74株肺炎克雷伯桿菌的藥敏試驗結果分析

程穎，何秉燕(武漢大學中南醫院，武漢 43007；2湖北省婦幼保健院)

74株肺炎克雷伯桿菌的藥敏試驗結果分析

程穎1,2，何秉燕1(1武漢大學中南醫院，武漢 430071；2湖北省婦幼保健院)

摘要：目的分析肺炎克雷伯桿菌的藥敏試驗結果，為合理用藥提供依據。方法74株肺炎克雷伯桿菌，采用瓊脂紙片擴散法(K-B法)進行體外藥敏試驗，觀察肺炎克雷伯桿菌對氨芐西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟、亞胺培南、美羅培南、環丙沙星、阿米卡星等的耐藥性。結果74株肺炎克雷伯桿菌中產ESBLs菌株52株，分離出耐碳青酶烯類肺炎克雷伯桿菌。肺炎克雷伯桿菌對氨芐西林100%耐藥。ESBLs陰性菌株對常用抗菌藥物(除外氨芐西林)的耐藥率在41%以下，ESBLs陽性菌株對常用抗菌藥物的耐藥率在5.77%~100%。結論肺炎克雷伯桿菌對常用抗菌藥物耐藥率較高。

關鍵詞：肺炎克雷伯桿菌；細菌感染；微生物敏感性試驗；細菌耐藥

隨著重癥醫學的發展，危重新生兒的存活率不斷提高。與此同時，由于廣譜抗菌藥物的廣泛使用，臨床上產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯桿菌菌株越來越多，成為抗感染治療的棘手問題之一。本研究分析了74株肺炎克雷伯桿菌的藥敏試驗結果，旨在為兒科合理用藥提供依據。

1資料與方法

1.1菌株來源74株肺炎克雷伯桿菌，來源于2011年1月～2014年4月湖北省婦幼保健院新生兒科重癥監護室住院的62例肺炎克雷伯桿菌感染患兒。所有患兒入院后根據不同病情進行痰培養、血培養、胃液培養、氣管插管患兒更換氣管插管或拔出氣管插管時做導管末端培養等，剔除同一患者相同部位的重復菌株。均經法國生物梅里埃的VITEK2-COMPACT全自動細菌鑒定儀進行菌株鑒定。62例患兒中，24例氣管插管導管末端培養或痰培養1次陽性，12例臍部分泌物培養1次陽性，11例胃液培養1次陽性，1例尿培養1次陽性，1例PICC導管末端培養陽性，1例眼分泌物培養1次陽性，10例2次及以上痰培養或不同部位(痰、胃液、氣管插管導管末端、尿液、分泌物)培養陽性。

1.2藥敏試驗方法采用瓊脂紙片擴散法(K-B法)進行體外藥敏試驗，并嚴格按照美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI)相應最新版本規定的折點進行操作和判斷。質控菌株為ATCC700603，藥敏紙片為氨芐西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟、亞胺培南、美羅培南、環丙沙星、阿米卡星等。數據分析采用WHONET5.4軟件。

1.3統計學方法采用SPSS17.0統計軟件。計數資料比較用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2結果

74株肺炎克雷伯桿菌中產ESBLs菌株52株。ESBLs陽性與陰性菌株對氨芐西林全部耐藥，除哌拉西林—他唑巴坦、頭孢替坦、左氧氟沙星、呋喃妥因外，兩者對其他常用抗菌藥物的耐藥比較差異有統計學意義(P均<0.05)。詳見表1。

表1　74株肺炎克雷伯桿菌對常用抗菌藥物耐藥情況(%)

