骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬含量測(cè)定研究

馬東衛(wèi)，杜 鑫

(1.陜西方舟制藥有限公司，陜西 西安 710075；2.子洲縣馬岔鄉(xiāng)衛(wèi)生院，陜西 榆林 718407)

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骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬含量測(cè)定研究

馬東衛(wèi)1，杜 鑫2

(1.陜西方舟制藥有限公司，陜西 西安 710075；2.子洲縣馬岔鄉(xiāng)衛(wèi)生院，陜西 榆林 718407)

目的：建立骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬含量的測(cè)定方法，為其藥物質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。方法：采用化學(xué)顯色法測(cè)定骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬的含量。結(jié)果：分別測(cè)定1.0g樣品、0.5g樣品溶液，計(jì)算得酸可溶性重金屬限度為百萬分之三十。結(jié)論：該方法重現(xiàn)性較好，操作簡單易行，可有效控制骨愈靈膠囊的質(zhì)量。

骨愈靈膠囊；酸可溶性重金屬；化學(xué)顯色法

重金屬是指在規(guī)定實(shí)驗(yàn)條件下能夠與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。骨愈靈膠囊具有活血化瘀、消腫止痛、強(qiáng)筋壯骨的功效，可用于治療骨質(zhì)疏松及骨折。該品種收載于中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分(骨傷科分冊(cè))，處方中含有礦物藥，原標(biāo)準(zhǔn)中不進(jìn)行重金屬的檢查。該藥的制備過程除粉碎外，基本沒有其他加工方式，進(jìn)行酸可溶性重金屬檢查較為必要。本文采用化學(xué)顯色法初步建立了骨愈靈膠囊酸可溶性重金屬的檢查方法，以期對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

AE200型電子天平(感量0.000 1g，梅特勒托利多公司)；納氏比色管50mL，應(yīng)選擇外表面無劃痕、色澤一致、無瑕疵、管的內(nèi)徑和刻度線的高度均勻一致質(zhì)量較好的玻璃比色管進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 試劑

骨愈靈膠囊(陜西宏府怡悅制藥有限公司，批號(hào)：140101、140102、140103)；硫代乙酰胺(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20120320)，硝酸鉛(天津市京東天飛精細(xì)化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20100226)，醋酸銨(四川西隴化工有限公司，批號(hào)：100802)，氫氧化鈉(西安富力化學(xué)廠，批號(hào)：020520)，甘油(天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：20131022)，酚酞(西安化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20110311)，鹽酸(西安市三浦精細(xì)化工廠，批號(hào)：200111101)，硫酸(西安市化學(xué)試劑廠，批號(hào)：121005)，乙醚(天津化學(xué)試劑廠，批號(hào)：120217 )，濃氨(天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：111010)，乙醇(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：131014)，所有試劑均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備 稱取硝酸鉛0.159 9g，置100mL量瓶中，加硝酸5mL+水50mL溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液，臨用前，精密量取貯備液10mL，置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(鉛離子濃度為10μg/mL)，該溶液僅供當(dāng)日使用。配制與貯存的玻璃容器均不含鉛。

1.3.2 氨試液的制備 取濃氨溶液400mL，加水至1 000mL，即得。

1.3.3 酚酞指示液的制備 取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解，即得。

1.3.4 醋酸鹽緩沖液的制備 取醋酸銨25g，加水25mL溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38mL，加2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液調(diào)節(jié)pH至3.5(電位法指示)，加水稀釋至100mL，即得。

1.3.5 硫代乙酰胺試液的制備 取硫代乙酰胺4g，加水使溶解至100mL，置冰箱中保存。臨用前取混合液(加1mol/L氫氧化鈉溶液15mL、水5.0mL及甘油20mL組成)5.0mL，加上述硫代硫酸鈉溶液1.0mL，置水浴上加熱20min，冷卻，立即使用。

1.3.6 對(duì)照溶液的制備 取配制酸可溶性重金屬測(cè)定用樣品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干，加醋酸鹽緩沖液2mL、水15mL，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液定量，再用水稀釋至25mL，作為甲管。

