新生兒呼吸道分離凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性分析*

郭瑞林，李凱旋，蘇 冰，郭建春，董昌虎，張曉雪

(陜西中醫學院第二附屬醫院檢驗科，陜西咸陽 712000)

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·論 著·

新生兒呼吸道分離凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性分析*

郭瑞林，李凱旋，蘇 冰，郭建春，董昌虎，張曉雪

(陜西中醫學院第二附屬醫院檢驗科，陜西咸陽 712000)

目的 探討新生兒呼吸道感染凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)的耐藥特點，指導臨床合理用藥和預防院內感染。方法 采用K-B紙片擴散法，測定CNS對l6種抗菌藥物的耐藥性。結果 1 332例新生兒呼吸道標本中檢出CNS 132例，陽性率10.1%，其中耐甲氧西林CNS檢出14例，占CNS的10.6%。132例CNS對青霉素類(97.7%)、紅霉素(77.3%)、克林霉素(57.6%)耐藥率較高，對頭孢吡肟(7.2%)和頭孢哌酮/舒巴坦(9.7%)耐藥率較低，對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺全部敏感。結論 CNS為新生兒呼吸道感染的重要致病菌，臨床醫生應根據新生兒感染CNS的藥物敏感試驗結果合理使用抗菌藥物。

新生兒； 呼吸道感染； 凝固酶陰性葡萄球菌； 耐藥性； 院內感染

凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)廣泛存在于自然界和人體表面，是引起各種院內感染的常見致病菌。新生兒免疫系統不健全，呼吸道抵抗力較弱，在生產過程和出生后極易發生呼吸道CNS感染，因此，針對新生兒呼吸道感染CNS的治療尤為重要。現將本院2012年1月至2013年12月新生兒病房呼吸道分離CNS 132例的耐藥性進行分析，以期為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院新生兒病房2012年1月至2013年12月送檢的疑為呼吸道細菌感染患兒痰標本共1 332例。

1.2 儀器與試劑 分離培養基哥倫比亞羊血平板、巧克力平板、麥康凱平板由鄭州安圖生物工程股份有限公司生產，藥敏培養基M-H瓊脂由法國生物梅里埃公司生產，細菌鑒定采用API或手工鑒定，藥敏紙片由英國Oxold公司生產。

1.3 方法

1.3.1 新生兒留取痰標本的方法 先清潔口腔，將一次性嬰兒吸痰管的長管接好負壓吸引器，用無菌持物鑷將插入管經口咽或者呼吸道輕輕插入，開動吸引器，此時痰液慢慢吸出，并流入嬰兒吸痰器中，吸痰完畢，分開接頭，用一次性吸痰器的無菌蓋將痰液存于痰液器中密封后送檢。

1.3.2 細菌分離與鑒定 嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版和本科室操作規程執行，細菌鑒定采用API 微生物鑒定系統[1]。

1.3.3 藥敏試驗方法和資料統計 按美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)規定K-B紙片擴散法進行試驗，根據2012年CLSI標準判斷藥敏試驗結果，將中介并入耐藥結果。

1.3.4 耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢測 MRCNS的檢測采用CLSI推薦的頭孢西丁紙片擴散法(K-B法)進行篩選，即抑菌環直徑小于或等于24 mm為MRCNS耐藥菌株。用瓊脂擴散進行確證，在含4%氯化鈉注射液，6 μg/mL苯唑西林M-H平板中點種0.5麥氏單位菌液，經35 ℃，24 h孵育，只要有一個菌落生長即判斷為MRCNS[2]。

1.3.5 質量控制 以金黃色葡萄球菌(ATCC 43300)為葡萄球菌陽性參考菌株，葡萄球菌(ATCC 12228)為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌陰性參考菌株，藥敏質控菌株與試驗菌株同時進行檢測。

1.4 統計學處理 采用WHONET5.6軟件統計分析藥物敏感試驗結果。

2 結 果

2.1 檢出陽性率 1 332例新生兒呼吸道標本中檢出CNS 132例，陽性率10.1%，其中MRCNS檢出14例，占CNS的10.6%。CNS以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌為主，表皮葡萄球菌76例(57.6%)，溶血葡萄球菌28例(21.2%)，人葡萄球菌16例(12.1%)，松鼠葡萄球菌6例(4.5%),華納葡萄球菌1 例(0.8%)，耳葡萄球菌1例(0.8%)，孔氏葡萄球菌1例(0.8%)，其他葡萄球菌3例(2.3%)。

2.2 細菌藥敏試驗結果 132例CNS對青霉素類耐藥率達95.0%以上、對紅霉素耐藥率77.3%、對克林霉素耐藥率57.6%、對復方磺胺甲噁唑耐藥率51.5%；對4代頭孢菌素頭孢吡肟和3代頭孢加酶抑制劑頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率低于10.0%；對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺全部敏感。各種抗菌藥物對CNS藥敏試驗結果見表1。

表1 凝固酶陰性葡萄球菌藥敏試驗結果[n(%)]

3 討 論

CNS是除金黃色葡萄球菌外的一類葡萄球菌，大量存在于人體表面，正常條件下不致病，但某些情況如免疫力降低或接受一些侵入性治療容易引起CNS感染。新生兒免疫系統不健全，抵抗力差，可能存在體質量極低、中心靜脈置管、胃腸外營養以及廣譜抗菌藥物不合理使用等因素，使CNS感染的機會大大增加[3]。感染新生兒的主要環境包括母嬰同室時的產科病房、新生兒病房、新生兒重癥監護病房等，主要通過母體及醫護人員的手、口鼻、醫療器械、暖箱、奶嘴、衣物、敷料等物品在醫護人員或患者間播散。特別是CNS能產生黏質物，在其表面形成生物膜，對光滑的生物醫學材料具有吸附作用，細菌藏于厚厚的生物膜內，使抗菌藥物治療效果較差[4]。

