子宮內膜樣腺癌中PTEN、MDM2表達及臨床意義①

徐麗超,吳英杰

(佳木斯大學附屬第一醫院,黑龍江 佳木斯 154003)

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子宮內膜樣腺癌中PTEN、MDM2表達及臨床意義①

徐麗超,吳英杰

(佳木斯大學附屬第一醫院,黑龍江 佳木斯 154003)

目的：研究和探索子宮內膜樣腺癌中PTENMDM2表達及臨床意義。方法：以佳木斯大學附屬第一醫院2009-11～2014-11存檔病例中121例子宮內膜標本為研究對象，根據病變情況分為正常組、異位組、癌變組，采用SP免疫組織化學技術檢測正常內膜、異位內膜、癌變內膜組織中的PTEN、MDM2進行檢測、比較、分析。結果:PTEN在正常內膜、異位內膜、癌變內膜組織中MOD值分別為0.151 ±0.012；0.032±0.011；0.011±0.007。MDM2在正常組、異位組、癌變組中的陽性表達率為0.00%、42.29%、87.18%，組間差異具有統計學意義(P<0.05)。結論：子宮內膜樣腺癌MDM2表達明顯升高，PTEN的MOD值明顯降低，說明PTEN和MDM2異常表達在子宮內膜樣腺癌及子宮內膜異位中起重要作用，與宮內膜異位和子宮內膜樣腺癌發生發展存在關聯。

子宮內膜樣腺癌；PTEN；MDM2；表達

子宮內膜癌是較常見的婦科侵襲性腫瘤，子宮內膜樣腺癌也被稱為雌激素依賴性子宮內膜樣子宮內膜癌,是子宮內膜癌的最常見組織學亞型，約占子宮內膜癌的80%。近年來對子宮內膜樣腺癌標志物研究更加深入，并取得了多項突破進展[1]。本研究對正常子宮內膜、異位內膜、癌變內膜組織中PTEN、MDM2表達情況進行了檢測和分析，旨在探討子宮內膜樣腺癌癌變過程PTEN、MDM2的參與情況。現將相關情況報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

121例子宮內膜標本均為佳木斯大學附屬第一醫院2009-11～2014-11存檔病例。20例增殖期子宮內膜作為正常對照組，62例子宮內膜異位為異位組，39例子宮內膜樣腺癌病例。對照組年齡19～35歲，平均(30.3±5.5)歲；異位組年齡27～49歲，平均(31.5±7.4)歲；癌變組年齡31～62歲，平均(33.4±8.2)歲。各組年齡比較無統計學意義(P>0.05)。將病例標本用10%甲醛固定，并實施石蠟包埋，制作4μm厚連續切片。按實驗試劑盒說明實施免疫組化染色，并經病理醫師確診。本研究經院倫理委員會審核批準。

1.2 儀器設備

朝陽恒泰科技發展公司生產的組織芯片制備儀；上海萊卡儀器有限公司生產的切片機；北京天平廠生產的架盤藥物天平；上海躍進醫療器械廠生產的調溫培養箱；安徽電子科學研究所生產的切片漂烘溫控儀；日本Olympus公司生產的 光學顯微鏡；美國PixeLINK1394Camera圖像采集分析儀等。

1.3 實驗試劑

北京中杉生物技術有限公司提供鼠抗人MDM2 蛋白單克隆抗體；CellSignalingTechnologyCST公司提供PTEN兔抗人多克隆抗體；福州邁新生物技術開發有限公司提供SP免疫組化染色超敏試劑盒等。

1.4 結果判定

MDM2 蛋白陽性著色定位于細胞核和(或)胞質中, 呈黃色或棕黃色顆粒。在高倍鏡下隨機選取10個視野，計數 1000 個細胞，根據陽性細胞所占的百分比(0%=0；<10%=1；10%～50%=2；51%～80%=3；>80%=4)及染色強度(無色=0；淡黃色=1；棕黃色=2；棕褐色=3)綜合分析判斷結果，以兩者乘積>3 為陽性標準[2]。

PTEN采用imagepro-plus6.0專業圖像分析軟件對染色結果進行半定量分析,計算出每張切片蛋白表達的平均光密度值(meanopticaldensity,MOD),MOD=sum(IOD)/sura(area)。MOD值越高,蛋白表達越強。

1.5 統計學方法

采用SPSS軟件17.0處理，實驗數據以平均值±標準差表示，采用t檢驗；計數以率表示，采用χ2檢驗，P<0.05具有統計學意義。

2 結果

2.1PTEN表達情況

見表1。

表1 三組內膜中PTEN蛋白MOD值

PTEN在正常內膜、異位內膜、癌變內膜組織中MOD值分別為0.151 ±0.012；0.032±0.011；0.011±0.007。(正常組與異位組t=41.15，正常組與癌變組t=72.99，癌變組與異位組t=11.87)組間差異具有統計學意義(P<0.05)。

