HPLC法測定不同采收期三七中有效成分含量

2015-04-26 09:03:21龍揚

亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2015年7期

龍揚

(川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中藥房，四川南充 637000)

龍揚

(川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中藥房，四川南充 637000)

目的：采用HPLC法測定不同采收時間(2月、10月)三七中三七皂苷R1,人參皂苷Rg1及Rb的含量,比較2月三七和10月三七的質(zhì)量差異。方法：色譜柱填料:十八烷基鍵合硅膠；流動相:乙氰-水(梯度洗脫);儀器：Waters 2487-1525-717高效液相色譜儀。結(jié)果：10月三七的皂苷總含量比2月三七含量高。結(jié)論：在初秋采收三七較好。

三七；皂苷R1；人參皂苷Rg1；人參皂苷Rb1；HPLC法；采收期

三七是我國名貴中藥材，是五加科人參屬的一個種[1], 具有活血化瘀、活血定痛的功效,被譽為血癥良藥、傷科要藥。產(chǎn)于我國云南、廣西、貴州、四川等省[2]。許多復(fù)方制劑如云南白藥、血塞通等中成藥中均含有三七成分。三七含有多種人參皂苷類活性成分[3],如人參皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1等,總皂苷成分含量可達(dá)8%以上。本實驗采用HPLC法測定不同采收時間(2月、10月)三七中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1及Rb1的含量，對不同采收季節(jié)的三七進(jìn)行質(zhì)量評價。

1 儀器與試藥

儀器：Waters 2487-1525-717高效液相色譜儀；粉碎機(jī)四號篩；100mL具塞錐形瓶(8個)、電子天平、水浴鍋。

藥材:三七根頭(購于昆明菊花村中藥材現(xiàn)代市場,經(jīng)川北醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院原料室鑒定,剪口三七由昆明制藥集團(tuán)提供);三七皂苷R1、人參皂苷Rg1及Rb1對照品由昆明制藥集團(tuán)提供(集團(tuán)內(nèi)部標(biāo)定(R1：8.9%,Rg1：32.7%,Rb1：35%))；乙氰(進(jìn)口色譜純) ；甲醇為進(jìn)口色譜純；水為注射用水。

2 方法

2.1 色譜柱

AgilentC18色譜柱 ;PN:883700-704;流動相:乙氰-水(梯度洗脫); 流速:1.0mL/min ；柱溫：35℃；進(jìn)樣量:10μL；檢測波長:203nm。

2.2 供試品溶液的制備

取同一批不同位置三七藥材十頭,用粉碎機(jī)打碎,用四號過篩,取本品粉末(過四號篩)0.6g，加入甲醇50mL，稱定重量，放置過夜, 于次日60℃水浴微沸2h，放冷后，重新稱定重量，用甲醇補(bǔ)足所缺失的重量,搖勻濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3 對照品溶液的制備

稱取三七對照品適量，用甲醇配成含三七皂苷R1 0.1mg/mL,人參皂苷Rg1及Rb1 0.4mg/mL。依照“2.1”項下色譜條件及檢測條件，測得三七對照品色譜。

2.4 理論塔板數(shù)及分離度計算

理論塔板數(shù)=5.54×4.65×4.65/0.1/0.1=11 979；分離度=2×(4.65-3.55)/(0.3+0.8)=2。經(jīng)計算，理論塔板數(shù)大于藥典所規(guī)定的4 000,且分離度較好。

2.5 不同生長年限的三七皂苷含量比較[4]

不同生長年限三七皂苷含量見表1。

表1 不同生長年限的三七皂苷含量比較

2.6 同一產(chǎn)地不同產(chǎn)期三七中總皂苷含量比較

三七均來自寶馬藥材經(jīng)營部，根據(jù)收集的同一產(chǎn)地不同采挖期三七總皂苷含量對比可知,從9月份開始到12月份采挖的三七剪口含量較高,而在1-8月這段時間采收的三七剪口皂苷含量較低,基本符合二年生三七鮮干比重的變化。見表2。(數(shù)據(jù)來源：川北醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院原料室、儀器室)。