TLR4及Hs-CRP對早產亞臨床絨毛膜羊膜炎的診斷價值

光瑾 謝穗

TLR4及Hs-CRP對早產亞臨床絨毛膜羊膜炎的診斷價值

光瑾 謝穗

目的：檢測Hs-CRP及TLR4在早產亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦外周血、臍血血清中的表達，探討兩者與早產亞臨床絨毛膜羊膜炎的關系，評價其預測早產亞臨床絨毛膜羊膜炎的可行性。方法：應用流式細胞術檢測孕婦外周血、臍血血清中的CDl4+單核細胞上TLR4分子的表達率和平均熒光強度；用膠乳增強免疫比濁法檢測外周血及分娩后臍血Hs-CRP含量。結果：早產亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦外周血清及臍血中CDl4+單核細胞上TLR4分子的表達率和平均熒光強度及Hs-CRP水平明顯高于對照組和早產非感染組,差異均有顯著性。亞臨床感染組孕婦外周血清及臍血TLR4的MFI與Hs-CRP成正相關。結論：TLR4聯合Hs-CRP可作為早期預測感染性早產的指標。

亞臨床絨毛膜羊膜炎 TOLL受體4 高敏C反應蛋白

早產是引起圍產兒發生率和死亡率升高的最主要原因。若能早期預測早產的發生，對盡早采用干預措施，預防早產，改善母嬰預后有重要意義。本實驗對早產亞臨床型急性絨毛膜羊膜炎孕婦外周血及臍血CDl4+單核細胞上TLR4分子的表達率和平均熒光強度以及Hs-CRP進行了研究分析。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2012年1月～2013年12月住院分娩的單胎孕婦共152例，按胎盤胎膜組織病理學檢查結果,分為早產亞臨床感染組(54例),早產無感染組(38例)。早產組平均（27.3±3.4）歲，平均孕周（33.6±1.88）周。無其它產科并發癥及合并癥。同時收集孕足月分娩者(60例)作為正常對照組。對照組平均（26.7±2.3）歲，平均孕周（38.8±1.29）周。對3組進行檢測:①采用流式細胞術檢測早產臨產孕婦和正常對照組孕婦外周血和產后臍血中CDl4+單核細胞上TLR4分子的表達率和平均熒光強度；②采用膠乳增強免疫比濁法,測定早產臨產孕婦和正常對照組孕婦外周血清及臍血中Hs-CRP水平。

1.2 診斷標準 早產的診斷依照《婦產科學》(第八版)診斷標準確診。組織學絨毛膜羊膜炎的診斷標準[1]:每高倍視野有5～10個中性粒細胞浸潤即為炎癥。臨床絨毛膜羊膜炎[2]:臨床癥狀:①產前或產時每隔4h體溫連續2次≥37.5℃(腋溫),排除其他感染存在;②母體心率相隔4h連續2次＞100次/min,排除有心臟病史;③持續胎心率基線抬高 (＞160次/min)而無其他原因;④陰道分泌物膿性或味臭;⑤子宮壓痛。實驗室指標:①白細胞計數(WBC)＞12.5× 109/L,中性＞80%;②血沉(ESR)＞65mm/h;③胎盤、羊水或臍血細菌培養陽性;④胎膜或胎盤病理學檢查為炎性表現。以上出現其中任何兩項或以上者診斷為臨床絨毛膜羊膜炎,僅出現實驗室指標異常,診斷為亞臨床絨毛膜羊膜炎。

1.3 研究方法 取早產組和對照組孕婦外周靜脈血及產后臍血5ml兩管放入4℃冰箱保存，12h內采用流式細胞儀測定外周血以及產后臍血中單核細胞中TLR4+和CD14+細胞表達百分率和平均免疫強度。取早產組和對照組外周靜脈血及產后臍血5ml兩管立即經3000r/min離心10min，留取血清后用免疫透射比濁法測定Hs-CRP含量。

1.4 統計學方法 用SPSS17.0統計分析軟件包統計，數據以均值±標準差（±s）表示，使用方差分析的方法，統計P值，P＜0.05為差異有統計學意義。亞臨床感染組患者外周血單核細胞TLR4的MFI與Hs-CRP相關系數r計算采用Pearson分析。

2 結果

2.1 兩組孕婦分娩方式的比較 研究組陰道分娩58例（占63.04%）。對照組陰道分娩37例 (占61.67%)，兩組之間無顯著性差異（P＞0.05）。見表1。

表1 研究組與對照組分娩方式的比較

2.2 各組患者外周血、臍血Hs-CRP的水平比較早產亞臨床感染組入院時外周血Hs-CRP及產后臍血Hs-CRP明顯高于早產非感染組（P＜0.05)。而早產非感染組入院時外周血Hs-CRP及產后臍血Hs-CRP高于正常對照組（P＜0.05)。見表2。

表2 各組患者外周血、臍血Hs-CRP的水平比較(±s)

表2 各組患者外周血、臍血Hs-CRP的水平比較(±s)

組別 n早產亞臨床感染組 54早產非感染組 38正常對照組 60 P值入院時外周血Hs-CRP臍血Hs-CRP 5.02±2.30 10.24±1.52 3.84±2.25 8.97±2.11 2.67±1.52 8.15±1.74＜0.05 ＜0.05

