雞減蛋綜合征的現場診斷、實驗室檢驗及防制

韓進輝

（吉林省蛟河市動物衛生監督所，吉林蛟河 132500）

雞減蛋綜合征的現場診斷、實驗室檢驗及防制

韓進輝

（吉林省蛟河市動物衛生監督所，吉林蛟河 132500）

雞減蛋綜合征是20世紀70年代后期發現的由減蛋綜合征病毒（EDSV）引起的世界性的商品蛋雞和母雞產蛋下降的病毒性疾病。其臨診特征為雞群產蛋突然下降，大量出現軟皮蛋和畸形蛋，蛋殼顏色變淺。該病在世界范圍內都有流行和發生，給養雞業帶來了巨大的經濟損失。

雞減蛋綜合征；實驗室檢驗；防制

1 現場診斷

（1）流行病學：各種年齡的雞對本病病毒都易感，但主要侵害26～32周齡雞，35周齡以上則較少發病，幼齡雞感染后不表現癥狀。鴨、鵝是自然宿主。病毒經受精卵垂直傳播是本病病毒的主要傳播方式。雞與雞之間接觸以及被病毒污染的飲水、飼料和器具，帶毒的鴨、鵝和某些野禽，也起到傳播的作用，但病毒水平傳播的速度較慢，且有時呈間斷性。雞感染本病的特征，當病毒侵入雞體后，在性成熟前，幼雞不表現致病性，在產蛋初期由于應激反應致使病毒活化而使產蛋雞發病。

（2）臨診癥狀：病初有色蛋殼的顏色消褪，隨后可能生薄殼、軟殼和無殼蛋。發病雞群產蛋量下降通常突然發生于產蛋高峰期前后，下降幅度可達20～50%，持續期為4～10周左右。

2 實驗室檢驗

雞產蛋下降綜合征檢疫常用的檢驗方去有病毒分離鑒定、血凝與血凝抑制試驗、血清中和試驗、瓊脂擴散試驗等。

（1）病毒分離鑒定：①樣品采集及處理。取減產母雞的輸卵管、子宮、卵巢，或咽喉部、泄殖腔棉拭子，或劣質蛋的蛋清等，冰凍保存。全測時將病料加2～5倍的pH7.2、0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，研磨制成懸液，凍融2～3次，以3000轉/min離心20min，取上清液，按500～2000單位（μg）/ml加入青、鏈霉素，37℃處理30min。泄殖腔拭子浸入含有青、鏈霉素沖液中充分擠壓后取出拭子，將溶液凍融2～3次，離心取上清液。蛋清則加入適量的含有青、鏈霉素的磷酸鹽緩沖液（以可暢通吸入注射器即可），37℃處理30min。

（2）病毒分離：取處理后的樣品上清液0.2ml，經絨毛尿囊腔接種10日齡左右的無減蛋綜合征抗體的健康鴨胚，每份病料接種4枚，培養48～120h，收取鴨胚（棄去48h以內死亡的鴨胚），無菌收集尿囊液，置-20℃保存，供盲傳或病毒鑒定用。

（3）病毒鑒定：采用血凝與血凝抑制試驗方法鑒定病毒。如果被檢尿囊液能凝集雞血細胞，且這種血凝活性又能夠被標準陽性血清抑制，則分離物含有本病病毒。

（2）血凝與血凝抑制試驗：本試驗用于病毒鑒定和血清抗體測定。

①器材準備：96孔U型微量板、微型振蕩器、50μl移液器。抗原、陽性和陰性標準血清由指定單位提供。1%雞紅細胞懸液：采集成年雞血，用20倍體積的生理鹽水洗滌3～4次，每次以2000轉/min離心3～4min，反復吸棄上層血漿及白細胞。最后一次離心5min，棄去上清液，加入生理鹽水制成1%的紅細胞懸液。②血凝試驗（抗原血凝效價測定）在血凝板上每孔加入50μl生理鹽水，取抗原或被檢物尿囊液（病毒鑒定）加入每排第一孔，每孔50μl，混合后取50μl加入第二孔，從左至右依次倍比稀釋至第十一孔，從第十一孔中吸50μl棄去，第十二孔為紅細胞對照。每孔加入1%雞紅細胞懸液50μl，置微量振蕩器震蕩1min，放置室溫下（18～20℃）作用30min，觀察血凝圖像。每排第十二孔紅細胞對照應不出現凝集現象。以紅細胞出現完全凝集的抗原最大稀釋度為該抗原的血凝價。測定抗原的血凝價時應并列做四排，取四排平均值確定。③血凝抑制試驗：A.計算出含4個血凝單位的抗原濃度：抗原稀釋倍數=血凝滴度（血凝價）/4。B.在微量板上每排第一孔加入生理鹽水50μl，第二孔加入濃度為8個血凝單位的抗原50μl；第三至十一孔加入濃度為4個血凝單位的抗原50μl。C.每排第一孔分別加被檢血清50μl，混勻后吸取50μl加入第二孔，依次倍比稀釋至第十一孔，混勻后棄去50μl。D.每孔加入1%紅細胞懸液50μl，振蕩后室溫靜置10min，然后進行結果判定。④結果判定：當被檢血清孔和紅細胞對照孔的紅細胞全部沉于孔底，陰性血清對照孔凝集紅細胞，抗原對照孔出現凝集現象，陽性血清對照孔抑制滴度≥1：16，抗原對照孔出現紅細胞凝集時，本試驗成立。以完全抑制紅細胞凝集的最大稀釋度，為該血清的血凝抑制抗體滴度。被檢血清抗體滴度≥1：16，判為陽性。

3 防制措施

本病是一種腺病毒，可經種蛋垂直傳播，用0.5%的福爾馬林處理即喪失感染性。控制本病的有效方法是疫苗接種。疫苗有雞減蛋綜合征油乳劑滅活苗、雞減蛋綜合征蜂膠苗等，一般于雞產蛋前2～4周注射，劑量按使用說明。治療可采用利巴韋林原粉飲水，1g加水10kg，連用3～5d。配合使用復方增蛋靈，每袋250g拌料80kg，連用7～10d。同時飼料中應添加適量的蛋白質和微量元素，提高雞群的抗病能力，可以防止其他感染發生。重癥酌情加量，預防劑量減半。

中藥治療：黃連、黃柏、黃芩、金銀花、大青葉、板蘭根、甘草各50g，黃藥子、白藥子各30g，混合加水5000ml，煎二次，合并后加白糖1000g，可供500只雞飲用。一日一劑，連用3～5d。注意，喂前要禁水、禁食半天，這樣可提高治療效果。

預防措施，應加強飼養管理及衛生管理等措施。加強種雞和產蛋雞的免疫，配合中草藥進行預防，對肉雞采用“全進全出的”的養殖方法，空舍后進行清理并徹底消毒，空置一段時間后再進雞。

[1] 胡青海，謝三星.雞減蛋綜合癥實驗室診斷技術研究進展[J].中國動物檢疫，1994，（4）：26-28.

韓進輝（1977—），男，大學，助理獸醫師，主要從事工作動物衛生監督工作。