腎移植患者FK506血藥濃度與肝功能檢測指標的相關性分析

李美珠，劉朝律，林裕玲，覃燕梅，何振輝

（1.佛山市第一人民醫(yī)院檢驗科，廣東 佛山 528000；2.佛山科學技術學院醫(yī)學院醫(yī)學檢驗系，廣東 佛山 528000；3.廣東醫(yī)學院生物化學與分子生物學研究所，廣東 湛江 524023）

腎移植患者FK506血藥濃度與肝功能檢測指標的相關性分析

李美珠1，劉朝律2，林裕玲2，覃燕梅3，何振輝2

（1.佛山市第一人民醫(yī)院檢驗科，廣東 佛山 528000；2.佛山科學技術學院醫(yī)學院醫(yī)學檢驗系，廣東 佛山 528000；3.廣東醫(yī)學院生物化學與分子生物學研究所，廣東 湛江 524023）

目的 探討腎移植患者血他克莫司(FK506)治療窗濃度與肝功能檢測指標的相關性。方法采用酶放大免疫測定法對85例腎移植患者進行FK506血藥濃度監(jiān)測，根據(jù)腎移植術后FK506血藥濃度分為高濃度組(10～20 ng/ml)40例和低濃度組(5～10 ng/ml)45例。同時檢測兩組患者的丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)和谷氨酰轉肽酶(GGT)水平。結果肝功能異常率按TBIL、AST、ALT、GGT順序分別為FK506高濃度組(5.0 ng/ml、2.5 ng/ml、15.0 ng/ml、25.0 ng/ml)、低濃度組(6.7 ng/ml、11.1 ng/ml、22.2 ng/ml、24.4 ng/ml），兩組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；兩組患者的FK506血藥濃度與AST、ALT、GGT、TBIL水平無相關性(rs＜0.3，P＞0.05)。結論腎移植術后患者肝功能檢測指標與FK506血藥濃度無相關。

腎移植；FK506；血藥濃度；肝功能

FK506通用名為他克莫司(Tacrolimus)，屬于鈣調神經磷酸酶抑制劑，臨床上主要用于肝、腎等器官移植術后的免疫抑制治療，藥效是環(huán)孢素A(CsA)的10～100倍。但FK506治療范圍狹窄，治療劑量和中毒劑量非常接近，而且其藥物代謝的個體差異很大[1-2]。因此，需要對FK506的血藥濃度進行監(jiān)測，以確保用藥的安全和有效。FK506治療主要的不良反應是引起腎損傷，也有文獻報道FK506可致肝臟損害、糖尿病、肺部感染等[3-4]。但FK506治療引起肝功能損傷的研究較少，F(xiàn)K506對肝功能的影響尚未有明確的結論。本文通過對85例腎移植患者定期進行FK506血藥濃度及肝功能檢測，分析在不同F(xiàn)K506血藥濃度水平時肝功能的變化，以探討FK506治療濃度與肝功能指標的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2012年7月至2014年4月在我院監(jiān)測FK506血藥濃度的85例腎移植患者為研究對象，其中男性59例，女性26例；年齡19～70歲，平均(44.3±12.0)歲，男女比例約2.3:1。根據(jù)腎移植術后FK506血藥濃度水平將患者分為高濃度組(10～20 ng/ml)40例和低濃度組(5～10 ng/ml)45例，標本均來自本院腎內科患者。

1.2 免疫抑制劑治療方案 腎移植患者術后采用FK506+MMF(霉芬酸酯)+強的松三聯(lián)免疫抑制方案，每一位患者所用強的松和霉酚酸酯的劑量基本相同。患者移植術后第3天開始服用FK506，起始劑量為0.1～0.15 mg/(kg·d)，早晚間隔12 h分兩次服用，以后根據(jù)FK506血藥濃度及患者臨床情況及時調整用藥劑量。血藥濃度監(jiān)測和肝功能，如丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)和谷氨酰轉肽酶(GGT)數(shù)據(jù)均來自移植術后一個月內。

1.3 采集樣本 患者用藥后12 h(次日清晨給藥前)，使用含有EDTA抗凝劑的一次性真空采血管采靜脈血2 ml，混勻后用于FK506血藥濃度檢測，所需的樣本為全血200 μl；同時用干燥管抽血3 ml，分離血清備用。

1.4 檢測方法 FK506濃度采用 DADE Vival-E藥物濃度分析儀測定，操作步驟嚴格按照FK506檢測試劑說明書進行；ALT、AST、TBIL、GGT各濃度采用西門子ADVIA2400全自動分析儀測定。我院成人正常參考范圍分別為血GGT 10～60 U/L，TBIL 5.1～21 μmol/L，ALT 9～50 U/L，AST 15～40 U/L，超出范圍上限視為異常，四項檢測指標，在標本送檢后1 h內出結果。

1.5 統(tǒng)計學方法 應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示，兩組之間均值比較采用獨立樣本t檢驗，率的比較采用χ2檢驗，采用Spearman等級相關分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能異常比較 FK506不同血藥濃度患者的肝功能異常發(fā)生率比較差別均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能異常比較[例（%）]

2.2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能指標比較 兩組患者的肝功能檢測指標比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能檢測指標比較(±s)

表2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能檢測指標比較(±s)

組別ALT(U/L)AST(U/L)GGT(U/L)TBIL(μmol/L)低濃度組(n=45)高濃度組(n=40)t檢驗P值39.34±22.57 30.77±22.48 1.75＞0.05 20.04±19.45 21.00±20.31 0.22＞0.05 49.27±46.53 54.58±32.00 0.61＞0.05 10.44±5.30 10.75±4.76 0.28＞0.05

