生長抑素聯合抗生素用于急性膽囊炎家兔治療對血清TNF-α和CRP影響的實驗研究

喻霜

急性膽囊炎是臨床上常見的疾病之一，主要是由于膽囊管阻塞以及細菌侵襲而導致的疾病，在臨床上患者多表現為左上腹陣發性絞痛，給患者的健康造成極大地影響［1］。現對于該疾病的治療多選用解痙類藥物，雖然具有一定的臨床療效，但是不良反應較大，給患者的生活質量造成了不良影響，如何有效治療該疾病成為現在廣大醫務工作和科研人員研究的重要課題［2］，隨著生長抑素在炎性疾病方面的廣泛應用，我們在臨床上以此方法治療急性膽囊炎取得了滿意的治療效果，且無明顯不良反應。為了有效探討研究生長抑素對急性膽囊炎的臨床療效，我們以急性膽囊炎家兔生長抑素聯合抗生素治療及對血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和C-反應蛋白(CRP)影響為課題展開深入研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取實驗室培養的家兔60只為研究對象，其中雄性27只，雌性33只;體重1.9～3.4 kg，平均體重(2.34±0.25)kg，所有家兔經檢查身體狀況正常，無疾病發生，由中醫大學動物實驗中心提供［動物合格證號:SCYY(鄂)20020016］;JEM-I220型透射電鏡(日本電子公司);生長抑素針劑(0.1 mg/ml，瑞士諾華公司產品);TNF-α和CRP酶聯免疫試劑盒購自美國ADL公司;甲硝唑注射液(500 mg/100 ml)為江蘇華陽制藥有限公司產品;空白組精神萎靡，雙耳不能直立，皮毛不干凈，進食少，不愛活動，多伴有腹瀉，小便黃濁，消瘦明顯;實驗組活動靈敏，雙耳能直立，皮毛干凈，進食多，愛活動，無明顯消瘦;對照組介于兩者之間。3組家兔在性別比、體重、身體狀況方面，差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 創建動物模型:所有家兔進食24 h，注射戊巴比妥鈉進行麻醉，取仰位固定，備皮，在劍突下經腹部正中線切開大約3～4 cm的切口，打開腹腔，充分暴露膽總管，并將其分離，在膽總管外縱向放入1.2 mm的無菌塑料管，用線結扎，使得膽總管局部狹窄。充分暴露膽囊，注入一定濃度的大腸桿菌菌液，最后逐層結扎縫合傷口，觀察家兔的生命體征，查看有無死亡等情況的發生，選取符合實驗要求的家兔，創建動物模型成功。

1.2.2 分組治療:將60只家兔隨機分為實驗組、對照組、空白對照組，每組20只。在手術結束后2 d后，實驗組給予頭孢唑林鈉(10 mg/kg)，每天注射2次，以及甲硝唑(10 mg/kg)靜脈注射，2次/d，并在此基礎上給予生長抑素(20 μg/kg)皮下注射，2次/d。對照組僅給予頭孢唑林鈉(10 mg/kg)和甲硝唑(10 mg/kg)靜脈注射，2次/d。空白對照組則給予同劑量的0.9%氯化鈉溶液。

1.2.3 取血化驗:治療5 d后，對所有家兔進行抽血化驗，抽取下靜脈血15 ml，離心10 min后取出血清保存，分析化驗血清 TNF-α 和CRP的濃度［5］。

1.3 觀察指標 家兔身體狀況以及病理特征、血清TNF-α和CRP的濃度;各組家兔膽囊形態學觀察對比(形態、周圍有無滲液、血運情況、膽汁顏色)。

1.4 統計學分析 應用SPSS 15.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，計量資料以表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組家兔術后體征變化 術后5 d，3組家兔出現不同的臨床表現，觀察組家兔生命體征正常，皮毛干凈、活動靈敏、好動，進食正常，雙耳直立，無消瘦現象，少數家兔體重增加，狀態良好。空白對照組家兔生命體征總體較差，多數家兔精神萎靡不振，不愿活動，進食減少甚至不愿進食，反應遲鈍，雙耳無法直立，甚至出現腹瀉等狀況，對照組整體狀況一般，介于觀察組和空白對照組之間。

2.2 3組家兔血清TNF-α和CRP濃度變化 治療5 d后觀察組家兔血清CRP明顯低于對照組和空白對照組，而空白對照組有略高于對照組(P＜0.05)。觀察組家兔血清TNF-α的濃度明顯低于對照組和空白對照組(P＜0.05)，而對照組和空白對照組差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 3組家兔血清TNF-α和CRP濃度變化n=20，±s

表1 3組家兔血清TNF-α和CRP濃度變化n=20，±s

組別 TNF-α(pg/ml) CRP(mg/L)觀察組436±35 19.3±2.4對照組 847±53 64.7±4.8空白對照組785±67 84.7±5.6

2.3 3組家兔光鏡下膽囊組織病理學改變 400倍光鏡下，空白對照組家兔膽囊壁充血壞死，多呈灶性黏液性，并可見潰瘍形成，大量中性粒細胞浸潤，漿膜面可見纖維素性膿性滲出物。對照組可見膽囊黏膜層明顯水腫，未見潰瘍形成，部分中性粒細胞浸潤。觀察組可見膽囊黏膜上皮完整，輕度水腫，少量中性粒細胞浸潤，肌纖維走行整齊，漿膜面可見纖維素性滲出物。見圖1～3。