3討論

新生兒危急重癥患兒搶救成功與否，不僅與重癥醫學的發展及高級生命支持手段的應用有關，還取決于感染本身及抗菌藥物的合理運用，同時離不開醫院感染的有效預防控制措施。肺炎克雷伯桿菌系革蘭陰性桿菌，是呼吸道、消化道及周圍環境的常見菌，是導致小兒肺炎最重要的條件致病菌[1]。近年來隨著抗菌藥物的大量應用甚至濫用，呼吸道感染菌發生了一定程度的變遷，肺炎克雷伯桿菌已成為社區獲得性肺炎和醫院感染的重要病原菌。肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌是產ESBLs的最重要代表菌種，ESBLs是常見的廣譜β-內酰胺酶，其編碼基因位于質粒并通過質粒傳播；該酶除可水解青霉素類和第一、二代頭孢菌素類抗菌藥物，還能水解第三代頭孢菌素和單環β-內酰胺類抗菌藥物使之失去活性，其廣譜、多藥耐藥性及在菌株間的傳播性已引起全球的關注[2]。新生兒監護病房是發生KPN醫院感染的主要病區之一。肺炎克雷伯桿菌和大腸埃希菌，尤其是產ESBLs菌株是新生兒監護病房新生兒院內感染發生和導致死亡的常見危險因素[3]。

肺炎克雷伯桿菌對β-內酰胺類抗菌藥物耐藥形勢嚴峻。本研究74株肺炎克雷伯桿菌中，產ESBLs菌株52株(70.27%)。ESBLs陽性及陰性菌株對氨芐西林100%耐藥，與部分國內學者[4～6]的研究結果相似。ESBLs陰性菌株對常用抗菌藥物(除外氨芐西林)的耐藥率在41%以下，對亞胺培南、美洛培南、環丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星均敏感。ESBLs陽性菌株對常用抗菌藥物的耐藥率在5.77%~100.00%，即使是新生兒科極少使用的氨基糖苷類及喹諾酮類耐藥率最高已超過60.00%，而一向被新生兒監護病房視作治療肺炎克雷伯桿菌感染首選藥物的碳青霉烯類已被突破防線，出現耐碳青酶烯類肺炎克雷伯桿菌(CRKP)。自從1997年MacKenzie等發現首例CRKP以來，CRKP陸續在世界各地出現報道[7]。近年來歐洲各國CRKP總檢出率為0.4%[8]，美國31家醫療中心CRKP的檢出率為5.6%[9]，印度一家三級醫院2009年CRKP的檢出率高達52.0%[10]。國內的部分醫院也陸續檢出并報道，雖然各地區各醫院的檢出率存在差異，但普遍表現出快速增長的趨勢，對院內感染的發生及流行爆發危害極大。目前認為CRKP耐碳青酶烯類的機制主要有兩點：AmpC的過度表達聯合孔蛋白的丟失和碳青霉烯酶的產生，其中碳青霉烯酶的產生是最主要的原因[11]。國際上還未出現治療CRKP所致多重耐藥甚至泛耐藥菌感染的有效抗菌藥物，控制CRKP產生及傳播僅靠加強抗菌藥物的合理使用是不夠的，落實院內感染的防控措施與微生物室的檢驗和動態監測等都是不能忽視的環節。本研究中，臨床醫生在診治CRKP感染的患兒中發現，有的患兒通過加強營養支持等綜合治療手段，未調整抗菌藥物使用，患兒預后良好，提示我們一定要結合臨床癥狀和體征動態分析病情，不能一檢出即馬上升級抗菌藥物，如果只是定植，可以針對性的運用院感防控措施，切斷耐藥菌的傳播途徑，并加強支持治療。由于本資料的樣本量有限，觀點可能存在局限性，應繼續進行更深入的研究。

綜上可見，肺炎克雷伯桿菌對常用抗菌藥物耐藥率較高，治療上應根據病原菌耐藥種類、感染部位、感染嚴重程度、新生兒的生理特點，合理依據藥敏結果，選擇合適的抗菌藥物，同時采取綜合防治措施遏制感染。

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(收稿日期：2014-11-22)

通信作者：何秉燕

中圖分類號：R378.99

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2015)11-0069-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.11.028