肺炎患兒外周血超敏C反應蛋白、降鈣素原及T細胞免疫指標變化及意義

柯 務 陳廣湛 李月弟 許燚瀅

廣東省佛山市順德區倫教醫院急診科，廣東佛山 528000

肺炎支原體為臨床上引起小兒肺炎的重要病原，其好發于秋冬季節[1-2]。免疫學機制在肺炎支原體肺炎的發生、發展過程中起著重要作用。輔助性T細胞（monoclonal antibody to CD4,CD4+）、輔助性T細胞（monoclonal antibody to CD25,CD25+），可維持人體免疫反應平衡[3-4]。為提高臨床診斷及救治成功率，本研究探討了肺炎患兒外周血超敏C反應蛋白、降鈣素原及T細胞免疫指標變化及意義,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年8月～2014年8月我院進行治療的肺炎患兒95例，所有患兒皆符合小兒肺炎診斷標準[5]。其中男49例，女46例， 年齡2～7歲，平均（3.6±0.7）歲，平均病程（4.5±0.7）d。95例患兒中，包括細菌性肺炎（35例，均經痰或咽拭子細菌培養證實），支原體肺炎（32例，肺炎支原體IgM抗體均為陽性），病毒性肺炎（28例，血清病毒特異性IgM抗體均為陽性）。同時選取正常體檢兒童25例作為對照組。四組患兒一般情況比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 T淋巴細胞亞群的測定 采集入組患兒清晨空腹外周肘靜脈血2mL，分離、采取外周血單個核細胞，并用尼龍棉柱分離出T淋巴細胞，用Coulter公司的流式細胞儀檢測。

1.2.2 超敏c反應蛋白(C reactive protein，hs-CRP)檢測 hs-CRP檢測的相關試劑均來自于購自西門子醫學診斷產品有限公司。采用免疫散射比濁法。

1.2.3 無激素活性的降鈣素前肽物質（procalcitonin，PCT）檢測 采用酶聯熒光法檢測PCT，儀器配套試劑于mini-VIDAS分析儀上進行，PCT＞0.5μg/L則為陽性。

1.3 觀察指標

觀察各組外周血hs-CRP、PCT變化，并對各組外周血T淋巴細胞亞群和CD4+CD25+Treg水平進行比較。

1.4 統計學方法

統計軟件采用SPSS17.0，計量資料采用t檢驗或F檢驗，計數資料用x2檢驗，檢驗水準α=0.05，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組外周血hs-CRP比較

細菌性肺炎及支原體肺炎患兒的外周血hs-CRP水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。病毒性肺炎組患兒外周血hs-CRP水平與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 各組外周血PCT檢測結果比較

細菌性肺炎患兒的PCT水平及陽性數顯著高于其他三組，差異有統計學意義（P＜0.05）。支原體肺炎及病毒性肺炎患兒的PCT與對照組比較，差異無統計學意義。見表2。

表1 各組外周血hs-CRP比較（mg/L）

表2 各組外周血PCT檢測結果比較

2.3 各組外周血T淋巴細胞亞群和CD4+CD25+Treg水平比較

細菌性肺炎、支原體肺炎、病毒性肺炎的CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg與對照組比較，差異皆有統計學意義（P＜0.05）。細菌性肺炎組、支原體肺炎組的CD8+與對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

3 討論

表3 各組外周血T淋巴細胞亞群和CD4+CD25+Treg水平比較（±s）

表3 各組外周血T淋巴細胞亞群和CD4+CD25+Treg水平比較（±s）

注：與對照組比較，▲P＜0.05

組別 n CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD4+CD25+ Treg細菌性肺炎 35 28.56±5.11▲ 30.52±6.21▲ 0.97±0.16▲ 12.35±2.12▲支原體肺炎 32 29.62±5.31▲ 30.16±6.11▲ 1.11±0.20▲ 11.69±2.06▲病毒性肺炎 28 30.05±5.13▲ 27.59±6.03 1.15±0.21▲ 10.58±2.01▲對照組 25 36.92±5.72 26.83±5.57 1.60±0.27 7.65±1.75 FP 6.357＜0.05 8.014＜0.05 7.235＜0.05 4.351＜0.05

小兒肺炎臨床高發，發病時間北方為 冬、春季，南方則為夏、秋季[6-7]。其病因主要為呼吸道合胞病毒或肺炎支原體感染，患兒一旦發病，其正常的免疫平衡被打破，CD4+/CD8+的比值出現失衡狀態，將導致機體出現一系列免疫系統反應[8-9]。

