常規石蠟切片技術在高職醫學檢驗技術專業病理實驗教學改革中的應用

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常規石蠟切片技術在高職醫學檢驗技術專業病理實驗教學改革中的應用

李佩琴1，陳旭圣2，楊少芬1△

(1.廣州醫科大學衛生職業技術學院病理教研室，廣東廣州 510925；

2.南方醫科大學第五附屬醫院病理科，廣東廣州 510925)

病理學是醫學檢驗技術專業一門重要的基礎醫學課程，同時又是臨床診斷疾病和手術檢驗的重要內容。掌握常見疾病的病理檢驗技術對醫學檢驗技術專業的學生來說很重要，高職醫學檢驗技術專業十分重視技能操作，培養技能型人才[1]。病理學實驗課是病理學教學中必不可少的重要環節，長期以來病理學實驗教學未能滿足注重實際操作能力培養的需求，總是停留在傳統的大體標本肉眼觀察及HE染色切片顯微鏡下觀察，對病理學技術一無所知。常規石蠟切片技術是病理學、組織學實驗教學中最基本、使用最廣泛的技術方法之一，同時也是臨床手術必不可少的診斷方法。將常規石蠟切片技術應用于高職醫學檢驗技術專業的病理實驗教學中，使學生掌握切片的制作過程和切片質量好壞的判斷，從而讓學生明白在觀察切片時有很多假象并非病理現象。同時通過學生自己動手制作切片和閱片有利于調動學生的積極性、培養動手能力，并拓寬就業途徑，增強工作競爭力[2]。

1石蠟切片技術教學模式

1.1實驗目的通過石蠟切片技術實施在病理學實驗教學中，使學生能夠熟悉切片的制作過程，知道影響切片質量的因素，提高學生學習的積極性、培養動手能力，并拓寬就業途徑，增強工作競爭力。

1.2實驗儀器、材料和試劑實驗儀器包括萊卡輪轉切片機(德國)、烤箱、包埋機、水浴箱。試劑和材料有95%乙醇、75%乙醇、10%甲醛水溶液、二甲苯、無水乙醇、中性樹膠，石蠟(熔點56 ℃~58 ℃)，載玻片，蓋玻片、小白鼠正常腎組織標本。

1.3實驗過程常規石蠟切片包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟[3]。(1)教師講授石蠟切片制作詳細操作流程和原理；(2)放電教給學生觀看整個操作步驟及判斷切片質量的標準；(3)分小組到醫院病理科觀摩切片制作；(4)學生利用課后業余時間在實驗室自己動手操作制作一張切片并由老師現場進行指導，并作為平時成績計入期末總評成績。

1.4實驗步驟(1)取材：正常小鼠的腎組織，組織大小均約2.0 cm～0.3 cm厚塊。(2)固定：腎組織用10%福爾馬林固定。(3)脫水→透明→浸蠟與包埋(80%乙醇2 h、95%乙醇Ⅰ 2 h、95%乙醇Ⅱ 2 h、無水乙醇Ⅰ 30 min、無水乙醇Ⅱ 30 min、二甲苯透明30 min、石蠟Ⅰ 60 min、石蠟Ⅱ 60 min、石蠟Ⅲ 60 min、浸蠟溫度設置58 ℃，包埋石蠟與石蠟Ⅲ熔點相同。)(4)切片→貼片與烤片→切片脫蠟及水化。(5) HE染色(二甲苯Ⅰ 15min、二甲苯Ⅱ15 min、無水乙醇Ⅰ 2 min、無水乙醇Ⅱ 2 min、95%乙醇Ⅰ min、80%乙醇Ⅰ 1 min、自來水沖洗1 min、蒸餾水洗、蘇木素15 min、蒸餾水洗、1%鹽酸乙醇分化、自來水沖洗、1%稀氨水返藍、自來水流水沖洗、蒸餾水洗、0．5%伊紅2 min、自來水沖洗80%乙醇20 s、95%乙醇30 s、無水乙醇Ⅰ 1 min、無水乙醇Ⅱ 1 min、二甲苯Ⅰ 5 min、二甲苯Ⅱ 3 min，中性樹膠封片。

2結果

實驗開展順利，取得預想的成績。通過老師講授，觀看電教，醫院病理科觀摩，學生自己動手操作，大部分學生可獨立完成石蠟切片制作。通過制片和閱片大大的提高了學生對病理學實驗課的學習興趣，該技術具有操作簡便、實用性強的特點，該技術的理論和實際操作內容應該拓展到臨床專業實驗教學中。

3討論

病理學實驗教學多屬驗證性實驗，通常都是以教師為主導地位的填鴨式教學，傳統的實驗教學學生只是在顯微鏡下觀察經HE染色好的組織切片和肉眼觀察制作好的大體標本為主要內容，學生感到枯燥乏味，尤其對于高職醫學檢驗技術專業學生而言，傳統的教學模式并沒有體現出高職實驗教學注重實際操作能力的培養和崗位需求的特點。如何體現醫學檢驗技術專業的人才培養特點，是目前檢驗醫學教育值得研究的問題[4]。