2.3 各組患者外周血、臍血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比較 早產亞臨床感染組入院時外周血及產后臍血中TLR4+/CD14+（%）和MFI明顯高于早產非感染組（P＜0.05)。而早產非感染組入院時外周血及產后臍血中TLR4+/CD14+（%）和MFI高于正常對照組（P＜0.05)。早產亞臨床感染組患者外周血及臍血中單個核細胞TLR4的MFI與Hs-CRP均成正相關(r1=0.608，P＜0.01；r2=0.634，P＜0.01)。見表3。

表3 各組患者外周血、臍血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比較(±s)

表3 各組患者外周血、臍血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比較(±s)

正常對照組（n=60）外周血TLR4+/ CD14+（%） 43.25±12.07 36.41±10.87 20.27±11.06外周血TLR4的MFI 46.90±12.04 39.03±11.6427.57±10.48臍血TLR4+/ CD14+（%） 45.14±12.34 35.07±11.36 24.59±10.27臍血TLR4的MFI 50.12±9.50 42.30±10.13 31.06±8.53組別 早產亞臨床感染組（n=54）早產非感染組（n=38）

3 討論

有文獻報道40%以上的早產與感染有關[3]。Edmondson N等[4]發現有很大比例的早產孕婦臨床上沒有特殊癥狀，但胎盤組織學檢查提示有急性絨毛膜羊膜炎的存在。而這種亞臨床型的急性絨毛膜羊膜炎又稱為組織學絨毛膜羊膜炎，在早產的發生上起了很大作用。早產最常見的致病因子是脂多糖,它是革蘭氏陰性細菌外膜的主要成分，TLR4是脂多糖跨膜信號的特異性受體,LPS以LPS-LBP-CD14復合物的形式活化TLR4信號的傳導，釋放大量炎性介質，放大炎癥反應導致早產。TLR4在感染性早產患者外周血單個核細胞中高表達，提示TLR4可能在感染性早產的發病機制中起重要作用[5]。本文顯示早產亞臨床絨毛膜羊膜炎的孕婦外周血和臍血中CDl4+單核細胞上TLR4分子的表達率和平均熒光強度明顯高于早產非感染組和對照組。

高敏C反應蛋白是炎癥反應中最敏感的指標。而超敏CRP能反映人體較低水平的炎癥狀態及變化。本組資料中早產亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦的Hs-CRP明顯高于早產非感染者。臍血Hs-CRP更能直接反映胎兒宮內是否有潛在感染。本研究中同組母血與臍血Hs-CRP無差異(P＞0.05)，故臨床上可以通過檢測孕婦的 Hs-CRP來預測胎兒的Hs-CRP，從而實行無損傷檢測。

同時本研究顯示外周血及臍血中單核細胞TLR4的MFI與Hs-CRP水平呈正相關。超敏CRP是一種較敏感的炎癥非特異性標志物，單靠一種指標來預測早產的特異性較低。早產并非一種原因引起，現在越來越提倡指標的聯合應用，以提高指標的預測價值，TLR4聯合超敏CRP檢測將為早產的預測和預防開辟一條新途徑。

1 陳忠年.婦產科病理學[M].上海:上海醫科大學出版社，1996：341.

2 王德智，石一復.中國婦產科專家經驗文集[M].沈陽：沈陽出版社，1994：78.

3 Lamont RF，Sawant SR．Infection in the prediction and antibiotics in the prevention of spontaneous preterm labour and preterm birth．Minerva Ginecol．2005，57(4)：423～433.

4 Edmondson N，Bocking A.The prevalence of chronic deciduitisin cases of preterm labour without clinical chorioamnionitis．Pediatr Dev Pathol,2009（1）：16～21.

5 董生鳳,羅艷,王豫黔.Toll樣受體4在感染性早產患者外周血單個核細胞的表達及意義[J].中國婦幼保健,2010(8)：1088～1091.

TLR4 and Hs-CRP value to the diagnosis of premature birth subclinical chorionic amniotic membrane inflammation

The Third People's Hospital of Hefei,Hefei 230022,Anhui
GUANG Jin,XIE Sui

Objective:This study measured the expression of Hs-CRP and Toll-like receptor 4 in peripheral blood,cord blood serum of subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor.To explore the relationship of Hs-CRP,Toll-like receptor 4 with subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor,evaluate the feasibility of TLR4 and Hs-CRP expression in subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor.Methods:To detect CD14+mononuclear cells on the expression of TLR4 molecular ratio and the average fluorescence intensity in peripheral blood,cord blood serum of premature pregnant and normal control group in application of flow cytometry;All pregnant women in the hospital to collect peripheral blood,with latex enhanced immune turbidimetric method to detect the contents of the Hs-CRP,to return umbilical cord blood to detect the contents of the Hs-CRP after giving birth.Results:CD14+of TLR4 molecules expression rate and mean fluorescence intensity(MFI)and the Hs-CRP levels in maternal serum and cord blood mononuclear cells of subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor are significantly higher than the control group and preterm infection group.TLR4 MFI correlates positively with the level of Hs-CRP of peripheral blood and cord blood serum in subclinically infected group.Conclusion:TLR4 and Hs-CRP can be used as a useful marker for detection of premature labor with early intrauterine infection．

Subclinical chorionic amniotic membrane inflammation;Toll-like receptor 4;High sensitive C-reactive protein

R714.21

A

1671－8054（2015）01-0056-02

/（編審：徐元宏 施仲賦）

合肥市第三人民醫院 安徽 230022

2014-11-07收稿，2014-12-26修回