HPLC測定白鮮皮配方顆粒中梣酮含量

孫晶波，姜國志

(1.石藥集團恩必普藥業有限公司，河北 石家莊 052160；2.中藥注射劑研發國家地方聯合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

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HPLC測定白鮮皮配方顆粒中梣酮含量

孫晶波1，姜國志2*

(1.石藥集團恩必普藥業有限公司，河北 石家莊 052160；2.中藥注射劑研發國家地方聯合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

目的：考察HPLC測定白鮮皮配方顆粒中梣酮含量的分析方法。方法：DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱，以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm。結果：梣酮的線性范圍為0.06056～2.4224μg，含量為42mg/g，回收率為98.5%，RSD為0.86%。結論：該法簡便準確，適用于白鮮皮配方顆粒的質量控制。

HPLC；白鮮皮；配方顆粒；梣酮；含量測定

中藥配方顆粒是根據處方中藥物的不同性質選用不同制劑工藝制備而成的顆粒狀劑型，具有快捷、簡單、方便、衛生的特點[1]。白鮮皮配方顆粒由蕓香科植物白鮮DictamnusdasycarpusTurcz.的干燥根皮制成配方顆粒，有清熱燥濕、祛風解毒的作用，用于治療濕熱瘡毒、黃水淋漓、濕疹、風疹、疥癬瘡癩、風濕熱痹、黃疸尿赤等癥[2]。梣酮是白鮮皮的主要化學成分之一，具有良好的保肝降酶和抑制肝纖維化、抑菌、殺蟲等活性[3]，其含量測定主要采用HPLC法[4]，本研究重點考察白鮮皮配方顆粒中梣酮含量HPLC法檢測的可行性。

1 實驗材料

高效液相色譜儀：戴安U3000(帶二極管陣列檢測器)；DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱；賽多利斯股份公司CPA225D電子分析天平(德國)；甲醇為色譜純試劑(Fisher Scientific)，水為純化水；梣酮對照品購自中國食品藥品檢定研究院(批號：1117000-200501)，白鮮皮配方顆粒樣品(3批，批號：100209,100210,100211)由神威藥業集團有限公司提供。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液配制

稱取梣酮對照品30.28mg置于100mL量瓶中，用甲醇溶解、定容、搖勻，即得對照品儲備液；再精密量取此儲備液5mL置25mL量瓶中，用甲醇定容、搖勻，即得對照品溶液。

2.2 供試品溶液制備

取白鮮皮配方顆粒適量，研細，精密稱定3g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3 色譜試驗

以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm。分別取上述對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入色譜儀，結果見圖1、圖2。

圖2 供試品溶液HPLC圖譜

2.4 線性關系考察

精密吸取梣酮對照品溶液1.0、5.0、10μL，梣酮對照品

儲備液4.0、6.0、8.0μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以峰面積積分值為縱坐標，梣酮進樣量(μg)為橫坐標，得回歸方程為Y=43.363X+1.005，R=0.999 95，結果梣酮在0.060 56～2.422 4μg范圍內呈良好的線性關系。

2.5 精密度實驗

精密吸取對照品溶液(60.4μg/mL)10μL，連續進樣6次，按上述色譜條件測定峰面積，結果梣酮峰面積RSD=0.26%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩定性試驗

分別精密吸取同一供試品溶液10μL，每隔2h進樣1次，測得梣酮的峰面積RSD為0.86%(n=5)，表明梣酮在8h內穩定性良好。

2.7 重復性實驗

取同一批白鮮皮樣品，按上述方法制備供試品溶液6份，在上述色譜條件下吸取10μL進樣，測定梣酮含量，結果其峰面積RSD為0.98%(n=6)，表明重復性良好。

2.8 加樣回收試驗

分別向6個具塞錐形瓶中加入上述梣酮對照品儲備液5、5、10、10、20、20mL，揮干溶劑，再精密稱取白鮮皮配方顆粒細粉約1.5g，加入錐形瓶中，按“2.2”制備回收率試驗供試品溶液，在上述色譜條件下進樣分析，梣酮的平均回收率為98.5%，RSD為0.86%，結果見表1。

表1 回收率試驗結果

2.9 樣品測定

取3批樣品，按“2.2”制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣分析，計算白鮮皮配方顆粒中梣酮含量，見表2。

表2 樣品含量測定結果

3 討論

本研究旨在尋找白鮮皮配方顆粒中梣酮含量的質量控制方法，經過查找文獻、初步試驗，確定藥典方法可用于此配方顆粒的含量測定。梣酮在190～400nm做全波長掃描，其最大吸收波長在236nm處；流動相甲醇-水(55∶45)經過比例調節，確定此比例評價最佳；經過多品牌C18色譜柱的試驗，確定DIONEX Acclaim?120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色譜柱效果最佳。研究表明，DIONEX Acclaim?120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色譜柱，以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm的色譜條件適用于白鮮皮配方顆粒梣酮含量的測定。

[1] 符穎.淺談中藥配方顆粒的優勢和存在的問題[J].中國熱帶醫學，2006，6(4)：682-683.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京：中國醫藥科技出版社,2010：102-103.

[3] 李翔，張新中，鄧赟，等.從白鮮皮中同時制備梣酮、白蘚堿、黃柏酮單體的方法[J].四川大學學報，2007,39(4)：68-72.

[4] 原春蘭，楊得鎖.RP-HPLC測定白鮮皮中梣酮含量[J].中國中藥雜志，2006,31(12)：992-994.

(責任編輯：魏 曉)

Determination of Fraxinellone in Dittany Bark Dispensing Granules by HPLC

Sun Jingbo1，Jiang Guozhi2*

(1.CSPC NBP Pharmaceutical Co.,Ltd,Shijiazhuang 052160,China；2. State-Local Joint Engineering Laboratory of New Drugs Development Technology for TCM Injection，Shijiazhuang 051430，China)

Objective:To determine the content of Fraxinellone in Dittany bark dispensing granules by HPLC.Methods:DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm) column was used，Mobile phase consisted of methanol-Water(55∶45)；UV detector wavelength was set at 236nm. Results:The linearity was from 0.06056 to 2.4224μg for fraxinellone，The content is more than 42mg/g，the average recovery was 99.8%，RSD 1.39%.Conclusion:The method is handy and accurate, and can be used for the quality control of Dittany bark dispensing granules

HPLC，Dictamnus Dasycarpus Turcz，Dispensing granules，Fraxinellone，Content Determinlation

2014-11-14

河北省科技計劃項目(中藥配方顆粒制備工藝及質量標準研究項目)[14272504D]

孫晶波(1982-)，女，石藥集團恩必普藥業有限公司工程師，研究方向為藥品研發。

姜國志(1981-)，男，中藥注射劑研發國家地方聯合工程實驗室工程師，研究方向為藥品工藝、質量研究及產業化。E-mail：15931199089@163.com

R284.2

A

1673-2197(2015)07-0016-02

10.11954/ytctyy.201507008