迪瑞尿沉渣流水線用于尿液有形成分鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn)的研究

吳 鵬，謝世英，黃 茜，安 思

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 430060)

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·論 著·

迪瑞尿沉渣流水線用于尿液有形成分鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn)的研究

吳 鵬，謝世英，黃 茜，安 思

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 430060)

目的 制訂迪瑞尿沉渣流水線檢測(cè)尿液的鏡檢篩選規(guī)則，并驗(yàn)證該規(guī)則在臨床中的應(yīng)用。方法 采用流水線對(duì)1 161份收集于武漢大學(xué)人民醫(yī)院的尿液標(biāo)本進(jìn)行尿常規(guī)檢測(cè)，同時(shí)由2名主管檢驗(yàn)師對(duì)上述標(biāo)本進(jìn)行手工計(jì)數(shù)。根據(jù)流水線檢測(cè)結(jié)果與鏡檢結(jié)果制訂復(fù)檢規(guī)則并對(duì)265份臨床尿液標(biāo)本進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 本研究根據(jù)檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析共篩選出39條需要復(fù)檢的規(guī)則和25條無需復(fù)檢的規(guī)則。以鏡檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，真陽性率為49.96%(580/1 161)，假陽性率為9.04%(105/1 161)，真陰性率為39.71%(461/1 161)，假陰性率(漏診率)為1.55%(18/1 161)，復(fù)檢率為16.19%(188/1 161)。根據(jù)制訂的復(fù)檢規(guī)則對(duì)臨床標(biāo)本驗(yàn)證結(jié)果為：真陽性率66.42%(176/265)，假陽性率4.15%(11/265)，真陰性率28.68%(76/265)，假陰性率0.75%(2/265)，復(fù)檢率16.86%(43/265)。結(jié)論 針對(duì)迪瑞尿沉渣流水線制訂的復(fù)檢規(guī)則能夠有效篩選出真正需要鏡檢確認(rèn)的復(fù)檢標(biāo)本，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同儀器制訂不同的篩選標(biāo)準(zhǔn)。

尿沉渣分析； 復(fù)檢規(guī)則； 漏診率； 復(fù)檢率

自動(dòng)化尿液流水線已在臨床廣泛應(yīng)用，提高了檢測(cè)效率，但是由于尿液自動(dòng)化尿液分析儀仍存在方法學(xué)的局限性，顯微鏡鏡檢是必不可少的。如何在自動(dòng)化設(shè)備的使用和人工鏡檢中找到最佳的結(jié)合點(diǎn)，使儀器發(fā)揮最大效率又不漏診、誤診，臨床標(biāo)本就成了近年來的研究熱點(diǎn)。現(xiàn)階段復(fù)檢篩選標(biāo)準(zhǔn)以流式細(xì)胞和熒光核酸染色技術(shù)為原理的希森美康UF系列尿沉渣分析儀研究較多[1-2]。而另一類以尿液有形成分圖像自動(dòng)識(shí)別技術(shù)的儀器少有報(bào)道，本研究使用迪瑞FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀和H-800干化學(xué)分析儀組成的尿液流水線為該類儀器建立其篩選規(guī)則。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集2014年5～8月武漢大學(xué)人民醫(yī)院門診和住院患者的尿液常規(guī)標(biāo)本共1 161份，其中男462份，女699份，平均年齡45歲。尿液留取標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版[3]，所采集標(biāo)本要在2 h內(nèi)全部完成檢測(cè)。選擇2014年8月門診和住院患者尿液常規(guī)標(biāo)本265份，以驗(yàn)證所建立復(fù)檢規(guī)則的臨床有效性。

1.2 儀器與試劑 迪瑞尿沉渣流水線由長(zhǎng)春迪瑞公司生產(chǎn)的FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿干化學(xué)分析儀組成。FUS-200尿有形成分分析儀使用原裝配套試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品；H-800尿干化學(xué)分析儀使用原裝配套試紙條和配套質(zhì)控品，測(cè)試期間各儀器室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定，未出現(xiàn)失控現(xiàn)象。光學(xué)顯微鏡CX-22(日本Olympus公司)、白洋低速臺(tái)式離心機(jī)B600A。