本研究1 332例疑為新生兒呼吸道感染患者標本中檢出CNS 132例，陽性率10.1%，其中MRCNS 14例，占CNS的10.6%。表皮葡萄球菌在新生兒呼吸道CNS感染中有76例，占57.6%，與彭敬紅等[5]的報道一致，由此提示新生兒呼吸道感染不可忽視表皮葡萄球菌感染。

新生兒呼吸道分離CNS對青霉素類耐藥率達95.0%以上，對紅霉素、克林霉素、復方磺胺甲噁唑耐藥率大于50.0%,表現為多重耐藥。本研究尚未發現萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺耐藥株。萬古霉素和替考拉寧是針對成人葡萄球菌感染的首選抗菌藥物，但它們對耳、腎的不良反應較大，新生兒患者使用應十分慎重，未成熟的新生兒，最好測定血清藥物濃度以積累使用經驗。萬古霉素在肺組織的濃度低，并不推薦用于肺部感染的治療[6]。

利奈唑胺是一種新型惡唑烷酮類合成抗菌藥物，2000年獲得美國食品和藥物管理局批準上市，已被批準用于新生兒和兒童，此類藥物對各類耐藥的革蘭陽性球菌具有抗菌活性，通過抑制細菌蛋白質起始階段的合成發揮作用，與其他抑制合成的抗菌藥物很少有交叉耐藥，且體外不易誘導細菌耐藥性產生[7]。國內一項研究也顯示利奈唑胺對革蘭陽性球菌包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染的療效和安全性良好[8]。利奈唑胺在肺組織具有較高濃度，利奈唑胺在治療新生兒革蘭陽性球菌感染的有效性和安全性方面取得良好效果[9-11]，在治療新生兒呼吸道CNS感染時值得進一步積累經驗。

其他敏感性較高的抗菌藥物包括頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦等。頭孢噻肟為第3代頭孢菌素，抗菌譜廣，對大部分非耐藥革蘭陰性桿菌有良好的抗菌活性。本研究顯示，頭孢噻肟對CNS也具有良好的抗菌活性，可作為經驗用藥之一。頭孢吡肟雖然體外耐藥率(7.2%)較低，但在新生兒的治療經驗較少，對2個月以下兒童使用本品應謹慎。舒巴坦為一種不可逆的β-內酰胺酶抑制劑，與第3代頭孢菌素聯合應用具有良好的殺菌活性。本項研究證明頭孢哌酮與舒巴坦的復合制劑在體外具有良好的抗菌效果，耐藥率為9.7%，是控制新生兒感染的良好抗菌藥物，可作為治療新生兒呼吸道CNS感染的經驗抗菌藥物之一?？傊?，CNS呼吸道感染治療中應盡量根據藥敏試驗結果合理使用抗菌藥物，避免盲目用藥或聯合使用。

新生兒發生的呼吸道CNS感染多為院內感染，防范是重點。應積極做好產前保健，預防早產及羊膜早破，減少產前、產時窒息損傷、減少氣管插管機會；應加強對產房和新生兒病房的院內感染防范，規范工作人員手消毒；在產科新生兒室和兒科新生兒病房內一旦出現院內感染，應予以高度重視，盡快清除病原體和傳播途徑，積極采取相應消毒隔離措施，防止發生院內交叉感染和大規模暴發流行。臨床用藥應根據藥敏試驗結果并結合新生兒CNS呼吸道的特點合理使用抗菌藥物，加強耐藥監測和感染控制，從而改善CNS耐藥現狀。

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Resistance analysis of coagulase negative staphylococcus in newborn respiratory tract samples*

GUORui-lin,LIKai-xuan,SUBing,GUOJian-chun,DONGChang-hu,ZHANGXiao-xue

(DepartmentofClinicalLaboratory,theSecondAffiliatedHospitalofShanxiUniversityOfChineseMedicine,Xianyang,Shanxi712000,China)

Objective To explore drug resistance characteristics of neonatal respiratory infections coagulase-negative staphylococci (CNS),and to guide clinical rational drug use and to prevent nosocomial infection.Methods K-B disk diffusion method was used to determinate CNS on l6 antimicrobial drug resistance.Results CNS 132 cases were detected from 1 332 cases of neonatal respiratory specimens,the positive rate was 10.1%,in which MRCNS detected in 14 cases,accounting for 10.6% of coagulase-negative staphylococci.And 132 coagulase-negative staphylococci had higher resistance rates to penicillin (97.7%),erythromycin (77.3%),clindamycin (57.6%) ;had lower resistance rates to cefepime (7.2%) and cefoperazone/sulbactam (9.7%),and with all sensitive to vancomycin,teicoplanin,linezolid.Conclusion CNS might be important pathogenic bacteria for neonatal respiratory tract infection,clinicians should rational use of antimicrobial drugs based on the results of drug susceptibility testing of newborns infected with CNS.

newborn; respiratory infections; coagulase-negative staphylococci; resistance; nosocomial infections

陜西省咸陽市科學技術研究發展計劃項目(2011K13-2)。

郭瑞林，男，本科，主任技師，主要從事微生物檢驗與細菌耐藥研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.03.014

A

1672-9455(2015)03-0322-02

2014-07-07

2014-10-15)