百令膠囊對放射性肺損傷大鼠血漿IL-6、TNF-α、TGF-β1影響的實驗研究

衷敬華，王祥財，許明君，施華球，王釔力，黃 莉，張積仁

(1.贛南醫學院第一附屬醫院 腫瘤科，江西 贛州 341000；2.南方醫科大學珠江醫院 腫瘤中心，廣東 廣州 510282)

?

百令膠囊對放射性肺損傷大鼠血漿IL-6、TNF-α、TGF-β1影響的實驗研究

衷敬華1，王祥財1，許明君1，施華球1，王釔力1，黃 莉1，張積仁2*

(1.贛南醫學院第一附屬醫院 腫瘤科，江西 贛州 341000；2.南方醫科大學珠江醫院 腫瘤中心，廣東 廣州 510282)

目的：分析百令膠囊對放射性肺損傷大鼠血漿IL-6、TNF-α、TGF-β1含量的影響，探討百令膠囊防治放射性肺損傷效果及可能作用機制。方法：將141只6周齡SD大鼠(清潔級，雄性)隨機分對照組(n=21)、模型組(n=30)、百令預防組(n=30)、百令治療組(n=30)、地塞米松治療組(n=30)，各組大鼠均給予X射線全胸單次照射(20Gy)，正常對照組除外。每組大鼠分別于第2、4、6周不同時間點隨機處死，心臟采血約5mL，置肝素抗凝管中，采用ELISA法檢測血漿中TNF-α、IL-6、TGF-β1含量。結果：相較于模型組，地塞米松組、百令預防組、治療組大鼠第2、4、6周血漿中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量顯著下降(P<0.01或P<0.05)；百令預防組大鼠第2、4、6周血漿中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量低于地塞米松組和百令治療組(P<0.01)，百令治療組大鼠第2、4、6周血漿中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量低于地塞米松治療組(P<0.01)。結論：百令膠囊可抑制或減輕放射性肺泡炎性反應、肺纖維化進程，可能通過降低血漿中IL-6、TNF-α、TGF-β1等細胞因子的含量實現。

放射性肺損傷；百令膠囊；炎癥因子；IL-6；TNF-α；TGF-β1

放射性肺損傷為胸部腫瘤放射治療最為常見并發癥之一，其發病機制尚不明確，尚無理想的治療方法。目前，國內外關于百令膠囊預防及治療放射性肺損傷的研究鮮有報道。本實驗通過觀察百令膠囊對放射性肺損傷大鼠血漿IL-6、TNF-α、TGF-β1含量的影響，探討百令膠囊防治放射性肺損傷的臨床效果，并對其可能作用機制進行探究。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 6周齡SD大鼠(清潔級，雄性)141只，體重(180±20)g。

1.1.2 藥物 百令膠囊,醋酸地塞米松片。

1.1.3 儀器 直線加速器,試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 將141只6周齡SD大鼠(清潔級，雄性)隨機分為對照組(n=21)、模型組(n=30)、百令預防組(n=30)、治療組(n=30)、地塞米松組(n=30)。

1.2.2 模型制作 采用直線加速器X線全胸單次照射建立放射性肺損傷大鼠模型，300cGy/min，總劑量為20Gy。

1.2.3 給藥方法 百令預防組大鼠于照射前14天開始灌服百令膠囊，其余各組均于造模后第2天灌胃，對照組、模型組灌胃等體積生理鹽水，治療組灌服百令膠囊混懸液，地塞米松組灌胃地塞米松混懸液灌胃，每天1次。

1.3 取材方法及指標檢測

對照組分別于照射后第2、4、6周取7只大鼠，其余各組則隨機取10只，腹腔注射10%水合氯醛麻醉后，于大鼠心臟采血5mL，置肝素抗凝管中，置-20℃冰箱保存待查。采用ELISA(雙抗體夾心法)測定血漿中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 各組大鼠血漿IL-6的含量變化比較

相較于模型組，百令預防組、治療組、地塞米松組大鼠血漿IL-6的含量明顯下降(P<0.05)；百令預防組大鼠血漿IL-6的含量低于地塞米松組和百令治療組(P<0.05)，百令治療組大鼠血漿IL-6的含量低于地塞米松組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠血漿IL-6含量變化比較

組別時間給藥前2周4周6周正常對照組(n=21)35.±4.5550.02±6.0533.96±3.5931.23±2.88肺損傷模型組(n=30)32.45±5.32350.75±13.36257.92±12.04240.32±15.40地塞米松組(n=30)36.42±5.35314.09±14.30227.06±10.01206.37±13.76百令治療組(n=30)35.67±5.54248.47±11.74159.91±9.47159.63±10.76百令預防組(n=30)34.57±3.26182.54±14.79121.00±11.87105.38±8.29