1.3 方法

1.3.1 自動(dòng)化尿液常規(guī)檢測(cè) 每日隨機(jī)抽取50～70份中段尿液標(biāo)本，連續(xù)收集20 d，在FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿干化學(xué)分析儀進(jìn)行檢測(cè)，將原始檢測(cè)結(jié)果備份存檔。

1.3.2 尿沉渣顯微鏡鏡檢 每份標(biāo)本經(jīng)儀器檢測(cè)后，將標(biāo)本在2 000 r/min條件下離心，由選定的2名主管檢驗(yàn)師吸取沉淀采用雙盲法進(jìn)行鏡檢，對(duì)白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、管型(CAST)及其他有形成分進(jìn)行定量計(jì)數(shù)，計(jì)算2名檢驗(yàn)師檢測(cè)結(jié)果的均值作為鏡檢結(jié)果。鏡檢結(jié)果參考《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]。

1.3.3 自動(dòng)化尿液常規(guī)分析鏡檢篩選規(guī)則的建立 采用SPSS18.0對(duì)迪瑞尿沉渣流水線檢測(cè)RBC、WBC、CAST、隱血(BLD)、白細(xì)胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)共6個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的陰性、陽性兩種檢測(cè)結(jié)果作為篩選規(guī)則的篩選表達(dá)式。經(jīng)過對(duì)6項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行排列組合后得到64條篩選規(guī)則，1 161份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的64條篩選規(guī)則見表1。

1.3.4 復(fù)檢規(guī)則的制訂與評(píng)估 (1)利用交叉互檢原則建立復(fù)檢規(guī)則，當(dāng)FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)的RBC、WBC結(jié)果出現(xiàn)陽性與陰性差異作為需要鏡檢的規(guī)則。(2)由于H-800檢測(cè)的蛋白和FUS-200檢測(cè)的管型之間沒有必然的相關(guān)性，因此沒有對(duì)這2個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行交叉互檢，判斷是否需要鏡檢的基本原則是結(jié)合RBC與WBC結(jié)果綜合分析，并且管型為陽性蛋白陰性時(shí)設(shè)為鏡檢規(guī)則，如表1中的第18、20、24、34、36、40、41、42、44、48、49、50、52、56條，其原因是不能漏檢管型。(3)本研究出現(xiàn)概率為0的項(xiàng)目，雖然這幾種情況出現(xiàn)的概率極低，但是出現(xiàn)很有可能是檢測(cè)中存在干擾或分析誤差，所以把它們作為需要復(fù)檢的條件，表1中的第5、6、20、21、23、33、38、39、41、43、44、45、56條規(guī)則。(4) FUS-200的3項(xiàng)參數(shù)與H-800的3項(xiàng)參數(shù)的結(jié)果全部陽性時(shí)需要復(fù)檢，此時(shí)鏡檢需要確認(rèn)的主要是管型，如表1中的第55條規(guī)則。

表1 根據(jù)迪瑞尿沉渣流水線6個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的陰、陽性檢測(cè)結(jié)果制訂的64條鏡檢復(fù)檢規(guī)則及各規(guī)則標(biāo)本數(shù)

注：“+”為陽性；“-”為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件對(duì)2名主管檢驗(yàn)師所得鏡檢結(jié)果的一致性進(jìn)行評(píng)估，使用Kappa值為一致率的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)迪瑞尿沉渣流水線檢測(cè)項(xiàng)目的陰性、陽性結(jié)果確定復(fù)檢規(guī)則的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)及復(fù)檢率，并驗(yàn)證規(guī)則的假陰性率。

2 結(jié) 果

2.1 顯微鏡鏡檢結(jié)果 對(duì)2名檢驗(yàn)師檢測(cè)的RBC結(jié)果做Kappa檢驗(yàn)，Kappa值為0.952表明2名檢驗(yàn)師的鏡檢結(jié)果有較好的相關(guān)性。

