蕎麥花葉黃酮對腸道平滑肌活動的影響

吳立國，韓淑英，石雪靜，張 英，石亞靜，錢 莊(.開灤醫療集團錢家營醫院，河北 唐山 06330； .河北聯合大學，河北 唐山 063000)

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蕎麥花葉黃酮對腸道平滑肌活動的影響

吳立國1，韓淑英2*，石雪靜2，張 英2，石亞靜2，錢 莊2
(1.開灤醫療集團錢家營醫院，河北 唐山 063301； 2.河北聯合大學，河北 唐山 063000)

目的：研究蕎麥花葉黃酮(FBFL)對腸道平滑肌活動的影響及其作用機制。方法：采用炭末推進法觀察不同劑量FBFL對正常大鼠腸道活動的影響。結果：FBFL能促進正常大鼠炭末推進率，但作用弱于硫酸鎂(P<0.01)，并能拮抗阿托品對腸蠕動的抑制作用，呈劑量依賴性(P<0.01)。結論：FBFL對腸平滑肌有興奮作用，其作用機制可能與激動M受體有關。

蕎麥花葉黃酮；腸道平滑肌；收縮；阿托品

1 資料與方法

1.1 一般資料

蓼科(Polygonacea)蕎麥屬(FagopyrumMill.)植物在全世界有15種，廣泛分布于亞洲和歐洲，我國有10個種1個變種，有2個種為栽培種[1]。常見的有蕎麥(FagopyrumesculentumMoench)、苦蕎麥(F.tataricum(L.) Gaertn.)和金蕎麥(F.dibotrys(D. Don) Hara)，目前對苦蕎麥、金蕎麥的研究較多，而蕎麥主要用作食品，對其研究較少。蕎麥中主要作為糧食應用的成分是蕎麥種子，結果造成大量的花葉被廢棄。蕎麥花葉黃酮(flavones of buckwheat flower and leaf，FBFL) 為其花葉中提取的黃酮類成分。近年來有研究表明FBFL具有降血糖[2]、降血脂[3]、抗氧化[4]等多種生物學作用，但其對腸道平滑肌活動的影響尚未見報道。本實驗旨在研究FBFL對腸道平滑肌活動的影響，并探求其作用機制。

1 材料

1.1 蕎麥花葉黃酮的制備

自然干燥的蕎麥花葉，粉碎，用去離子90℃加熱提取2次，合并濾液，濃縮， 加離劑( 酸性殼聚糖) 攪拌，趁熱過濾，濾液靜置沉淀，過濾得黃色沉淀物為總黃酮，用紫外分光光度法，以蘆丁為標準，測得黃色沉淀物中總黃酮含量為95%[5]。1.2 藥品與試劑

蕎麥花葉:采自內蒙古庫倫旗， 經河北聯合大學中醫學院鑒定確認。硫酸阿托品(Atropin)注射液(貴州光正制藥有限責任公司生產，批號100806)；硫酸鎂。墨汁的配制：準確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800mL，煮沸至溶液透明，稱取活性炭粉50g加入上述溶液中煮沸3次，待溶液涼后加水定容至1 000mL[6]。

1.3 實驗動物

正常健康大鼠，體重180～220g。雌雄兼有，合格證號 SCXK<津>2011-0002。

2 方法

2.1 FBFL對大鼠腸道蠕動的影響

2.1.1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響 取大鼠50只，隨機分為五組。各組大鼠禁食12h給藥：空白對照組，灌胃生理鹽水20mL/kg；陽性對照組，灌胃10%硫酸鎂20mL/kg(2g/kg)；FBFL低、中、高劑量組，分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg，容積為20mL/kg。給藥后30min，各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠)，0.4mL/只，30min 后脫頸椎處死大鼠，立即剖腹，分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”，再測量從胃幽門到回盲部的距離為小腸總長度，計算墨汁推進率。墨汁推進率(%)=墨汁推進長度(cm)/小腸總長度(cm)×100%。2.1.2 FBFL對阿托品致大鼠腸道蠕動抑制的影響 取大鼠50只，適應飼養1周后，禁食12h，隨機分為：正常對照組，灌胃生理鹽水20mL/kg；阿托品對照組，灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg)，10min后灌胃生理鹽水20mL/kg；FBFL低、中、高劑量組，灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg)，10min分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg，容積為20mL/kg。給FBFL后30min，各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠)，0.4mL/只，30min后脫頸椎處死大鼠，按“2.1.1”項下方法計算墨汁推進率。2.2 統計學方法

3 結果

3.1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響

由表1可見，與對照組比較，中、高劑量蕎麥花葉黃酮組均能顯著促進正常大鼠炭末推進率(P<0.01)，且對大鼠腸道蠕動的促進作用呈劑量依賴性，但低、中、高劑量組對大鼠腸道蠕動的促進作用均明顯弱于硫酸鎂組(P<0.01)。

