布魯氏菌病患者實驗室檢查結果分析
王克迪,蘇建榮*
(首都醫科大學附屬北京友誼醫院 臨床檢驗中心,北京100050)
布魯氏菌病(Brucellosis)又稱地中海弛張熱,馬爾他熱,波浪熱或波狀熱,簡稱布病,是由布魯氏菌引起的人畜共患性全身傳染病,主要傳播途徑是經皮膚黏膜和消化道進入人體而感染發病,并在局部淋巴結內增殖形成病灶,繁殖到一定數量后破潰入血,并被帶到肝、脾、骨髓等處形成病灶。這些病灶中的病菌又可以多次入血,引起臨床癥狀的反復加重,形成波浪式熱型。其臨床特點為長期發熱、多汗、關節痛及肝脾腫大等[1]。近年來,養畜戶增多,牲畜交易活躍,而食品的檢疫管理和布病的防治工作相對滯后,使該病的發病率顯著升高。最近,我院布魯氏菌病檢出率也有所增加,為使臨床實驗室人員了解該病臨床及實驗室檢查特點,現將我院近3年來10例布病的實驗室檢查結果進行總結。
1材料與方法
1.1一般資料選自2012年5月至2015年5月就診于北京友誼醫院感染內科,并被明確診斷為布魯氏菌病的患者。共10例,均為男性,年齡在21-64歲,7例有明確牛羊接觸史,3例無明確接觸史。
1.2儀器與試劑Sysmex XE-5000血細胞分析儀(日本Sysmex公司);VITEC-COMPACT II全自動微生物分析系統(法國生物梅里埃公司);BD9120全自動血培養儀(美國BD公司);血瓊脂平板培養基購自法國生物梅里埃公司。
1.3方法取入組者晨起空腹靜脈血2-3 ml,EDTA-K抗凝,進行血常規測定并記錄數據。另取患者外周靜脈血8-10 ml注入血培養瓶(需氧瓶和厭氧瓶1瓶),即刻進行血培養。陽性報警后立即轉種血瓊脂平板培養基孵育,每8h觀察一次菌落生長情況并記錄。

2結果
2.1血常規白細胞均值為(5.6±2.3)×109/L,最高值9.21×109/L,最低值2.00×109/L,正常或輕度減少,淋巴細胞百分比為(44.6±8.5)%,相對或絕對增多,最高可達60%以上。病程較長者可有輕或中度貧血,血小板多正常。血沉均增速,均值為(19.1±7.9)mm/h,血漿C反應蛋白升高,均值為(13.8±5.1)mg/L,見表1和圖1。

表1 10例布魯氏菌病的實驗室檢查結果
+:有相應臨床癥狀或陽性,-:無相應臨床癥狀或陰性,N:檢測結果在正常參考范圍內。WBC:白細胞計數;GR%:中性粒細胞百分比;LY%%淋巴細胞百分比;RBC:紅細胞計數;PLT:血小板計數;CRP:C反應蛋白;ESR:紅細胞沉降率

-3-+3:代表每例樣本檢測值與相應指標均值的距離。WBC:白細胞計數;GR%:中性粒細胞百分比;LY%:淋巴細胞百分比;RBC:紅細胞計數;ESR:紅細胞沉降率;CRP:C反應蛋白
圖110例布魯氏菌病的實驗室結果分布圖
2.2免疫學檢查常用布氏桿菌虎紅試驗,其原理是用布氏桿菌制備凝集抗原,與不同稀釋度的患者血清混合,在玻片上做凝集實驗,發生凝集為陽性,能夠有效去除血清中非特異性凝集素,有較好的敏感性和特異性[2]。
2.3細菌學檢查診斷布魯氏菌病的金標準。患者血液、骨髓、乳汁、子宮分泌物均可做細菌培養。血和骨髓培養是最容易分離出布魯氏菌的,后者較前者陽性率高。布魯菌為專性需氧菌,生長緩慢是其特點,血培養陽性報警時間最短為82.6 h,最長為110 h,均值為(85.9±27.8) h,陽性血培養瓶轉種平皿形成肉眼可見的菌落時間最短為48 h,最長為96 h,均值為(64.0±19.2) h。因此,懷疑布魯氏菌的血標本應保留2周以上。血瓊脂平板上孵育2-5天,可形成直徑0.5-1 mm的光滑菌落,比臨床實驗室其他革蘭陰性菌小,無色,凸起,邊緣整齊(圖2)。涂片為革蘭陰性短小球桿菌,呈“細沙狀”(圖3),氧化酶試驗陽性,過氧化氫酶試驗陽性。因此,臨床上懷疑布魯氏桿菌病的標本應延長培養時間,避免漏診。此外,布魯菌對人有極強的致病性,所有標本均應在生物安全2級以上水平實驗室中處理,并在生物安全柜內進行[3]。
3討論
布魯氏菌病的易感人群包括在農牧區有病畜接觸史人員、飲用過未經消毒滅菌乳品人群及與含菌培養標本接觸的實驗室工作人員。多數患者存在接觸史,也有一部分患者無明確接觸史[4]。本研究中5例患者從事牛羊養殖業,2例患者食用過不潔羊肉。發熱是布病的特點之一,本文中10例患者均有發熱,體溫波動于37.5-40.0℃,波動大于1℃,熱前多伴寒戰畏寒。本文中患者都曾經在外院就診,但由于該病是少見病,臨床表現多樣、缺乏特異性,容易被臨床醫生忽視,此外,細菌生長極其緩慢,血培養容易假陰性,造成漏診,延誤治療。因此,臨床醫生對于不明原因發熱的患者應仔細詢問病史,了解有無牛羊接觸史,結合臨床表現和體征,確定診斷方向,對于臨床考慮布病的患者,應提高血培養和骨髓培養的送檢率[5]。

圖2 馬耳他布魯菌鏡下形態(×1000倍)

圖3 血瓊脂平板上馬耳他布魯菌菌落形態
實驗室對于臨床懷疑布病的血培養標本應延長培養時間至2周,以提高陽性率。血培養對布氏桿菌病的診斷和治療起著極其重要的作用;實驗室應積極與臨床聯系,加強技術人員對不常見疑難菌的培訓,擴展細菌鑒定思路。由于菌血癥是臨床醫學急癥,準確鑒定病原菌至關重要。臨床盡早采集血培養,實驗室盡快培養出病原菌,對危重患者感染的診斷,治療和預后有著極其重要的意義。
參考文獻:
[1]唐志堅.布魯氏菌病的流行病學調查及分析[J].中國衛生產業,2015,3:7.
[2]Díaz R,Casanova A,Ariza J.The Rose Bengal Test in human brucellosis:a neglected test for the diagnosis of a neglected disease[J].PLos Negl Trop Dis,2011,5:950.
[3]謝秀麗,徐英春,王輝.血培養對布氏桿菌病診治的意義[J].中國處方藥,2005,6(39):62.
[4]王艷玲,蔡靜明,劉穎,等.我國布氏菌病危險因素的Meta分析[J].醫學信息,2015,9:121.
[5]史艷玲,張翠花,趙紅九,等.血培養檢出馬耳他布魯氏菌1例報道分析[J].臨床醫學,2015,4:125.
(收稿日期:2015-07-14)
*通訊作者
文章編號:1007-4287(2015)12-2122-03