迷迭香活性提取物的藥理作用研究進展

周慧靈 梁婉嫻 徐道立 陳雨 王瑩 趙丕文

迷迭香Rosmarinus officinalis L．是一種唇形科灌木，原產于地中海沿岸，喜歡生長在干燥溫暖的沙質土壤中。迷迭香最早記載于《本草拾遺》，主要具有健胃、發汗、安神、止痛的功效;在歐洲，迷迭香一直被用于日常烹飪、香料提取，現在它也被用作提取抗氧化劑，具有很廣泛的用途。近年來的研究表明，迷迭香提取物及其抗氧化組分具有很強的抗癌活性。下面對迷迭香活性提取物及其組分的藥理作用進行闡述。

1 抗氧化作用

迷迭香抗氧化組分主要有鼠尾草酚(carnosol)，鼠尾草酸(carnosic acid)，迷迭香酚(rosmanol)，迷迭香酸(rosmarinic acid)等［1-2］，它們的結構如圖1。

上述幾種抗氧化組分按照抗氧化活性從高到低順序大致排列為鼠尾草酸、迷迭香酸、鼠尾草酚、迷迭香酚［3-4］。迷迭香酸的抗氧化機制有下列兩種:(1)通過競爭性結合脂質過氧基，終止脂質過氧化的連鎖反應;(2)抑制誘導型一氧化氮合酶(inducibleinitric oxide synthase，iNOS)的蛋白合成及一氧化氮生成。

利用D-半乳糖制造衰老小鼠模型，加入不同劑量迷迭香提取物給予治療，結果發現給藥組能顯著提高小鼠血清和心臟組織中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和過氧化氫酶(catalase from microorganisms，CAT)的活力，與此同時，給藥組丙二醛(malonic dialdehyde，MDA)含量明顯降低，以上結果說明迷迭香提取物可以通過提高抗氧化酶活性，提高D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化能力［5］。

圖1 迷迭香活性成分

迷迭香酸對經X射線照射后的永生化的人真皮微血管內皮細胞(human micrangium endothelial cells，HMEC-1)損傷具有明顯保護作用。實驗表明，用迷迭香酸預處理HMEC-1細胞1小時，可以減輕X射線誘導的增殖抑制和凋亡程度，同時，與不經迷迭香酸預處理相比，細胞內總抗氧化力、還原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比值水平下降程度減輕，也就是說迷迭香酸對X射線照射所致HMEC-1細胞氧化脅迫狀態有改善作用［6］。

在應用大鼠進行的研究中，迷迭香酸(rosmarinic acid)能降低自由基損傷后引起的肝線粒體的腫脹度，抑制肝線粒體膜流動性的降低;另外，迷迭香酸對丙二醛(malondialdehyde，MDA)生成的抑制作用和琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase，SDH)活性的促進作用均呈劑量-效應關系。這些結果都說明迷迭香酸能降低羥自由基對肝線粒體所致的氧化損傷，從而保護線粒體本身結構的完整性［7］。

2 抗癌作用

2．1 對肝癌細胞的抑制

迷迭香酸能夠誘導肝癌細胞HepG2的凋亡［8］，其抗癌作用具有多靶點、特異性選擇等特點，它的抗癌機理如下:(1)迷迭香酸可以通過對基因的調控實現抗癌作用，如對致癌基因表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)、血小板衍生生長因子受體(platelet-derived growth factor receptor，PDGFR)、抑癌基因 p53、人第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10，PTEN)、腺瘤樣結腸息肉易感基因(adenomatous polyposis coli，APC)等進行調控;(2)通過對細胞外信號調節激酶/絲裂原活化蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases/mitogen-activated protein kinase，ERK/MAPK)等調控，實現其抗癌作用;(3)迷迭香酸可通過影響I相代謝酶細胞色素P450(cytochrome P450，CYP450)、谷胱甘肽巰基轉移酶(glutathione S-transferase，GST)、醌還原酶(quinone reductase，QR)、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶等酶的活性來阻止致癌物在體內的代謝活化;(4)迷迭香酸還具有抗氧化、抗炎、抗血管形成等作用，在抑制肝癌的形成上起著非常重要的作用。

