生草木或灌木植物，藥用歷史悠久。中醫認為，紅景天具有祛邪惡氣、補氣養心、活血清肺、收澀止血等作用［11］。研究發現，紅景天苷可抑制H2O2對細胞的氧化損害，恢復線粒體的膜電位和膜通透性［12］。MDA是體內氧化應激反應時脂質過氧化的終末產物之一，常用于反映體內脂質過氧化的程度，測定MDA含量可間接反映氧自由基對細胞的損傷程度［13］。而SOD是機體的抗氧化物質。其活力的高低可間接反映機體清除氧自由基的能力。ALT和AST是急性肝功能損傷的指標，TBIL和DBIL是梗阻性黃疸模型成功建立的指標和肝功能損傷指標［14］。本研究發現，干預7、14 d時各組血清AST、ALT、MDA、TBIL、DBIL水平均為模型組＞低濃度組＞高濃度組＞對照組;干預7、14 d時各組SOD水平均為模型組＜低濃度組＜高濃度組＜對照組，說明紅景天苷具有肝保護作用，可能是與其抵抗氧化應激損傷有關，但具體分子機制尚需進一步研究。

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