2.2 復(fù)檢規(guī)則的建立與性能評(píng)估結(jié)果 見表2。通過對(duì)數(shù)據(jù)的分析和處理，此次研究設(shè)置了39條需要復(fù)檢的規(guī)則，25條無需復(fù)檢的規(guī)則。以鏡檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，真陽性率為49.96%(580/1 161),假陽性率為9.04%(105/1 161),真陰性率為39.71%(461/1 161),假陰性率為1.55%(18/1 161)，復(fù)檢率為16.19%(188/1 161)。

2.3 復(fù)檢規(guī)則的臨床驗(yàn)證 選取265份患者尿液標(biāo)本用于復(fù)檢規(guī)則的驗(yàn)證。以顯微鏡鏡檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，其驗(yàn)證結(jié)果真陽性率為66.42%(176/265)，假陽性率為4.15%(11/265)，真陰性率為28.68%(76/265)，假陰性率(漏診率)為0.75%(2/265)，復(fù)檢率為16.86%(43/265)。其假陰性率小于5.00%。

表2 迪瑞尿沉渣流水線自動(dòng)化尿液分析39條需要復(fù)檢的規(guī)則及各規(guī)則標(biāo)本數(shù)

注：“+”為陽性；“-”為陰性。

3 討 論

尿液常規(guī)檢查是臨床檢驗(yàn)技術(shù)中一項(xiàng)經(jīng)典的檢驗(yàn)項(xiàng)目，已有數(shù)百年的發(fā)展歷史。由于尿液標(biāo)本留取方便，使用全自動(dòng)尿沉渣分析儀和干化學(xué)分析儀組成的尿液流水線能夠快捷檢測(cè)尿液中的RBC、WBC、PRO和CAST等指標(biāo)，所以尿常規(guī)分析是目前診斷和監(jiān)測(cè)腎臟疾病及其相關(guān)疾病的常規(guī)檢測(cè)手段[4-5]。但是醫(yī)院每天尿液分析標(biāo)本數(shù)量大、干擾檢驗(yàn)環(huán)節(jié)多、耗時(shí)且重復(fù)性差導(dǎo)致難于標(biāo)準(zhǔn)化。因此許多實(shí)驗(yàn)室利用儀器及顯微鏡鏡檢的優(yōu)點(diǎn)，制訂相應(yīng)的鏡檢篩選規(guī)則，篩選去掉無需鏡檢的標(biāo)本，然后對(duì)異常標(biāo)本進(jìn)行規(guī)范化檢查，從而在盡可能不影響檢測(cè)質(zhì)量的同時(shí)減輕工作人員的工作量。現(xiàn)階段復(fù)檢篩選標(biāo)準(zhǔn)以流式細(xì)胞和熒光核酸染色技術(shù)為原理的希森美康UF系列尿沉渣分析儀研究較多[1]。對(duì)于以利用動(dòng)態(tài)攝像技術(shù)和計(jì)算機(jī)圖像軟件技術(shù)為主的設(shè)備則少有相關(guān)報(bào)道[6-7]。本文以迪瑞FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析為代表進(jìn)行該類儀器篩選規(guī)則的建立和驗(yàn)證。

本研究對(duì)尿干化學(xué)中的BLD、LEU、PRO和尿液有形成分中的RBC、WBC、CAST等6項(xiàng)進(jìn)行排列組合，得到64條規(guī)則，對(duì)1 161份標(biāo)本進(jìn)行分析，最終得出39條復(fù)檢規(guī)則及25條無需復(fù)檢規(guī)則。在39條復(fù)檢規(guī)則中，有188份標(biāo)本需要復(fù)檢，占總標(biāo)本數(shù)的16.19%，主要是BLD和RBC、PRO和CAST、LEU和WBC不相符。在25條無需復(fù)檢規(guī)則中包含標(biāo)本975份，其中與鏡檢完全相符的有936份，不完全相符的有39份(假陽性29份，假陰性10份)。本篩選規(guī)則的驗(yàn)證共選取了265份標(biāo)本，其驗(yàn)證結(jié)果真陽性率為66.42%(176/265)，假陽性率為4.15%(11/265)，真陰性率為28.68%(76/265)，假陰性率(漏診率)為0.75%(2/265)，復(fù)檢率為16.86%(43/265)。復(fù)檢規(guī)則驗(yàn)證假陰性只有2份標(biāo)本，可能是由于驗(yàn)證標(biāo)本數(shù)較少。