研究顯示，在細菌感染時機體的hs-CRP水平顯著升高，而支原體、病毒感染時，hs-CRP水平表現為正常或輕度的升高[10-11]，其具有較高的特異性和敏感性，因此臨床把hs-CRP水平作為診斷、鑒別細菌感染的可靠指標。CD4+CD25+調節性T細胞可以分泌多種抑制性細胞因子，如IL-4、IL-10或TGF-β等，但其是否通過可溶性細胞因子發揮作用有多種不同的實驗結果[12-13]。實驗發現用IL-4、IL-10或TGF-B的中和抗體不能逆轉CD4+CD25+調節性T細胞抑制效應，來源于IL-4-或IL-10-/小鼠的CD4+CD25+調節性T細胞在體內仍然具有完全的免疫抑制作用[14-15]。

本研究中，細菌性肺炎及支原體肺炎患兒外周血hs-CRP水平明顯高于對照組（P＜0.05）。病毒性肺炎組患兒外周血hs-CRP水平與對照組比較，差異無統計學意義。細菌性肺炎患兒PCT水平及陽性數顯著高于其他三組（P＜0.05）。支原體肺炎及病毒性肺炎患兒PCT與對照組比較，差異無統計學意義。說明hs-CRP是一項非常敏感的炎癥標志物，但缺乏特異性，PCT水平可作為鑒別細菌性肺炎與支原體肺炎的指標。

本研究中，細菌性肺炎、支原體肺炎、病毒性肺炎CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg與對照組比較，差異皆有統計學意義（P＜0.05）。細菌性肺炎組、支原體肺炎組CD8+與對照組比較，差異皆有統計學意義（P＜0.05）。說明T細胞免疫抑制作用可以激活體內大量病原微生物的存活與復制，通過CD4+CD25+Treg細胞的活化作用而作用于效應T細胞來抑制機體免疫反應，以避免機體過度免疫應答所產生的病理損害，從而維持機體的慢性感染狀態。

[1] 胡亞美，江載芳，諸福棠.實用兒科學[M].第7版.北京：人民衛生出版社，2002：821-825.

[2] 劉清泉.CD4+CD25+調節性T細胞和感染免疫[J].醫學研究生報，2006，19（8）：741-743.

[3] Wu HY，Maron R，Tukpah AM，et al.Mucosal anti-CD3 monoclonal antibody attenuates collagen-induced arthritis that is associated with induction of LAP+ regulatory T cells and is enhanced by administration of an emulsomebased Th2-skewing adjuvant?[J].Immunol，2010，185（6）：3401-3407.

[4] 嚴敦煌.支氣管肺炎患兒治療前后血清SOD、CGRP和T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義[J].放射免疫學雜志，2006，19（6）：465-466.

[5] Venet F，Pachot A，Debard AL，et al.Human CD4+CD25+regulatory T lymphoeytes inhibit lipopolysaccharideinduced monocyte survival through a Fas/Fas ligand-dependent mechanism[J].J Immunol，2006，177（9）：6540-6547.

[6] 李超，袁寶軍.CD4+CD25+調節性T細胞在呼吸系統疾病中的作用[J].中國老年學雜志，2012，32（5）：1085-1088.

[7] Wan Q，Kozhaya L，Imberg K，et al.Probing the effector and suppressive functions of human T cell subsets using antigen-specific engineered T cell receptors[J].PLoS One，2013，8（2）：287-293.

[8] Braitch M，Harikrishnan S，Robins RA，et al.Glucocorticoids increase CD4+CD25+cell percentage and Foxp3 expression in patients with multiple sclerosis[J].Acta Neurol Scand，2009，119（25）：239-245.

[9] Nakagirit J，Inoue M，Motii E，et al.Local IL-17 production and a decrease in peripheral blood regulatory T cells in an animal model of bronchiolitis obliterans[J].Transplatation，2010，89（11）：1312-1319.

[10] 黃花榮，劉甜甜，魏菁，等.哮喘患兒外周血CD4+CD25+調節性T細胞的變化及其與過敏體質和IgE水平的關系[J].中華臨床醫師雜志（電子版），2009，3（3）：355-361.

[11] 張秀秀，曲書強.毛細支氣管炎發病中細胞因子作用的研究進展[J].國際免疫學雜志，2011，34（6）：365-367.

[12] 鞠云飛，孫立鋒，胡華，等.甲潑尼龍對哮喘患兒外周血 CD4+CD25+調節性T細胞影響的體外研究[J].中國臨床藥理學雜志，2011，27（11）：830-832.

[13] 郭智蘭.CD4+CD25high+CD127lowTreg細胞在細支氣管炎患兒外周血中的表達及意義[D].鄭州：鄭州大學，2013：23-25.

[14] 毛靜芳.RSV毛細支氣管炎患兒外周血CD4+CD25+調節性T細胞與Th17細胞功能變化及意義[J].中國醫藥指南，2012，10（17）：541-542.

[15] 鄭曉莉，薛麗華.肺炎患兒外周血超敏C反應蛋白、降鈣素原及細胞免疫指標變化及意義[J].臨床兒科雜志，2013，31（1）：22-25.