圖1 空白對照組家兔膽囊組織病理學改變(HE×400)

圖2 對照組家兔膽囊組織病理學改變(HE×400)

圖3 觀察組家兔膽囊組織病理學改變(HE×400)

3 討論

隨著現在生活節奏的加快，飲食結構以及方式的改變，現在急性膽囊炎的發病率逐年增加，在我國已經成為僅次于急性闌尾炎的急性腹部外科疾病［3］。患者多會表現出右上腹持續性陣發性疼痛，甚至可以向右肩部散痛，還會出現惡心、嘔吐、發熱等癥狀［4］，嚴重影響患者的生命健康，如何有效治療該疾病也受到了廣大患者和醫務人員的足夠重視。急性膽囊炎是臨床上常見的疾病之一，它主要是由于膽囊管阻塞以及細菌侵襲而導致的疾病［5］，在臨床上患者多表現為左上腹陣發性絞痛［6］。現在對于該疾病的治療多選用解痙類的藥物，雖然具有一定的臨床療效，但是不良反應較大，如何有效治療該疾病成為現在廣大醫務工作和科研人員研究的重要課題，隨著現在生長抑素在炎性疾病方面的廣泛應用，我們在臨床上以此方法治療急性膽囊炎取得了滿意的治療效果，且無明顯的不良反應。該疾病的發生主要是由于膽管阻塞和細菌感染，根據多年的臨床資料，我們發現急性膽囊炎的患者多伴有膽囊頸或者膽囊管結石，由于結石阻塞膽管，膽囊的正常排空活動受阻［7］，會導致膽汁的滯留，隨著膽囊內膽汁的長期滯留，刺激膽囊黏膜，就會引起炎性反應，形成急性膽囊炎［8］。對于細菌感染引起的急性膽囊炎多與大腸埃希桿菌有關，細菌一般經淋巴管或者腸道侵入膽囊，造成疾病的發生，所以在臨床治療上，我們多遵循解痙止痛，抗炎的治療思路，在選擇用藥方面也多選用阿托品類解痙藥，在臨床上具有一定的治療療效，但是此類藥物的毒副作用較大，會對腺體的分泌，腸道的蠕動以及心臟功能造成不良影響，尤其是對于患有心臟疾病以及中樞呼吸系統疾病的患者更是不宜使用，臨床的禁忌證較多，在治療中選擇性較小，難以滿足臨床治療的需求［9］。隨著現在醫療科技水平的提高、新型藥物的推廣，生長抑素以廣泛應用于炎性疾病的治療，我們將此類藥物運用到急性膽囊炎的治療過程中，為了有效驗證生長抑素對該疾病的治療效果，我們采用創建急性膽囊炎家兔模型的方式，測定生長抑素對家兔血清TNF-α和CRP濃度變化。

TNF-α是由活化的單核或者巨噬細胞產生的，具有殺傷或者抑制腫瘤細胞、抗感染的作用，可以促進細胞的分化增殖，參與自身疾病的損傷［10］。IL-6、TNF-α是由機體單核巨噬細胞系統產生的細胞因子，正常情況下含量甚微;當機體受炎癥、感染或創傷等因素刺激時，二者的合成、釋放明顯增多。IL-6、TNF-α的大量產生，必將伴隨CRP含量升高。故臨床上通過動態監測患者血清中三者含量變化，可早期評估疾病的嚴重程度，判斷患者術后是否并發感染等。在炎性疾病的早期會出現炎性反應，是測定炎性疾病的重要指標［11］。而CRP是由肝臟生成的血漿蛋白，具有很多種生物活性，例如宿主對感染的防御反應、對炎性反應的吞噬和調節，也是測定炎癥的重要指標。而急性膽囊炎作為一種急性炎性反應，在患者患病時血液中的TNF-α和CRP濃度會增高［12］，根據實驗數據顯示，治療5 d后觀察組家兔血清CRP的濃度明顯低于空白對照組和對照組，而空白對照組略高于對照組，觀察組家兔血清TNF-α的濃度為明顯低于對照組和空白對照組，而對照組和空白對照組差異不顯著，這充分說明生長抑素可以有效降低急性膽囊炎家兔血清TNF-α和CRP的濃度。我們通過對生長抑素作用機制的進一步研究，發現生長抑素對于消化道的腺體分泌具有很強的抑制作用［13］。可以舒張消化道平滑肌，抑制炎癥的發生。所以將生長抑素運用到急性膽囊炎的治療中，可以有效抑制膽汁的分泌，緩解膽管的痙攣［14］，降低膽道內的壓力，從而達到治療疾病、緩解病情的作用［15，16］，綜合實驗數據和生長抑素的作用機制，我們相信運用生長抑素治療急性膽囊炎可以有效降低血清中TNF-α和CRP的濃度，控制炎性介質的產生，有效治療該疾病。

綜上所述，生長抑素可以有效降低血清中TNF-α和CRP的濃度，而血清中TNF-α和C-反應蛋白的濃度是檢測炎性疾病的重要指標，所以生長抑素對于治療急性膽囊炎具有良好的治療效果，而且可以有效避免其它解痙類對人體造成的不良影響，運用此方法治療急性膽囊炎可以有效的提高疾病的治愈率，降低并發癥的發生，同時也有助于我們醫療服務水平和服務質量的提高，適于在臨床上推廣和普及。

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