5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)在臨床上能夠有效地治療肝癌，但是它會對機體造成嚴重的毒副作用并缺乏靶向性。實驗表明［9-10］，多種藥物聯用能降低5-FU的毒性，迷迭香酸與5-FU同時使用，能夠增強5-FU對HepG2的作用，還可以減輕5-FU對人正常肝細胞的毒性［11］。

2．2 對乳腺癌細胞的抑制

有學者發現，迷迭香中的活性提取成分鼠尾草酚、鼠尾草酸、迷迭香酚都能不同程度地抑制乳腺癌細胞增殖［12-16］。其中，鼠尾草酚對癌細胞系的增殖抑制作用比它對正常細胞的增殖抑制作用強，也就是說，它的增殖抑制作用具有選擇性。結合以上三者的結構，發現它們與雌二醇的結構相似。前期研究發現，乳腺癌的發病與性激素雌二醇、雌激素受體有密切的關系［13-15］，所以上述成分極有可能在體內起了植物補體(phytoalexin)的作用，可以競爭性地與細胞膜上的雌激素受體結合，從而抑制乳腺癌細胞的增殖。迷迭香酸的結構與雌二醇的結構差別很大，所以它對性激素相關的乳腺癌細胞的增殖基本無抑制作用。

在鼠尾草酚對乳腺癌細胞T47D增殖活性的研究中，鼠尾草酚可使T47D細胞雌激素受體-α(estrogen receptor-α，ERα)和雌激素受體-β(estrogen receptor-β，ERβ)蛋白表達增加，并可明顯提高 ERα/ERβ比值，表明鼠尾草酚能抑制ER陽性乳腺癌細胞的增殖［16］。

3 抗菌、抗病毒作用

3．1 對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用

孫峋等［17］發現，迷迭香的活性提取成分中，迷迭香酸具有抗菌活性。大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的繁殖均會被迷迭香酸抑制，并且對金黃色葡萄球菌的抑制作用遠大于大腸桿菌。其作用機制是(1)抑制DNA聚合酶的活性，導致DNA復制受到影響，從而抑制細菌生長;(2)通過改變細菌細胞膜的通透性，使還原糖、蛋白質等發生滲漏，使細胞代謝受到影響。

3．2 對植物病源真菌的抑制作用

迷迭香精油對黑曲霉和繩狀青霉具有一定的抑制作用［18］，其機制與其中所含的大量醛類和醇類成分有關。另有研究表明，按1∶1∶1的比例，將苦參、厚樸、迷迭香提取液組成復配液，其對常見致腐酵母菌、灰霉菌、毛霉菌和青霉菌均有較好的抑制作用［19］。姚旭穎等［20］發現，迷迭香的乙醇提取物對水稻稻瘟病菌、番茄霜霉病菌、黃瓜枯萎病菌有較好的抑制作用，且濃度超過5 mg/mL時，抑菌率可以達到100%。

3．3 抗病毒作用

迷迭香酸能夠抑制人類免疫缺陷病毒、皰疹病毒、日本腦炎病毒的生長［21］。在不增強細胞毒性的情況下，硝基化后的迷迭香酸對HIV整合酶的抑制作用和抗病毒活性增加;迷迭香酸能夠抑制HIV-1逆轉錄酶活性。此外，迷迭香酸可以抑制皰疹病毒，降低小鼠腦內病毒載量及致炎細胞因子水平，使感染日本腦炎病毒小鼠的死亡率顯著降低。

4 對免疫系統的作用

4．1 抗炎作用

研究發現，迷迭香酸具有優于吲哚美辛的抗炎作用，在血小板衍生生長因子-BB(platelet-derived growth factor-BB，PDGF-BB)誘導的腎小球系膜細胞增殖過程中，迷迭香酸能抑制腎小球系膜細胞分泌轉化 生 長 因 子 β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)與單核細胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)，并能抑制腎小球系膜細胞合成纖維連結蛋白［22］。

4．2 對T細胞活化及增殖的作用

Won等［23］發現，迷迭香酸能在細胞膜上的T細胞受體附近的位點抑制相關細胞因子的激活，并能進一步通過抑制脾細胞增殖和一些細胞因子的表達從而達到抑制T細胞受體(T cell receptor，TCR)誘導的T細胞活化和增殖的效應，且該效應具有淋巴細胞特異性蛋白質酪氨酸激酶(p56 lymphocytespecific protein-tyrosine kinase，p56Lck)依賴性。