1.3.7 酸可溶性重金屬測(cè)定用樣品溶液的制備 取本品內(nèi)容物1.0g，置坩堝中，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸1mL潤濕，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，在500～600℃熾灼至完全灰化。加硝酸0.5mL，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，加0.1mol/L鹽酸溶液10mL，攪拌5min，濾過，殘?jiān)?.1mol/L鹽酸攪拌、洗滌3次，每次20mL，合并酸液；再用乙醚振搖提取至無色，棄去乙醚液，酸液置水浴上蒸干，加水15mL，滴加氨試液至酚酞指示液顯微粉紅色，再加醋酸鹽緩沖液2mL，微熱溶解后，濾過，移至納氏比色管中，加水稀釋至25mL，搖勻，作為乙管。

2 酸可溶性重金屬的檢查及結(jié)果

2.1 依法檢查

參考《中國藥典》(2010版)一部附錄ⅨE第二法，向甲、乙兩管中分別加入硫代乙酰胺試液各2mL，搖勻，放置2min，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)乙管中顯出顏色與甲管比較，不得更深時(shí)，該表中鉛溶液的量對(duì)應(yīng)于樣品的重金屬限度。

2.2 1.0g樣品檢查結(jié)果

骨愈靈膠囊三批樣品酸可溶性重金屬檢查結(jié)果表明，當(dāng)甲管中加入1mL、2mL的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液時(shí)，乙管中顯出顏色深于甲管。結(jié)果見表1。

表1 1.0g樣品中酸可溶性重金屬檢查結(jié)果

2.3 0.5g樣品檢查結(jié)果

據(jù)文獻(xiàn)，以每27mL溶液中含10～20μg的Pb與顯色劑所產(chǎn)生的顏色為最佳目視比色范圍。為達(dá)到最佳比色范圍，同時(shí)測(cè)定骨愈靈膠囊的酸可溶性重金屬含量，取骨愈靈膠囊0.5g，按“1.3.6”項(xiàng)制備對(duì)照溶液，按“1.3.7”項(xiàng)制備酸可溶性重金屬測(cè)定用樣品溶液，結(jié)果表明，當(dāng)甲管中加入1.5mL、2mL的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液時(shí)，乙管中顯出的顏色均淺于甲管。結(jié)果見表2。

表2 0.5g樣品中酸可溶性重金屬檢查結(jié)果

2.4 酸可溶性重金屬計(jì)算

據(jù)文獻(xiàn)，重金屬限量(ppm)=標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液體積(mL)×標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度/供試品量(g)，按1.5mL計(jì)算，骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬的限量應(yīng)為30ppm，即百萬分之三十。

3 討論

骨愈靈膠囊為傳統(tǒng)中藥制劑，處方中含有三七、紅花、當(dāng)歸、川芎、赤芍、大黃、斷續(xù)、骨碎補(bǔ)、五加皮、熟地黃、白芍等十一味植物藥，血竭、乳香(制)、沒藥(制)等三味植物分泌物制品，及自然銅(煅)、硼砂等兩味礦物藥，成分極為復(fù)雜，配成檢測(cè)溶液時(shí)顏色較深，應(yīng)用重金屬檢查法第一法時(shí)不使顏色一致，故改用第二法。

骨愈靈膠囊為口服制劑，經(jīng)人體胃液消化后僅少量重金屬為人體吸收，其他酸不溶性重金屬一般難以被人體吸收，大部分被排出體外。故進(jìn)行總重金屬檢查意義不大，但酸可溶性重金屬會(huì)被人體吸收利用，檢查骨愈靈膠囊的酸可溶性重金屬較為必要，控制藥物中被機(jī)體吸收有害重金屬的限度。

采用化學(xué)顯色法對(duì)骨愈靈膠囊中酸可溶性重金屬進(jìn)行定量檢測(cè)，結(jié)果表明該方法重現(xiàn)性較好，操作簡單易行，可有效控制骨愈靈膠囊的質(zhì)量，酸可溶性重金屬限度可定為百萬分之三十。

[1] 中華人民共和國藥典委員會(huì).中國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄58.

[2] 中國藥品生物制品檢定所,中國藥品檢驗(yàn)總所.中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:212-215.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2015-07-06

馬東衛(wèi)(1972-)，男，陜西方舟制藥有限公司主管中藥師，研究方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

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