2.3 FK506血藥濃度與肝功能指標的相關性 在FK506低濃度組中，F(xiàn)K506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL濃度的相關系數(shù)rs分別為-0.175 3、-0.040 2、-0.184 1、0.090 6，P值分別為 0.129 8、0.723 4、0.102 1、0.439 7；在FK506高濃度組中，F(xiàn)K506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL濃度的相關系數(shù)rs分別為-0.233 3、-0.186 0、-0.181 9、-0.215 8，P值分別為0.336 4、0.445 8、0.456 2、0.374 9。按α=0.05檢驗水準，可以認為兩組病例中FK506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL水平無相關性。

3 討論

本研究采用均相酶免疫法測定全血中FK506血藥濃度。樣本中FK506與試劑中標記有重組葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(rG6PDH)的FK506競爭性地與FK506的單克隆抗體結合(該抗體結合FK506后可抑制rG6PDH的活性)，活性的游離型的rG6PDH與氧化型煙酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)輔酶相偶聯(lián)而轉化為還原型酰胺嘌呤二核苷酸(NAD)，通過檢測NADH吸光度的動態(tài)變化而測出FK506濃度。根據(jù)文獻報道[5-6]，該方法的分析測量范圍為2.0～30.0 ng/ml，分析靈敏度為2.0 ng/ml，特異性強，精密度好，平均回收率為(98.0±8.8)%，該法與液相色譜-質譜聯(lián)用(LC-MC)法具有良好的相關性，是臨床上測定FK506較為準確的免疫學方法。

王意如等[7]報道國內FK506治療引起的肝功能異常率為8.41%。本研究結果顯示患者服用FK506后ALT、AST、GGT超過參考范圍的比率均高于10%，甚至達到25%，可能是本課題病例組部分患者在用藥前存在肝功能指標異常，也可能是本課題研究例數(shù)較少，各指標水平分布存在片面性，而導致本研究肝功能結果異常率的偏高；同時高低兩組之間異常率比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，說明FK506用藥濃度在5～20 ng/ml內對肝功能影響無差別。報道FK506引發(fā)的肝功能異常大多為暫時性的，停藥后患者的肝功能一般情況下會恢復正常。

有文獻[8]報道FK506治療后不同血藥濃度組ALT、TBIL比較差異有統(tǒng)計學意義。本研究結果顯示，F(xiàn)K506高、低血藥濃度組肝功能檢測指標(ALT、AST、GGT、TBIL)比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；另在FK506血藥濃度與肝功能指標的相關性分析中，結果顯示，兩組患者血清肝功能4項指標與FK506血藥濃度均無相關性；通過對兩組病例在手術前、后肝功能檢測各指標進行比較，發(fā)現(xiàn)結果差異無統(tǒng)計學意義。其中個別FK506濃度大于治療窗濃度的病例結果差異亦無統(tǒng)計學意義，表明FK506的治療濃度對肝臟的毒性較小，其可能原因為FK506的治療窗濃度遠小于引起肝毒性的閾濃度。另有文獻[9]報道，F(xiàn)K506在動物實驗中具有促進肝細胞和神經細胞再生的作用，其機制涉及抑制自然殺傷細胞的活性。總之，F(xiàn)K506的治療濃度窗對肝功能指標未引起改變。由于本研究收集病例存在局限性，F(xiàn)K506在臨床器官移植中的長期療效及對肝臟的毒副作用仍有待于進一步研究。

綜上所述，腎移植患者的FK506血藥濃度與肝功能檢測指標沒有相關性。

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Correlation analysis of FK506 blood concentration with liver function index in renal transplant recipients.

LI Mei-zhu1,LIU Chao-lv2,LIN Yu-ling2,TAN Yan-mei3,HE Zhen-hui2.1.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;2.Specialty of Medical Laboratory,Medical School of Foshan Science and Technology College,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;3.Research Institute of Biochemistry and Molecular Biology,Guangdong Medical School,Zhanjiang 524023,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between blood tacrolimus(FK506)therapeutic window concentration and liver function index in renal transplant recipients.MethodsThe FK506 concentration in blood of 85 renal transplant recipients were detected by the enzyme-multiplied immunoassay test(EMIT).According to the FK506 concentration after renal transplantation,the subjects were divided into high concentration(10～20 ng/ml)group(n=40)and low concentration(5～10 ng/ml)group(n=45).The alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase (AST),total bilirubin(TBIL)and glutamyltranspeptidase(GGT)in two groups were determined.ResultsFor abnormal liver function,the TBIL,AST,ALT and GGT was respectively 5.0 ng/ml,2.5 ng/ml,15.0 ng/ml and 25.0 ng/ml in high concentration group,and 6.7 ng/ml,11.1 ng/ml,22.2 ng/ml and 24.4 ng/ml in low concentration group.The difference between the two groups was not statistically significant(P＞0.05).There was no correlation between the FK506 concentration andALT,AST,GGT and TBIL levels in two groups(rs＜0.3，P＞0.05).ConclusionThe liver function indexes of patients after renal transplantation are not correlated to the blood concentration of FK506.

Renal transplantation;FK506;Blood concentration;Liver function

R699.2

A

1003—6350（2015）17—2549—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.17.0923

2014-12-27)

廣東省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(編號：201411847042)

何振輝。E-mail：hezhenhui@tom.com