迷迭香酸對p56Lck的拮抗作用具有明顯的結構選擇性，實驗表明，對比天然提取物迷迭香酸，部分人工合成的迷迭香酸類似物與SH2域(src homology 2 domain，SH2)的結合作用以及對T細胞活性抑制作用更強［24］。

5 對心血管系統的作用

5．1 對心肌細胞缺氧復氧損傷的保護作用

迷迭香酸對大鼠乳鼠原代心肌細胞缺氧復氧損傷具有保護作用，體外培養實驗中，25、50、100 mg/L迷迭香酸能明顯地抑制缺氧復氧導致的細胞活力下降，乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)漏出及活性氧物質(reactive oxygen species，ROS)的過度產生，同時也能維持細胞內的ATP水平。并且，50、100 mg/L迷迭香酸能抑制缺氧復氧誘導的心肌細胞的凋亡，能下調細胞凋亡相關蛋白cleaved-caspase3表達，100 mg/L迷迭香酸能上調磷酸化蛋白激酶 B(phosphorylated protein kinase B，p-Akt)蛋白的表達，其作用機制可能是激活了Akt通路［25］。

5．2 抗血管形成作用

有研究發現，迷迭香酸抑制血管生成的作用很可能與迷迭香酸的抗氧化作用相關，可從迷迭香酸抑制活性氧簇相關的血管內皮因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表達、白介素-8(Interleukin-8，IL-8)釋放的實驗結果中得到證明。另有實驗表明，迷迭香酸可抑制視網膜新血管的形成，其抗增殖作用和引起G2/M期細胞的周期性停滯及促進p21WAF1的表達作用相關，而且其效應呈現劑量依賴性且對視網膜無毒副作用，因此，迷迭香酸有望成為治療血管增殖相關的視網膜疾病的新型藥物［26-27］。

6 對神經系統的作用

6．1 對帕金森病的治療作用

曲仂［28］研究發現迷迭香酸對帕金森病可能具有一定的治療作用，迷迭香酸能阻斷Fe2+處理后的人神經母細胞瘤細胞SK-N-SH線粒體跨膜電位差的降低，還能拮抗鐵誘導的alpha-突觸核蛋白的聚集，用迷迭香酸單獨處理SK-N-SH細胞，可以上調血紅素加氧酶1(heme oxygenase 1，HO-1)mRNA及蛋白水平，這些都能說明，迷迭香酸對帕金森病可能具有一定的治療作用。

6．2 對阿爾茨海默病的治療作用

近年來的研究表明，迷迭香酸可能對輕度至中度的阿爾茨海默病患者有一定的療效。在有β淀粉樣蛋白(β-amyloid protein，Aβ)的大鼠嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma，PC12)細胞培養皿中，24小時PC12細胞死亡，然而加入迷迭香酸后，細胞死亡的現象得到了緩解，迷迭香酸可能通過抑制Aβ蛋白誘導的脂質過氧化、caspase-3激活、DNA斷裂、tau蛋白過度磷酸化等機制，發揮上述作用［29］。

6．3 對血管性癡呆大鼠的影響

血管性癡呆是一種由于腦血管疾病導致的認知功能障礙臨床綜合征，利用雙側頸總動脈結扎(2-vessel occlusion，2-VO)法，制造血管性癡呆大鼠模型，在給大鼠吸嗅迷迭香提取物后，水迷宮實驗中，吸嗅組大鼠逃避潛伏期較短;空間探索實驗中，吸嗅組大鼠比模型組大鼠每分鐘穿越隱匿平臺位置次數多，探索次數也多于模型組。HE染色后，吸嗅組大鼠海馬神經細胞層次和排列較整齊、清晰，椎體細胞數量比模型組增多，說明吸嗅迷迭香提取物能夠對血管性癡呆有一定的治療作用［30］。

7 小結

迷迭香活性提取物具有抗氧化、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎、抗血栓、抗抑郁等作用，國內外學者對迷迭香活性提取物的研究不斷深入，對迷迭香的臨床應用具有重要的指導意義。但關于迷迭香活性提取物仍有一些問題有待進一步探究或證明，例如迷迭香活性提取物的抗癌作用機制等問題，相應的藥物也還有待開發，以發揮更大的社會和經濟效益。

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