表1 FBFL對正常大鼠腸道蠕動的影響

注：與對照組比較,**P<0.01；與硫酸鎂組比較,△△P<0.01。

3.2 FBFL對阿托品抑制大鼠腸道蠕動的影響

由表2可見，阿托品組對碳末推進率明顯低于對照組，并抑制腸蠕動(P<0.01)，不同劑量FBFL能拮抗阿托品對腸管蠕動的抑制作用，且呈劑量依賴性，FBFL中、高劑量組作用更明顯(P<0.01)。

表2 FBFL對阿托品抑制大鼠腸道蠕動的影響

注：與對照組比較,*P<0.05，**P<0.01；與阿托品組比較,△△P<0.01。

4 討論

蕎麥富含高生物價的蛋白質、維生素、礦物質元素等，最為重要的是含有極為豐富的生物活性成分黃酮類化合物，這是其他谷類糧食所不具有的，是黃酮類化合物的重要膳食來源[7-8]。蕎麥中的黃酮成分，不僅可以作為抗氧化劑和功能性食品的原料，而且具有降低毛細血管脆性、改善微循環的作用，在臨床上可用于糖尿病、高血壓等的輔助治療[9]。作為食品，蕎麥已經占有一席之地，但是作為藥品使用它還沒有引起足夠重視。在臨床應用中，最理想的藥物是高效低毒的藥品，食品作為日常生活中的必需品，較為安全，而具有藥用價值的食品是相對較為安全的藥品，藥物或多或少都具有一定的毒副作用，中藥相對于西藥，毒副作用相對較小。在治療疾病時，選用藥食同源且具有高效低毒作用的植物作為藥品是最佳選擇。蕎麥作為藥食同源的植物，具有低毒作用，但是目前還未實現高效利用，尚需用科學、先進、現代的研究手段來實現。蕎麥種子主要作為糧食應用，而大量的花葉被廢棄。研究發現，蕎麥花葉中含有豐富黃酮類成分，并具有抗氧化、降糖、降脂、免疫調節等作用[10-11]，但其對腸道平滑肌活動的影響尚未見報道。本實驗進行了FBFL對腸平滑肌收縮功能的影響研究，結果發現，FBFL的作用是興奮腸管平滑肌，顯示FBFL對大鼠腸道蠕動具有顯著的促進作用(P<0.01)，但弱于硫酸鎂(P<0.01)； FBFL能拮抗阿托品對大鼠腸管蠕動的抑制作用，并呈劑量依賴性(P<0.01)。

本實驗結果顯示，FBFL能促進正常大鼠炭末推進率，呈劑量依賴性(P<0.01)。但FBFL對正常大鼠腸道蠕動的促進作用明顯弱于硫酸鎂(P<0.01)，表明FBFL促進腸蠕動作用較緩和，引起腹瀉的可能性不大；進一步研究顯示，FBFL能拮抗阿托品對腸蠕動的抑制作用，阿托品為M膽堿受體拮抗劑，而FBFL能有效拮抗阿托品對大鼠腸道蠕動的抑制作用，表明FBFL對腸道平滑肌收縮的促進作用與激動M膽堿受體有關。但FBFL的作用機制是否與影響腸平滑肌的其他因素有關，需進一步研究；黃酮類成分很多，具體是哪一成分發揮作用，有待探索。

綜上所述，FBFL對大鼠腸道蠕動有促進作用，其興奮腸管的作用可能與激動M受體有關。

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(責任編輯：宋勇剛)

Effects of Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf on Intestinal Smooth Muscle Activities

Wu LiGuo1,Han ShuYing2*,Shi Xuejing2,Zhang Ying2,Shi YaJing2，Qian Zhuang2
(1.Qianjiaying Hospital of Kailuan Hospital Group, Hebei 063301，China;2.College Student of Hebei United University,Hebei 063000，China)

Objective:To study the effects of total flavones of buckwheat flower and leaf on intestinal smooth muscle activities and its menchanism.Methods:Effects of different doses of FBFL on normal intestinal in mouse were detected by Propulsive method.Different concentrations.Results:FBFL could promote propulsive rate of the normal mice. But the effect of TFBFL was weaker than Magnesium sulfate(P<0.01). Antagonism of TFBFL show dose dependently on atropine inhibition in intestinal peristalsis. (P<0.01), showed dose dependent (P<0.01).Conclusion:FBFL has excitatory effects on the intestinal smooth muscle. The mechanism may be related with the activation of the M receptor.

Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf(TFBFL);Intestinal Smooth Muscle; Shrinkage；Atropine

2015-01-08

河北省唐山市“十二五”重點科技支撐項目(10130203-3)

吳立國(1981-)，河北省開灤醫療集團錢家營醫院主治醫師,研究方向為心腦血管疾病。

韓淑英(1959-)，女，河北聯合大學教授，碩士生導師，研究方向為中藥藥理學。E-mail:shuyinghan59@126.com

R285.5

A

1673-2197(2015)11-0014-02

10.11954/ytctyy.201511005