2.2 各組大鼠血漿TNF-α的含量變化比較

相較于模型組，地塞米松組、百令預防組、治療組大鼠血漿TNF-α含量均顯著下降(P<0.01)；百令預防組大鼠血漿TNF-α的含量顯著低于地塞米松組和百令治療組(P<0.01)，百令治療組大鼠血漿TNF-α的含量顯著低于地塞米松治療組(P<0.01)。見表2。

表2 各組大鼠血漿TNF-α含量變化比較

組別時間給藥前2周4周6周正常對照組(n=21)31.53±1.2532.58±0.9835.02±2.3734.02±1.93肺損傷模型組(n=30)35.20±1.32233.40±5.64179.13±9.58155.69±8.03地塞米松組(n=30)36.32±2.46181.00±17.96146.50±7.10123.41±7.17百令治療組(n=30)35.14±2.35125.88±2.75111.24±9.3290.79±4.75百令預防組(n=30)34.22±2.4385.29±6.8355.05±5.6548.76±3.98

2.3 各組大鼠血漿TGF-β1的含量變化比較

相比于模型組，地塞米松組、百令預防組、治療組大鼠血漿TGF-β1含量明顯下降(P<0.01)。百令預防組低于地塞米松組和百令治療組(P<0.01)，百令治療組低于地塞米松組(P<0.01)。見表3。

表3 各組大鼠血漿TGF-β1含量變化比較

組別時間給藥前2周4周6周正常對照組(n=21)38.68±2.3433.66±1.7144.66±2.4245.71±2.82肺損傷模型組(n=30)36.31±5.32540.34±14.84644.07±6.63858.90±7.19地塞米松組(n=30)37.53±7.35363.71±10.82460.79±11.39635.03±13.48百令治療組(n=30)32.56±4.80256.28±8.19368.76±11.16465.34±8.64百令預防組(n=30)36.45±5.63153.05±14.92209.68±14.12272.58±9.95

3 討論

越來越多研究證據表明，放射性肺炎及繼而出現的肺纖維化可能由肺受照射后啟動的細胞因子瀑布(cytokine cascade)所致[1]。該種細胞因子是較為復雜的細胞因子網絡，研究[2]表明，肺受照射后數小時，肺照射野局部組織內合成、分泌大量細胞因子，進而增加炎性細胞活性而造成急性放射性肺炎的發生及發展。上述細胞因子主要分為兩類：一類是以TGF-β為主參與組織修復和器官纖維化的因子；另一類是以IL-1和TNF-α為主參與局部損傷與炎癥反應的因子。因此，放射性肺損傷的發生可能源于多種細胞因子的協同作用[3]。TNF-α因子被認為是放射性肺炎發生的啟動因子，為強有力的促炎癥反應因子。IL-6是多功能細胞因子，其與放射性肺損傷的發生存在一定關系。TGF-β是強有力的促成纖維細胞分裂因子，在纖維化的形成過程中起著重要作用。研究發現，SD大鼠照射2h后，支氣管上皮細胞、肺泡巨噬細胞出現TNF-α強表達持續至第4周后呈降低趨勢并維持較低水平。

本實驗結果顯示：與對照組比較，第2、4、6周模型組大鼠血漿中TNF-α、IL-6、TGF-β1含量均呈明顯升高的趨勢(P<0.01)。與模型組比較，第2、4、6周百令預防組、治療組大鼠血漿中IL-6含量均明顯降低(P<0.01)，地塞米松組大鼠血漿中IL-6含量亦降低(第2、4周，P<0.01；第6周，P<0.05)。與模型組比較，各治療組大鼠血漿TNF-α、TGF-β1含量均明顯降低(P<0.01)，地塞米松治療組、百令治療組、預防組大鼠血漿TNF-α、TGF-β1含量呈由高到低的順序。表明百令膠囊對促炎癥因子和促纖維化細胞因子具有抑制作用，相較于西藥地塞米松療效穩定。因此，百令膠囊可在抑制或減輕放射性肺泡炎性反應的同時抑制肺纖維化進程。

[1] 山廣志.百令膠囊加味治療放射性肺炎的臨床觀察[J].實用中醫內科雜志,1996,10(4):37.

[2] 馮勤付,VUJASKOVIC Z,BRIZEL DM,等.阿米福汀對單次肺照射的保護作用及TGF-β1活性的影響[J].中華放射腫瘤學雜志,2004,13(3):222-225.

[3] 趙艷海,李志平,陳曉梅,等.人NSCLC細胞系X-線照射后TNF-α水平變化[J].中華放射醫學與防護雜志,2009,24(4):313-316.

(責任編輯：李嵐春)

2015-10-12

江西省衛計委中藥局基金項目(2014A143)

衷敬華(1981-)，男，博士，江西省贛南醫學院第一附屬醫院主治醫師，研究方向為腫瘤靶向治療基礎與臨床。

張積仁(1955-)，男，南方醫科大學珠江醫院腫瘤中心主任醫師，研究方向為腫瘤靶向治療基礎與臨床。E-mail:zhangjiren@126.com

R285

A

1673-2197(2015)24-0017-02

10.11954/ytctyy.201524007