如表2所示，UF系列尿液分析儀復(fù)檢規(guī)則如馬駿龍等[1]制訂的篩選規(guī)則中的7、13、19、22、26、47、59、61與本次研究的5、16、24、29、33、36、42、49、52、53條不同，原因可能是由于篩選條件及儀器自身原理不同所致，其余大部分篩選規(guī)則相符，可見不同種類儀器的篩選規(guī)則較為相似。陳雨等[8]則根據(jù)尿液的不同檢測(cè)方法，設(shè)計(jì)了4種檢測(cè)方案，評(píng)估后找出最佳方案并建立復(fù)檢規(guī)則，是當(dāng)聯(lián)合使用干化學(xué)和尿流式兩種檢測(cè)系統(tǒng)檢出的BLD和RBC、PRO和CAST、LEU和WBC不相符時(shí)建立的復(fù)檢方案，共56條規(guī)則。此類篩選規(guī)則基本包括了此次研究所指定的所有篩選規(guī)則，雖然最大限度防止了漏診事件發(fā)生，但是相比本研究所篩選的規(guī)則建立的規(guī)則復(fù)檢率更低，能夠使臨床復(fù)檢的工作量更小，更易為臨床接受。

另外，F(xiàn)US-200類的儀器均可以直觀看到各類細(xì)胞的形態(tài)，儀器本身能夠提供修正模式，但是修正模式本身會(huì)增加工作量[9]。因此本研究檢驗(yàn)并未采取該模式，使用修正模式可能會(huì)減少相應(yīng)的篩選條款，因?yàn)橛袌?bào)道指出修正模式更接近鏡檢，所以此類儀器可以將篩選標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合修正模式進(jìn)一步細(xì)化[10]。本研究只適合于迪瑞FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿液干化學(xué)分析儀，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)使用儀器來制訂相應(yīng)的篩選規(guī)則。

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Study of the screening criteria for Dirui urinary sediment analyzer on the microscopic screening of the urine formed components

WUPeng,XIEShi-ying,HUANGQian,ANSi

(DepartmentofClinicalLaboratory,RenminHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,HuBei430060,China)

Objective To establish the proper review rules for microscopic screening of urine analysis by Dirui urine sediment analysis work station,and to verify the rules by clinical samples.Methods 1 161 random urine samples were selected from Renmin Hospital of Wuhan University and analyzed by urinalysis work station.Each sample was examined by two technologists using microscopy.Review rules were determined according to the results of urinalysis work station and microscopy.Furthermore,review rules were validated by 265 randomly selected urine samples.Results 39 rules for microscopic review and 25 rules for no further microscopic examination were set up by analysis of results.The true positive rate was 49.96%(580/1 161),the false positive was 9.04%(105/1 161),the true negative rate was 39.71%(461/1 161),the false negative rate (rate of missed diagnosis) was 1.55%(18/1 161),the review rate was 16.19%(188/1 161),when the microscopic examination result was taken as the judging criterion.Clinical urine samples were analyzed to validate these review rules and the true positive rate was 66.42%(176/265),the false positive was 4.15%(11/265),the true negative rate was 28.68%(76/265),the false negative rate was 0.75%(2/265),the review rate was 16.86% (43/265).Conclusion The reviews rules established in this study for Dirui urine sediment analysis work station can effectively detect abnormal urine samples and improve the efficiency and the quality of urinalysis in routine clinical practice,and the laboratory should establish different review standards according to the different instruments.

urine sediment; review rules; rate of missed diagnosis; review rate

吳鵬，男，碩士，主管技師，主要從事臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.24.019

A

1672-9455(2015)24-3660-03

2015-06-24

2015-08-20)