傳統的病理實驗教學方法僅限于理論課的基本病變的觀察，忽略了病理學技術。病理學技術是組織學、病理學等學科用于觀察和研究組織與細胞的正常形態及病理變化的常用方法[5]。石蠟切片技術是病理學技術中最常用，最基本的技術之一，實驗教學切片絕大多都是石蠟切片和HE染色的。將石蠟切片制作技術拓展到高職醫學檢驗技術專業的病理學實驗中，極大調動了學生學習的興趣，學生可以親自動手制作組織制片和HE染色技術，在整個動手實驗過程中，可以利用所學的知識自己發現問題解決問題，讓學生懂得判斷切片質量的好差，加強了學生對病理組織制片假象造成臨床診斷的影響，讓學生認識到石蠟切片制作在實驗教學、臨床診斷的重要性，同時也能使學生認識到組織切片來之不易，學生會更加懂得珍惜切片。從而鍛煉了學生的動手能力和臨床思維分析能力，增強了學生參與意識及團隊合作精神，從而逐步培養學生創造的能力[6]。這對提高病理學實驗教學的質量起到了很好的推動作用。

病理技術工作非常強調動手能力，目前沒有高職院校在開設該專業，畢業后醫學檢驗技術專業的學生主要從事的是技術性工作。醫學檢驗技術專業人才將成為從事病理技術工作的最強有力的競爭者，學生在學校就接觸到病理技術相關知識及技能，有利于擴大該專業的就業途徑及工作競爭力。

綜上所述，在醫學檢驗技術專業病理實驗中開展常規石蠟切片制作實驗受到學生一致認可，具有可行性和必要性。高職教育是一種職業特征鮮明的高層次職業技術教育類型，在病理實驗教學中，要注重培養實際操作技能，才能真正體現高職醫學檢驗技術病理實驗教學的特色[7]。

參考文獻

[1]李志紅，崔茂香，李雪．高職高專醫學檢驗技術專業病理實驗教學改革的探討[J]．價值工程，2012，31，10(7)：190．

[2]資源，趙文健，謝明．重視快速切片技術在醫學檢驗本科病理實驗教學改革中的作用[J]．當代醫學，2013，9(28)：163-164．

[3]張中海．病理切片制作過程中常見問題及原因探析[J]．吉林醫學，2011，32(27)：5761．

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[5]王爽，趙亮，周軍，等．改革病理學教學方法的實踐與思考[J]．山西醫科大學學報:基礎醫學教育版，2010，12(10)：965-967．

[6]董學易，孫保存，趙秀蘭，等．常規組織制片技術在病理學實驗教學中的應用[J]．基礎醫學教育，2013，15(7)：685-686．

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新興獨立風險因子 提高心血管疾病風險評估水平

日前，在南京舉行的中華醫學會第十一次全國檢驗醫學學術會議上，中國人民解放軍總醫院盛莉副教授分享了心血管病(CVD)風險評估現狀，并深入探討動脈粥樣硬化性心血管疾病(ASCVD)風險評估檢測進程，進一步闡釋了新興獨立風險因子脂蛋白(a)[Lp(a)]、同型半胱氨酸(Hcy)和高敏C-反應蛋白(hs-CRP)的臨床應用價值。

血漿Lp(a)水平升高是冠心病的獨立危險因素，研究表明，Lp(a)是除心肌梗死(MI)病史外的最強急性冠脈綜合征(ACS)預示因子，也是非-ST段升高ACS患者預后的重要指標之一。由于 Lp(a)結構復雜性、不同臨床研究、試劑檢測結果差異較大、不同標準化水平等因素影響，Lp(a)還未被廣泛認為是冠心病獨立風險因素，亟需建立正確試驗。

因缺少成熟商業化試劑供應，近十年來Lp(a)臨床應用研究受到限制。羅氏診斷Tina-quant Lp(a) 二代試劑率先遵循EAS指南、采用nmol/L標準化單位，可溯源至IFCC/WHO SRM2B及參考ELISA方法，采用乳膠增強免疫比濁法，可得出不受apo(a)多態性影響的準確檢測結果。

作為冠心病的獨立危險因子，當HCY上升時，冠心病及MI發病率明顯升高。HCY在診斷缺血性腦卒中有較高應用價值。研究顯示，HCY升高與糖尿病聯合，將導致死亡危險性呈指數上升，高HCY與高血壓聯合可導致H型高血壓患者心血管風險大幅增高。美國谷物化學家協會(AACC)明確建議了三類需檢測HCY的臨床情況。羅氏診斷同型半胱氨酸(HCY)檢測針對孕婦、兒童、成人、老人進行人群分組，并針對不同人群建立總HCY參考值，特異性高，檢測結果更為科學準確。

高敏CRP(hsCRP)可很好檢測出0.1~10 mg/L低濃度的CRP變化，且該濃度CRP與新生兒感染、CVD發生關系密切。根據美國FDA關于CRP/hsCRP試劑評價標準指南，hsCRP可用作個體CVD風險判定及分層，當與傳統ACS實驗室指標聯合應用時，可用作CVD復發事件的獨立預示因子。羅氏診斷C-反應蛋白(hsCRP)檢測，采用專利DuREL?技術，分析靈敏度高，檢測范圍寬，CV值不超過10%，利用標準化CRM470參考材料，符合FDA指導文件和AHA/ACC心血管疾病風險評估指南中對hsCRP檢測定義的性能要求和使用建議。

·醫學檢驗教育·

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收稿日期：(2015-07-08)

文獻標識碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.071B

文章編號：1673-4130(2015)24-3656-02