2.2MDM2陽性情況

見表2。

表2 三組內膜中MDM2陽性情況

MDM2在正常組、異位組、癌變組中的表達率為0.00%、42.29%、87.18%，(正常組與異位組χ2=12.99，正常組與癌變組χ2=41.15，癌變組與異位組χ2=19.05)組間差異具有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

PTEN定位于染色體l0q23.3,具有9個外顯子和8個內含子,mRNA總長為5.5kb,cDNA序列內含有1209個核苷酸組成的開放閱讀框(ORF),編碼一個由403個氨基酸組成的蛋白質,分子量約為47Kd,具有脂質磷酸酶和蛋白酸酶雙重活性[3]。PTEN蛋白基因主要是通過磷酸酶的活性使3,4,5-三 酸磷脂酰肌醇(PIP3)脫磷酸,降低細胞內PIP3的水平,從而影響PIP3信號傳導途徑中的一系列激酶,負性調節PI3K/Akt信號傳導途徑,使細胞G1期阻滯及促使細胞凋亡,達到阻止細胞生長和促進細胞洞亡的目的。PTEN蛋白表達降低或缺失與人類許多惡性腫瘤有關,并與組織學類型、病理分級、臨床分期及淋巴轉移有關[4]，有研究表明，第10號染色體同源缺失性酸酶_張力蛋白基因(PTEN)在子宮內膜癌中突變率最高,通過抑制細胞有絲分裂,從而誘導細胞凋亡,通過參與調節細胞的分化、黏附和轉移等而發揮抑癌作用[5]。PTEN基因通過抑制細胞有絲分裂誘導細胞調亡,參與調節細胞的黏附、轉移和分化等各個方面發揮抑癌基因的作用。本研究結果顯示，正常內膜PTEN遠高于異位內膜和癌變內膜PTEN，組間差異具有統計學意義，說明PTEN與子宮內膜癌呈負向相關。

MDM2作為癌基因，可以增強細胞的生存活力，促進細胞增生和腫瘤生長[6]。MDM2基因常與同樣定位于12q14、3—15的具有調節細胞生長功能的基因(如CHOP、GCI、CDK4、SAS)構成同一擴增子，通過刺激S期轉錄因子E2F1/DPI調節細胞周期[7]。MDM2蛋白可與野生型p53結合，導致p53 抑癌功能喪失，從而參與腫瘤的發生、發展。本研究結果中，MDM2在正常組、異位組、癌變組中的陽性表達率為0.00%、42.29%、87.18%，組間差異具有統計學意義(P<0.05)，說明MDM2與子宮內膜癌呈正向相關。子宮內膜樣腺癌MDM2表達明細升高，PTEN的MOD值明顯降低，說明PTEN和MDM2異常表達在子宮內膜樣腺癌及子宮內膜異位中起重要作用，與宮內膜異位和子宮內膜樣腺癌發生發展存在關聯。

[1]惠培.子宮內膜癌的二元發病模式及其臨床病理意義[J]中華病理學雜志,2006,35(12):705-707

[2]黃受方.刮宮標本中高分化子宮內膜癌的診斷[J].中華病理學雜志,2006,35(12):708-710

[3]SarmadiS,Izadi-MoodN,SotoudehK,etal.AlteredPTENexpression:adiagnosticmarkerfordifferentiatingnormal,hyperplasticandneoplasticendometrium[J].DiagnosticPathol, 2009, 4(1):41

[4]HamadaK,SasakiT,KoniPA,etal.ThePTEN/PI3Kpathwaygovernsnormalvasculardevelopmentandtumorangiogenesis[J].GenesDev,2005,19(17):2054

[5]RisingerJT,HayseK,MaxwellGL,etal.PTENmutationinendometrialcancerisassociatedwithfavorableclinicalandpathologiccharacteristics[J].ClincancerRes,1998，4(12):3005

[6]MomandJ，WuHH，DasguptaG.MDM2-masterregulatorofthep53tumorsuppressorprorion[J].Gene， 2000，242：15-19

[7]Martink，TrouheD，HagemelerC，etal.StimulationofE2F1/DFltranscriptionalactivitybyMDM2oncoprotein[J].Nature，1995，373(11)：691

徐麗超 (1985～)女,黑龍江佳木斯人,在讀碩士研究生。

吳英杰(1964～)女,黑龍江佳木斯人,學士,主任醫師,碩士研究生導師。E-mail:jjj.jjn@163.com。

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